简介：结果电泳检测及纯化后DNA产物测序分析均显示TDPCR扩增产物条带特异性、效率较普通PCR扩增产物高,因此我们在VHL基因突变筛查中使用了普通PCR和TDPCR两种方法,在许多普通PCR无产物的基因扩增

简介：[摘要 ] 目的：探讨长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)干扰后，在人支气管上皮细胞（ the human bronchial epithelial cells， 16HBE）中的表达情况。方法 :应用 real-timePCR方法检验 lncRNA- ENST00000414355干扰效果。结果 : 正常 16HBE细胞中 ENST00000414355干扰 48h后，三条阳性序列的实验组 ENST00000414355表达均下降，都具有统计学意义 P值均 <0.0001；在氯化镉转化 16HBE成瘤细胞中 ENST00000414355干扰后，第一条阳性序列转染下达到沉默效果，且具有统计学意义 P<0.0001；在氯化镉转化 16HBE第 35代细胞在 ENST00000414355三条阳性序列转染下没有出现沉默效果所示。结论： ENST00000414355在正常 16HBE细胞中干扰效果最明显，在氯化镉转化 16HBE成瘤细胞中只有一条序列有干扰效果。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)干扰后，在人支气管上皮细胞（thehumanbronchialepithelialcells，16HBE）中的表达情况。方法应用real-timePCR方法检验lncRNA-ENST00000414355干扰效果。结果正常16HBE细胞中ENST00000414355干扰48h后，三条阳性序列的实验组ENST00000414355表达均下降，都具有统计学意义P值均<0.0001；在氯化镉转化16HBE成瘤细胞中ENST00000414355干扰后，第一条阳性序列转染下达到沉默效果，且具有统计学意义P<0.0001；在氯化镉转化16HBE第35代细胞在ENST00000414355三条阳性序列转染下没有出现沉默效果所示。结论ENST00000414355在正常16HBE细胞中干扰效果最明显，在氯化镉转化16HBE成瘤细胞中只有一条序列有干扰效果。

简介：摘要目的探讨分析实时荧光定量PCR检测诊断结核病的应用价值。方法回顾性分析本院收治的80例结核病患者作为本次研究对象。对患者行实时荧光定量检查以及涂片抗酸染色法检查，对比分析两种不同检验诊断方法的结果。结果通过对患者行涂片抗酸染色法检测，发现最终的阳性检测共计为33例41.25％，对患者行实时荧光定量检验，发现最终的阳性检测共计为69例86.25％，实时荧光定量检验诊断方法检出率，相较涂片抗酸染色法检测明显较高，差异显著（P＜0.05）。结论通过对结核病患者行实时荧光定量检验方法诊断，可以取得较高的诊断率，且具有较高的灵敏性和特异度，可以及早为结核病患者的早期治疗提供临床依据，在一定程度上对患者的治疗预后起到直接影响，可以在临床中推广应用。

简介：摘要在当今社会，食品受到污染的情况越来越严重，严重损害了人们的身体健康。本文从PCR的角度入手，通过对PCR及其改进技术的研究，分析其在食品检测中的应用。

简介：以期建立可用于地龙ISSR－PCR分析的最佳反应体系和扩增程序,模板DNA的量、引物浓度、镁离子浓度和Taq酶的量、引物退火温度等都会影响ISSR扩增,将地龙ISSR-PCR扩增体系中的dNTPs浓度定为0.2mmol·L-1

简介：确定了引物809以柴胡基因组DNA为模板扩增的最佳退火温度为54.5℃（见图2a）,因此选择0.3μmol/L作为柴胡ISSR-PCR反应体系中最佳的引物浓度,本实验在25μlISSR-PCR反应体系中对TaqDNA聚合酶设置了0.5

