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  • 简介:摘要目的探讨PCR-高分辨熔解曲线(HRM)法在Kidd血型基因分型中的应用。方法采用简单随机抽样法,选择2019年10月至11月,于深圳市血液中心参加无偿献血的256例献血者为研究对象。本组献血者年龄为18~60岁;男性献血者为142例,女性为114例。采用血型血清学试验方法对本组献血者全血标本的红细胞抗原表型进行检测。采用PCR-SSP和PCR-HRM法对本组献血者的DNA标本进行Kidd血型基因分型。对于基因分型与血型血清学检测结果不一致的标本,则通过JK基因第9外显子直接测序法进行确认。本研究遵循的程序符合2013年修订版《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求,并且于献血前与所有献血者签署《献血者知情同意书》。结果①本组256例无偿献血者全血标本的血型血清学检测结果显示,Jk(a-b+)、Jk(a+b+)和Jk(a+b-)表型献血者分别为86、109和61例。②本组256例献血者基因组DNA标本的PCR-SSP和PCR-HRM法的Kidd血型基因分型结果一致,JKB/JKB、JKA/JKB和JKA/JKA基因型献血者分别为82、115和59例。③ 22例(8.6%,22/256)献血者的血型血清学表型与基因分型结果不一致。其基因组DNA标本经JK基因第9外显子直接测序结果显示,JK基因第9外显子存在c.838 G>A突变,与JKA/JKB基因分型结果相符。结论本研究建立的PCR-HRM法可准确进行Kidd血型基因分型,该方法可以有效地辅助Kidd血型精准鉴定。在进行Kidd血型鉴定的实际工作中,可联合血型血清学和PCR-HRM法,以提高Kidd血型鉴定准确度。

  • 标签: Kidd血型系统 基因型 基因分型技术 多态性,单核苷酸 高分辨率熔解曲线 基因分型 JK基因
  • 简介:目的分析比较实时荧光PCR与涂片镜检、培养三种方法在结核杆菌检测的差异。方法对我院疑似结核病患者的临床标本同时进行实时荧光PCR检测、涂片镜检和培养,将三组检测结果进行比较。结果215例疑似肺结核患者痰标本同时采用实时荧光PCR、涂片镜检和培养三种方法检测,阳性检出率分别为46.5%、32.6%和44.7%。实时荧光PCR法与涂片镜检法的阳性率间比较有统计学意义,实时荧光PCR法与培养法的阳性率间比较无统计学意义。112例疑似其他类型结核病患者的胸腹水、脑脊液、穿刺液和尿液等非痰标本同时采用上述三种方法检测,阳性率分别为18.8%、3.6%和16.1%。统计学意义同上。结论实时荧光PCR检测技术在临床上对结核病的诊断和鉴别具有较好的应用价值。

  • 标签: 实时荧光PCR 结核杆菌 阳性率
  • 作者: 焦晨
  • 学科: 经济管理 > 企业管理
  • 创建时间:2014-07-17
  • 出处:《价值工程》 2014年第7期
  • 机构:ApplicationofPCR-DGGEMethodintheStudyofMicrobialDiversityinWater焦晨淤JIAOChen曰夏甜于XIATian(淤内蒙古化工职业学院材料工程系,呼和浩特010070;于内蒙古化工职业学院思政理论教研部,呼和浩特010070)(淤DepartmentofMaterialsEngineering,InnerMongoliaVocationalCollegeofChemicalEngineering,Hohhot010070,China;于IdeologicalandPoliticalTheoryTeachingandResearchDepartment,InnerMongoliaVocationalCollegeofChemicalEngineering,Hohhot010070,China)
  • 简介:目的:建立一种快速、稳定、灵敏且可定量的检测马尔尼菲青霉病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法。方法:根据马尔尼菲青霉ITS序列,设计并合成引物,通过常规PCR扩增目标序列后,将鉴定正确的目的基因片段克隆入pGEM-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBRGreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,得出拷贝数与循环阈值之间的线性关系曲线表达式,并做灵敏性、特异性试验。结果:荧光定量PCR标准曲线阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数为1.938,最低检测的拷贝数为8.5个/反应管。结论:建立了检测马尔尼菲青霉病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断及定量分析感染程度及对治疗的指示作用奠定了良好的基础。

