简介：摘要目的探讨心肌梗死后表现为心力衰竭患者，对其血浆中miRNA表达以及ECHO心肌能量消耗的情况进行研究。方法选取我院2012年11月—2014年11月心肌梗死患者50例。将合并患有心力衰竭的30例患者作为A1组（观察组），将心功能表现正常的20例患者作为A2组（对照组）。针对所有患者miRANarray进行准确检测。结果A1组与A2组心肌梗死患者在miRNA上调以及下调超过1.5倍方面表现为显著差异（P<0.05）。在心肌能量消耗方面，A1组高于A2组心肌梗死患者明显（P<0.05）。结论通过采用基于患者外周静脉血血浆miRNAarray的方法进行分析，可以明确发现心肌梗死患者合并心力衰竭患者与心功能表现正常患者之间在miRNA表达方面存在的差异，最终为心肌梗死合并心力衰竭患者的临床治疗提供详细参考依据。

简介：摘要目的探讨miRNA-320及其靶基因内皮素-1与多囊卵巢综合征(PCOS)易感性及临床特点的关系。方法选择2017年4月—2019年4月在重庆三峡中心医院妇科门诊就诊的75例PCOS患者为研究组，再根据稳态模型评估-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为非IR-PCOS组(HOMA-IR<2.11，n＝40)和IR-PCOS组(HOMA-IR>2.11，n＝35)，选择同期门诊就诊的健康女性40名为对照组。采用自动生化分析仪测定血清生化指标，阴道超声评估卵巢体积和窦卵泡计数，多毛症Ferriman-Gallwey评分标准评估多毛症得分，ELISA测定血清内皮素-1、空腹血清胰岛素、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、总睾酮水平，RT-PCR测定血清miRNA-320表达水平。符合正态分布的计量资料比较采用两独立样本t检验或单因素方差分析，相关性分析采用Pearson相关性分析，多变量分析采用线性回归分析和二元非条件logistic回归分析。结果与对照组相比，PCOS组血清miRNA-320表达水平显著降低(t＝3.170，P<0.05)，血清内皮素-1水平显著升高(t＝5.483，P<0.05)。与非IR-PCOS组相比，IR-PCOS组血清miRNA-320表达水平显著降低(t＝－2.864，P<0.05)，血清内皮素-1水平显著升高(t＝2.513，P<0.05)。PCOS患者血清miRNA-320表达水平与多毛症得分、卵巢体积、窦卵泡计数、甘油三酯、空腹胰岛素、HOMA-IR、LH等呈负相关(r＝－0.521～－0.270，P均<0.05)，与稳态模型评估-β细胞功能指数(HOMA-β)呈正相关(r＝0.022，P<0.05)。多毛症得分和HOMA-IR是PCOS患者血清miRNA-320水平的主要影响因子，miRNA-320表达水平为PCOS的独立危险因素(OR＝4.356，95% CI：2.442～11.067，P<0.001)。血清miRNA-320预测PCOS的最佳截点为0.743，曲线下面积为0.816(95% CI：0.788～0.935，P<0.001)，敏感性为80%，特异性为97.5%；血清内皮素-1预测PCOS的最佳截点为5.66 ng/L，曲线下面积为0.822(95% CI：0.804～0.959, P<0.001)，敏感性为91.7%，特异性为99.3%。结论PCOS患者血清miRNA-320表达水平显著降低，并负反馈调节内皮素-1的水平。miRNA-320与PCOS患者多毛症得分、卵巢体积、窦卵泡计数、甘油三酯、空腹胰岛素、HOMA-IR、HOMA-β、LH等呈负相关，诊断PCOS的特异性高，可作为PCOS的无创诊断生物标志物。