简介：摘要目的探讨和研究实时荧光逆转录聚合酶链式反应在流感病毒检测中的应用效果。方法采用实时荧光PCR对617例流感样病例患者的咽拭子标本进行流感病毒核酸的测定，对检测出的阳性标本采用MDCK进行培养并分离，对两种方法的检测结果进行分析，对比特异性及灵敏度。结果本组617例标本中实时荧光PCR共检测出阳性标本152例，阳性率24.6%；细胞培养法在此152例阳性标本中共分离出流感病毒79例，阳性率12.8%，实时荧光PCR检测阳性率显著高于细胞培养法，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论实时荧光PCR能够快速有效的检测出流感病毒核酸，是实验室快速诊断的有效手段。

简介：摘要本文基于学科交叉融合的教育教学思想，把一道有关求解PCR技术中目的基因片段数的问题，通过建立数学模型化归为一道求解数列通项公式的数学问题，这不仅做到创新、化难为易，而且很好了培养了学生综合运用各学科的能力，为培养创新、综合型人才奠定了基础。

简介：摘要目的分析聚合酶链反应PCR检验在肺结核早期诊断中的应用效果。方法将我院在2017年11月~2018年11月撷取的120例肺结核患者，按照随机平行分组方法，分为研究组、参照组，每组均为60例。研究组经PCR检查，参照组经皮肤结核菌素纯蛋白衍生物PPD检查，对比两组的诊断效果。结果研究组的诊断阳性率、ROC曲线下的面积AUC情况，和参照组进行比较，均有明显的差异性，P<0.05。结论肺结核早期诊断中采用PCR检验，可提高诊断阳性率，存在临床方面应用、推广的意义。

简介：建立一种检测HSV2的实时定量PCR,而实时定量PCR检测出HSV2DNA阳性标本有l9例,HSV2的FQPCR定量检测 

简介：为了提高抗病性分子标记检测的效率,为番茄病害检测及多抗品种选育提供技术依据,本研究通过改良CTAB法、96孔深孔板快速提取番茄微量叶片DNA;利用抗根结线虫病Mi标记,在L16(45)正交设计试验基础上,采用直观量化分析和方差分析两种方法,对番茄实用化PCR分子标记PCR反应的5个因素(引物,Mg2+,dNTPs,模板DNA和Taq酶)进行优化;随后分别筛选黄化曲叶病毒病、烟草花叶病毒病、根结线虫病、枯萎病、叶霉病和颈腐根腐病6种病害的8个实用化PCR分子标记PCR程序的退火温度;并对循环次数进行筛选;最后利用优化后的PCR体系与程序对供试的1442份番茄材料(包括番茄种质资源,群体材料,组合及品种)进行抗病性鉴定。结果表明番茄实用化PCR分子标记的PCR最佳反应体系(20μL)为引物0.5μmol/L、Mg2+1.5mmol/L、dNTPs0.3mmol/L、DNA480ngDNA、聚合酶1.0UTaq;PCR程序中8个分子标记共同最适退火温度为56℃,最佳循环次数为33次;筛选出585份多抗(含2种以上的抗病基因)番茄材料,可作为中间材料或亲本材料进行多抗品种选育。该实用化PCR分子标记的PCR体系的建立为番茄利用抗病基因分子标记检测与筛选多抗种质资源、品种或群体材料提供了标准化的程序。

简介：

简介：摘要探讨检测新鲜海螺样品中单增李斯特菌的双重PCR快速检测方法。为检验方法可行性，对市场随机抽取的126份新鲜海螺样品进行检测，选择增菌后3h内快速检出PCR阳性样品26份，应用国家标准方法（GB/4789.30-2010）对PCR阳性结果进行验证，验证结果表明PCR阴性样品中未有单增李斯特菌检出；同时出现两特异条带的PCR阳性样品均有单增李斯特菌检出，只出现单一条带的PCR阳性样品中有1份未检出单增李斯特菌，该双重PCR检测方法的假阳性率为0.99%。

简介：摘要：探讨检测新鲜海螺样品中单增李斯特菌的双重 PCR快速检测方法。为检验方法可行性，对市场随机抽取的 126份新鲜海螺样品进行检测，选择增菌后 3h内快速检出 PCR阳性样品 26份，应用国家标准方法（ GB/4789.30-2010）对 PCR阳性结果进行验证，验证结果表明： PCR阴性样品中未有单增李斯特菌检出；同时出现两特异条带的 PCR阳性样品均有单增李斯特菌检出，只出现单一条带的 PCR阳性样品中有 1份未检出单增李斯特菌，该双重 PCR检测方法的假阳性率为 0.99%。