  • 标签: 马尔尼菲青霉病 SYBR Green 实时定量PCR
  • 简介:摘要目的对比并分析荧光定量PCR检测结核杆菌DNA拷贝数与涂片抗酸染色镜检结果。方法选取2016年1月~2016年12月在我中心确诊的结核病患者150痰样本作为结核组,另选取同期来我中心就诊的无结核表现的其他病例患者的40份痰样本作为对照组,两组分别同期进行荧光定量PCR检测和涂片抗酸染色镜检,对检测结果进行比较分析。结果荧光定量PCR法检测结核杆菌阳性率为72.67%,明显高于抗酸涂片法的26.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。150例痰样本中,抗酸涂片结果阴性112例,阳性34例,疑似4例。在112例阴性结果中,有40例荧光定量PCR检测为阴性,72例检测为阳性,其中结合杆菌DNA拷贝数以102~103数量级居多;38例阳性(含疑似)结果中,有1例荧光定量PCR检测为阴性,37例检测为阳性,其中结合杆菌DNA拷贝数以103~104数量级居多,结果显示,DNA拷贝数数量级与涂片阳性程度基本呈正相关性。结论对于结核杆菌的检测,采用荧光定量PCR法较涂片抗酸染色法,敏感度更高,特异性更强,且前者检测结核杆菌DNA拷贝数与后者镜检阳性程度具有较好的相关性,两种方法联合使用可为临床诊疗提供可靠的依据。

  • 标签: 结核杆菌 荧光定量PCR DNA拷贝数 涂片抗酸染色
  • 简介:摘要:目的:探讨分析实时荧光PCR检测腹泻患者肠致泻性大肠杆菌的分布。方法:此次研究,获取我院之中150例腹泻患者的粪便标本,并借助实时荧光PCR检测,对病原菌做检测,分析不同大肠杆菌分布情况。结果:150例样本中有肠致泻性大肠杆菌40例,检出率为26.67%;其中检出肠致病性大肠杆菌占比47.50%, 肠黏附性大肠杆菌占比 30.00% ;肠出血性大肠杆菌占比 12.50% ;肠产毒性大肠杆菌占比7.50%, 肠侵袭性大肠杆菌占比 2.50%;<5岁患者致泻性大肠杆菌检出率较高。结论:腹泻患者的肠致泻性大肠杆菌检测中,以肠致病性、肠黏附性为主,年龄小于5岁患者致泻性大肠杆菌感染几率较高。

  • 标签: 腹泻 实时荧光PCR检测 大肠杆菌 病原菌
  • 简介:【摘 要】目的:在宫颈癌筛查中采用实时荧光定量PCR检测HPV-DNA,探究临床诊断价值。方法:以2018年4月至2020年4月期间在我院进行的200例宫颈癌筛查的病患作为研究对象,所有病患均采用实时荧光定量PCR检测HPV-DNA和杂交捕获2代技术(HC-Ⅱ)检测HPV-DNA。分析两种检测方式的检测结果,进而判断检测方式的诊断价值。结果:经病理诊断检测出HPV-DNA阳性病患有126例,以此作为金标准。经实时荧光定量PCR检测后,HPV-DNA阳性病患有106例,诊断正确率为84.12%;经杂交捕获2代技术(HC-Ⅱ)检测后,HPV-DNA阳性病患有74例,诊断正确率为58.73%。结论:在宫颈癌筛查中采用实时荧光定量PCR检测HPV-DNA,具有较高的检测价值,其诊断结果准确率高,降低误诊率,可有效筛查宫颈癌患者。

  • 标签: 实时荧光定量PCR HPV-DNA 宫颈癌筛查 杂交捕获2代技术(HC-Ⅱ)
  • 简介:【摘要】目的:讨论阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床应用价值。方法:入选100例细菌性阴道炎患者主要于2021年1月-2021年9月接受病情诊疗。入选者在阴道细菌经验中均采取PCR检验法和细菌培养法。观察指标:检验阳性率、不同菌种检出率。结果:PCR检验组检验阳性率为88%,阴性率为12%;细菌培养组检验阳性率为75%,阴性率为25%,两组相比统计学差异显著(P<0.05)。PCR检验组肠球菌检出率为93.55%、棒状杆菌检出率为81.82%、加特纳菌检出率为86.11%;细菌培养组肠球菌检出率为48.39%、棒状杆菌检出率为57.58%、加特纳菌检出率为58.33%,两组相比统计学差异显著(P<0.05)。结论:阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法后发现,PCR检验法阴道细菌检出阳性率更高,且利于不同类型菌种的有效鉴别。