简介：摘要目的探讨miRNA-34a（miR-34a）靶向高迁移率族蛋白B1（HMGB1）逆转骨肉瘤细胞顺铂耐药的相关机制。方法采用剂量递增间歇作用的方法构建MG-63顺铂耐药细胞株（MG-63/DDP）。使用不同浓度顺铂（0、1、5、10、20、30 μg/ml）处理MG-63/DDP细胞，采用CCK-8法检测细胞存活率。将MG-63/DDP细胞分别转染miR-34a过表达载体（miR-34a过表达载体组）及miR-34a空表达载体（miR-34a-NC组），采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-34a的相对表达量；使用不同浓度顺铂（0、1、5、10、20、30 μg/ml）处理细胞，采用CCK-8法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡情况；采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-34a是否调控HMGB1的表达，蛋白质印迹法检测转染后细胞的HMGB1蛋白表达量。将MG-63/DDP细胞分别转染HMGB1基因沉默载体（si-HMGB1组）及其阴性对照载体（si-NC组），采用蛋白质印迹法检测HMGB1蛋白表达量；CCK-8法检测细胞存活率。结果MG-63/DDP细胞株构建成功。不同浓度顺铂作用后，MG-63/DDP细胞存活率均高于MG-63细胞（均P<0.01）。MG-63/DDP细胞和MG-63细胞对顺铂的半数抑制浓度（IC50）分别为25.80 μg/ml和0.47 μg/ml。MG-63/DDP细胞中miR-34a相对表达量低于MG-63细胞（0.46±0.04比1.02±0.05，t=15.14，P<0.01）；与miR-34a-NC组相比，miR-34a过表达载体组MG-63/DDP细胞中miR-34a相对表达量增加（1.67±0.09比1.00±0.02，t=-12.58，P<0.01）。miR-34a过表达载体组、miR-34a-NC组细胞存活率随着顺铂浓度增加而降低，5~30 μg/ml顺铂作用后，miR-34a过表达载体组细胞存活率均低于miR-34a-NC组（均P<0.01）。20 μg/ml顺铂处理24 h后，miR-34a-NC组和miR-34a过表达载体组MG-63/DDP细胞凋亡率分别为（25.1±1.7）%、（42.3±2.3）%，miR-34a过表达载体组MG-63/DDP细胞具有更高的凋亡率（P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验结果显示，与miR-34a-NC组相比，miR-34a过表达载体组能够抑制PGL3-野生型-HMGB1荧光素酶活性，差异具有统计学意义（t=6.37，P<0.01），而miR-34a过表达载体组对PGL3-突变型-HMGB1荧光素酶活性无明显抑制效果（t=0.35，P=0.74）。miR-34a过表达载体组HMGB1蛋白相对表达量低于miR-34a-NC组（0.43±0.02比1.00±0.14，t=6.98，P<0.01）。与si-NC组相比，si-HMGB1组HMGB1蛋白相对表达量及IC50均降低（均P<0.05）。结论miR-34a过表达能够增强骨肉瘤细胞MG-63/DDP对顺铂的化学敏感性，其作用机制可能与抑制HMGB1的表达有关。

简介：摘要目的探索miRNA-126对甲状腺癌SW579细胞增殖、凋亡及迁移的影响，并进一步探索其机制。方法体外培养甲状腺癌SW579细胞，利用qPCR检测人甲状腺正常Nthy-ori3-1细胞和SW579细胞miRNA-126的表达；将细胞分为空白对照组、实验组及阴性对照组，分别不做任何处理、空质粒载体进行转染、转染miRNA-126表达质粒；通过转染质粒构建miRNA-126过表达的SW579细胞；利用CCK-8实验检测细胞增殖；Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭；流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧水平变化；Western blot检测Notch-1/Akt通路相关蛋白表达，利用SPSS 21.0统计软件通过正态分布和t检验来印证。结果SW579细胞中miRNA-126表达量为（0.25±0.07），与Nthy-ori3-1细胞相比差异具有统计学意义（P<0.001）；空白对照组、实验组及阴性对照组细胞存活率为（105.70±7.61）、（98.60±5.42）及（62.70±3.82）；细胞凋亡率为（9.14±0.83）、（12.28±1.34）及（36.39±3.21）（P均<0.05）；细胞迁移率为（34.51±2.45）、（33.29±3.17）及（11.22±1.23）（P均<0.05）；活性氧水平为（1.02±0.07）、（1.08±0.11）及（6.54±0.74）（P均<0.05）。结论过表达miRNA-126能通过上调细胞内活性氧水平抑制Notch-1/Akt通路，抑制SW579细胞的增殖、迁移、诱导SW579细胞发生凋亡，为miRNA-126在甲状腺癌的研究中提供一定的理论基础。