简介：摘要目的探讨乙肝患者HBV-DNA采用定量PCR检测的临床价值。方法选择2017年11月-2018年11月期间我院收治的疑似乙肝患者350例为研究对象，运用定量PCR法检测HBV-DNA，并且对其临床资料进行回顾性分析。结果本组的350例患者中，68例确诊为乙肝，检出率为19.43%，其中23例为重度乙肝，占33.82%，18例为中度，占26.47%，27例为轻度，占39.71%，其中轻度组的HBV-DNA含量高于重度组（P<0.05），并且中度组的HBV含量低于轻度和重度组（P<0.05）；同时，240例为HBeAg（-）/HBeAg（+），110例为HBeAg（+）/HBeAb（—），并且两组的HBV-DNA含量比较有统计学意义（P<0.05）。结论大部分抗-HBE阳性患者的HBV依然持续复制，运用定量PCR检测，有助于明确患者病情。

简介：　　摘 要：近年来，人们在日常生活中经常会遇到食品卫生安全问题，各种食品安全事故频发，受到社会各界的广泛关注，在此环境下，国家不断加大对食品卫生安全问题的检查与惩处力度，其中多重 PCR检测技术得到比较广泛的应用实践，并取得良好的效果。基于此，本文以 PCR检测技术的含义与优势特点为切入点，对多重 PCR检测技术在食品微生物检测中的应用价值进行了细致分析，旨在为我国食品安全检测工作贡献一份力量。  　　关键词：多重 PCR检测技术 ;食品卫生安全 ;微生物检测  　　 Abstract: in recent years, people often encounter food safety problems in their daily life, and various food safety accidents happen frequently, which are widely concerned by all walks of life. In this environment, the state continues to increase the inspection and punishment of food safety problems, in which multiple PCR detection technology has been widely used and achieved good results. Based on this, this paper takes the meaning and advantages of PCR detection technology as the starting point, and analyzes the application value of multiple PCR detection technology in food microbe detection in detail, in order to contribute to the work of food safety detection in China.

简介：摘要目的探讨在实施阴道细菌检验过程中，分析PCR检验法以及细菌培养法的临床应用价值。方法选择我院2016年09月～2018年09月收治的阴道细菌检验患者162例作为本次实验研究观察对象；观察组81例以及对照组81例患者的分组依据为阴道细菌检验方法的不同；观察组PCR检验法；对照组细菌培养法；通过对比检出率以及特异度等，以突出PCR检验法的临床应用价值。结果在检出率以及特异度方面，两组阴道细菌检验患者之间的差异显著（P<0.05）。结论临床在实施阴道细菌检验的过程中，有效应用PCR检验法，临床表现出较高的检出率以及特异度，并且检验步骤较为便捷，最终可以获得显著的阴道细菌检验效果。

简介：摘要目的探讨在流感病毒检测中采用实时荧光定量PCR仪进行检验的临床效果。方法选择我院2018年1月至2018年12月收治180例流感病样病例为研究对象，使用咽拭子采集标本，使用实时荧光定量PCR法进行流感病毒核酸的测定，如果为阳性则执行MDCK培养同时进行分离，评估检验结果特异性、灵敏度的差异。结果实时荧光定量PCR仪检出阳性64例，阳性率为35.56%（64/180），细胞培养法分离出流感病毒35例，阳性率为19.44%（35/180），PCR仪检验阳性率高于细胞培养法，P<0.05。细胞分离培养法对实时荧光PCR法的灵敏度、特异性分别为54.69%（35/64）、100.00%（116/116）。结论对流感病毒检测采用实时荧光定量PCR仪效果更为理想，值得推广。

简介：摘要我们日常生活的环境中存在着较多的微生物群落，通过对其研究可以实现对有害病菌的控制，保证环境质量，降低其对人体的威胁。本文主要对荧光定量PCR技术在环境微生物检测中的应用进行了分析和阐述，以供参考。