  • 标签: PCR检验法 细菌培养法 阴道细菌 细菌性阴道炎
  • 简介:摘要:目的:分析在肺结核早期诊断中PCR检验的价值及准确率。方法:从2020年5月至2021年7月期间抽取本院收治的40例肺结核患者,所有患者均在采用PCR检验、PPD检验,对比两种检验的阳性率与早期诊断符合率及AUC值。结果:经检验,PCR检验出阳性者35例,阳性率87.5%;PPD检验出阳性者18例,阳性率45.0%,两种检验方式阳性率相比差异有统计学意义,P

  • 标签: 肺结核 早期诊断 PCR检验 准确率
  • 简介:摘要:PCR试验在兽医生物安全实验室中是一种常见的试验手段,全称为聚合酶链式反应。本文对兽医生物安全实验室PCR试验中的污染与防制对策进行了讨论。在兽医生物安全实验室中检验品被污染、PCR实验材料被污染、PCR扩增产物污染以及实验室环境污染都会影响实验的精确性,因此要规范试验操作流程。

  • 标签: 兽医生物安全实验室 PCR试验 污染与防制
  • 简介:摘要:实时的荧光RT—PCR检测技术,是在常规PCR平台上发展出来的量化PCR工艺技术,通过在PCR的反应系统中添加了大量荧光反应基团,之后再经过大量荧光数据的积累,就可以即时的监控了整个PCR流程,之后又利用x射线断层成像数据的标准曲线,对所有未知模型都实现了定性分析。

  • 标签: RT—PCR 活禽和禽组织 禽流感病毒 研究
  • 简介:【摘要】目的:对比RT-LAMP与realtime-PCR在手足口检测中的应用效果。方法:试验选取时间段为2020年5月~2021年6月,从我中心收治疑似为手足口病患儿86例,将其依据不同检查方法分为对照组与试验组,试验组使用RT-LAMP方法进行诊断,对照组使用realtime-PCR进行诊断,以两种方法联合检查作为金标准,比较两组的检出情况与敏感度与特异度。结果:对比检出情况与敏感度与特异度,试验组更佳。结论:在临床上采用realtime-PCR的检查手段对于手足口病更为灵敏特异。

  • 标签: realtime-PCR RT-LAMP 手足口病
  • 简介:【摘要】目的:将60名女性作为研究对象,针对其阴道分泌物检测结果进行评价,探讨分析将PCR检验法和细菌培养法应用于女性阴道分泌物检测工作开展的意义。方法:实验时间段设置在2019年4月至2021年4月,在该时间段内收集我院中60例女性作为研究对象,对其阴道分泌物标本进行检验,分别采用细菌培养法与PCR检验法进行诊断,分析患者的感染状况以及感染特征。结果:在本次研究结果中显示,PCR检验法的诊断准确率相较于细菌培养法的诊断准确率更高,差异进行对比分析后显著存在(P<0.05)。结论:针对女性的阴道分泌物进行检测后,可以发现女性细菌性阴道炎的发病率相对来说较高,而在针对患者病情进行诊断时,将PCR技术应用于患者的病情诊断中能够获得较为良好的诊断效果,确定患者的病情状况,使后续的治疗工作更为顺利的开展。

  • 标签: 阴道分泌物 细菌性阴道炎 真菌性阴道炎 清洁度 检测分析
  • 简介:【摘要】目的:分析在临床诊断中实施乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测的应用价值。方法:将本院2020年2月~2022年6月期间收治的64例乙型肝炎病毒患者作为本次研究对象(其中HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)患者25例,HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)患者23例,HBsAg(+)、抗-HBc(+)患者16例),对所有患者分别实施PCR检验HBV-DNA检验(研究组)及ELISA检验(参照组),比较两种检验技术的诊断价值。结果:两组检验诊断后对比的各项指标的差异较为显著(P<0.05),统计学有意义。结论:在临床检验乙型肝炎病毒的过程中实施DNA实时荧光定量PCR检测的特异性、敏感度较高,能准确真实的反映HBV在体内的复制程度,为患者治疗方案的制定提供可靠的参考依据。