简介：摘要目的探讨miRNA-541-5p（miR-541-5p）负调控细胞周期蛋白D1（CCND1）对结肠癌细胞增殖和迁移的影响及其相关机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-541-5p在结肠癌细胞株HT29、SW480、SW620、HCT116和正常人肠上皮细胞株HIEC以及2017年4月至2020年3月河北北方学院附属第一医院112例结肠癌手术患者肿瘤组织和癌旁正常组织中的表达水平。采用TargetScan生物信息学软件预测miR-541-5p的潜在靶基因，并通过双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和蛋白质印迹法进行验证。检测CCND1在结肠癌细胞株和结肠癌组织中的表达水平。将miR-541-5p表达水平最低的细胞分为miR-NC组（转染对照质粒）、miR-541-5p组（转染miR-541-5p模拟物）、miR-541-5p+ CCND1组（共转染miR-541-5p模拟物和CCND1），使用CCK-8法、Transwell法检测miR-541-5p和CCND1对结肠癌细胞增殖、迁移能力的影响。通过构建结肠癌裸鼠移植瘤模型观察miR-541-5p对肿瘤生长的影响。结果结肠癌患者肿瘤组织中miR-541-5p相对表达量低于癌旁正常组织（0.45±0.06比1.00±0.12，t=43.385，P<0.01）。结肠癌细胞株HT29、SW480、SW620、HCT116和正常人肠上皮细胞株HIEC中的miR-541-5p相对表达量分别为0.46±0.03、0.67±0.04、0.57±0.06、0.17±0.02和1.00±0.15，差异有统计学意义（F=5.621，P<0.01），各结肠癌细胞株miR-541-5p相对表达量均低于正常人肠上皮细胞株HIEC。选择HCT116细胞进行后续实验。TargetScan软件预测CCND1的3'UTR可能存在与miR-541-5p互补位点。双荧光素酶报告基因实验结果显示，CCND1是miR-541-5p的潜在靶基因，miR-541-5p可负调控CCND1表达。CCK-8法检测结果显示，miR-NC组、miR-541-5p组、miR-541-5p+CCND1组HCT116细胞增殖率分别为（2.00±0.16）%、（0.89±0.08）%、（2.56±0.23）%，差异有统计学意义（F=6.715，P<0.01），在miR-541-5p过表达的HCT116细胞中转染CCND1能逆转miR-541-5p对细胞增殖的抑制作用。Transwell检测结果显示，过表达miR-541-5p能抑制HCT116细胞的迁移能力，但共转染miR-541-5p模拟物和CCND1后，可逆转这种抑制作用。结肠癌裸鼠移植瘤模型中，miR-541-5p组裸鼠肿瘤质量和体积均较对照组低（均P<0.05）。结论miR-541-5p通过负调控CCND1抑制结肠癌细胞增殖和迁移，抑制结肠癌裸鼠移植瘤模型中肿瘤生长，在结肠癌中发挥抑癌因子的作用。

简介：摘要目的探讨miRNA-106b（miR-106b）对人喉鳞状细胞癌Hep-2和TU212细胞的作用及其机制。方法将Hep-2和TU212细胞分为转染miR-106b抑制序列组（实验组）、转染miR-106b竞争性阴性序列组（阴性对照组）、未进行任何干预组（空白组）。采用反转录定量聚合酶链反应（qRT-PCR）验证miR-106b抑制序列对细胞miR-106b表达的抑制效应。应用生物信息学及荧光素酶报告载体分析磷酸酶和张力蛋白同源物（PTEN）是否为miR-106b的靶基因。利用PTEN小干扰RNA（siRNA）抑制Hep-2和TU212细胞中PTEN的表达。Transwell实验和蛋白质印迹法分别检测miR-106b沉默后和（或）PTEN干扰后Hep-2和TU212细胞侵袭能力的变化及PTEN、上皮性钙黏蛋白和波形蛋白表达变化。结果实验组Hep-2和TU212细胞miR-106b相对表达量分别为0.110±0.037、0.074±0.009，较阴性对照组（1.013±0.059、1.035±0.062）均降低（均P<0.05）。Transwell实验中，实验组Hep-2和TU212细胞较阴性对照组每个视野侵袭细胞数少[（37.09±4.02）个比（95.65±4.77）个，（29.16±2.49）个比（103.19±6.08）个，均P<0.05]。生物信息学分析显示PTEN mRNA的3'-UTR区与miR-106b的3'-UTR区域互补；双荧光素酶报告系统分析显示，转染miR-106b的野生型PTEN基因的荧光素酶报告子的活性降低至（22.84±2.68）%，转染miR-106b的突变型PTEN基因的荧光素酶报告子的活性几乎未改变[（92.08±3.44）%]，二者差异有统计学意义（P<0.001）。实验组Hep-2和TU212细胞PTEN蛋白表达水平较阴性对照组高。Transwell实验检测显示，抑制PTEN表达的实验组Hep-2和TU212细胞比未抑制PTEN表达的实验组每个视野侵袭细胞数增加[（65.08±3.57）个比（26.72±2.58）个，（57.38±4.96）个比（31.81±2.97）个，均P<0.05]。蛋白质印迹实验显示，抑制PTEN表达的实验组Hep-2和TU212细胞上皮性钙黏蛋白表达水平上调，波形蛋白表达水平下调。结论人喉鳞状细胞癌Hep-2和TU212细胞中miR-106b可能通过靶向调节PTEN的表达，影响PTEN下游侵袭相关蛋白，而改变细胞侵袭能力。