  • 标签: 乙型肝炎病毒 DNA实时荧光定量 PCR检测 应用价值
  • 简介:【摘要】目的:探究在阴道细菌检验的过程中实施细菌培养法及PCR检验法检验的价值和有效性。方法:针对本院妇科收治的实施妇科阴道细菌检验的患者95例作为本次研究对象(2020年2月~2022年6月),分别为95例患者实施PCR检验法(研究组)、细菌培养法(参照组)进行检验,对比两种检验方式的检验价值。结果:研究组的阳性检出率高于参照组(P=),且研究组对于各类细菌的检出率也存在一定的差异(P<0.05),有统计学意义。结论:在阴道细菌检验的诊断过程中实施PCR检验法的诊断价值高于细菌培养法,且操作便利能为疾病的确诊提供可靠的参考依据,达到预期的诊断目的。

  • 标签: 阴道细菌检验 PCR检验法 细菌培养法 诊断价值
  • 简介:摘要:高中生物学基因工程的教学中PCR引物是在必修二DNA复制学习时没有学习到的内容,学生感觉难以理解,比如引物是什么,为什么需要引物,合适的引物怎么设计,怎么和基因工程有机的结合起来。教师可以结合学生已经掌握的知识在课堂中创设问题,解决这些难点问题。

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  • 简介:【摘要】目的:分析实时荧光定量PCR检测妊娠晚期孕妇B族链球菌感染的价值。方法:选取2020年1月~2021年2月我院100例妊娠晚期孕妇,所有孕妇均接受实时荧光定量PCR检测和细菌培养两种检测方法,以细菌培养结果为参照,分析实时荧光定量PCR检出率。结果:100例受检孕妇中13例检测结果为B族链球菌感染,实时荧光定量方法中12例为阳性,88例检测结果为阴性,灵敏度为高于常规细菌培养。结论:妊娠晚期孕妇可采取实时荧光定量PCR进行B族链球菌感染检测,从而提升B族链球菌感染检出率,尽早采取治疗措施,从而保障母婴安全。

  • 标签: 实时荧光定量PCR检测 妊娠晚期 B族链球菌 孕妇感染
  • 简介:摘要:目的 对性病临床标本实验诊断应用PCR检验技术的价值进行研究。方法 选择本院在2018年5月至2022年12月期间采集的39例患者的性病临床标本,均采取常规培养和PCR检验技术诊断,以患者性病病原体镜检为金标准,对检验结果进行记录和对比。结果 常规培养准确率为74.36%,特异度为33.33%,灵敏度为81.82%,PCR检验技术准确率为94.87%,特异度为83.33%,灵敏度为96.97%;PCR检验准确率和灵敏度均高于常规培养(P<0.05),两种诊断方式特异度对比无明显差异(P>0.05)。结论 PCR检验技术在性病诊断中应用价值较大,可有效提高诊断准确率、敏感度和特异度,未来应进一步在临床推广。

  • 标签: PCR检验技术 性病 标本实验诊断 准确率
  • 简介:摘要:目的 对性病临床标本实验诊断应用PCR检验技术的价值进行研究。方法 选择2021年3月至2022年3月期间在本院做性病临床标本实验诊断的89例疑似性病患者,对所有疑似患者均做常规培养和PCR检验技术,以病理诊断为金标准,比较两种诊断方式的准确率、特异度和灵敏度。结果 常规培养准确率为77.53%,特异度为25.00%,灵敏度为87.01%,PCR检验准确率为96.63%,特异度为83.33%,灵敏度为98.70%。PCR检验准确率、特异度和灵敏度均高于常规培养(P<0.05)。结论 PCR检验技术因其较高的准确率、特异度和灵敏度,可用于性病临床标本实验诊断,未来具备较大临床推广价值。

  • 标签: PCR检验技术 性病 临床标本 诊断结果