简介：摘要目的本研究旨在探讨外周血中APC基因DNA甲基化与糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）发生、发展的关系，分析其对基因转录和蛋白表达水平的影响，探讨miRNA135b对APC基因甲基化水平的调控作用。方法选择2018年3月至2020年3月在浙江大学附属杭州市第一人民医院肾内科的96例DN患者和同期100例健康体检者作为研究对象，分别检测两组APC基因CpG岛甲基化水平、mRNA水平和蛋白表达水平。用三联法构建Sprague-Dawely（SD）大鼠DN模型，分为DN组、miRNA-135b过表达慢病毒组和空载病毒组，将miRNA-135b过表达慢病毒和空载病毒通过尾静脉注射到大鼠体内，1个月后处死大鼠，测定其肾组织中的miRNA-135b的表达水平和APC基因甲基化水平。结果DN患者的APC-1岛的甲基化水平为（3.05±0.65）%，显著高于健康对照组的甲基化水平（2.34±0.56）%（t=5.231，P<0.001）；DN患者的APC-2岛的甲基化水平为（1.65±0.37）%，显著高于健康对照组的甲基化水平（1.17±0.29）%（t=4.381，P<0.001）；Pearson相关分析结果显示，APC-1岛的甲基化水平与血清肌酐和尿酸比值呈显著正相关关系（P均<0.05），APC-2岛的甲基化水平与尿酸呈显著正相关（P<0.05）；DN患者APC-1岛的甲基化水平与mRNA相对表达量间呈显著负相关（r=-0.426，P=0.019）；此外，DN患者的APC-1岛的甲基化水平与APC蛋白水平间呈显著负相关（r=-0.569，P=0.004）。miRNA-135b在过表达慢病毒组大鼠中的表达均显著高于空载病毒组（t=5.432，P<0.001）和DN组大鼠（t=5.812，P<0.001）；miRNA-135b过表达慢病毒组大鼠的APC甲基化水平也均显著高于DN组（t=6.217，P<0.001）和空载病毒组大鼠（t=6.446，P<0.001）。结论miRNA-135b可能通过上调APC基因DNA甲基化，降低mRNA和蛋白表达水平，从而参与到DN的发生、发展中。

简介：摘要目的探讨miRNA-143-3p对瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts, KFB)增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法分离培养KFB和正常皮肤成纤维细胞(normal skin fibroblast，NFB)，RT-qPCR法检测KFB和NFB中miRNA-143-3p和整合素β5(integrin β5, ITGB5)的mRNA表达水平，Western blot检测ITGB5的蛋白质表达水平。MTT法、Transwell法、RT-qPCR和Western blot检测过表达miRNA-143-3p或抑制ITGB5表达对KFB细胞增殖、迁移和侵袭及相关蛋白质表达的影响。双荧光素酶报告基因试验验证miRNA-143-3p和ITGB5的靶向关系。结果与NFB相比较，KFB中miRNA-143-3p表达下调，ITGB5的mRNA和蛋白质表达水平上调。过表达miRNA-143-3p或抑制ITGB5表达均抑制了KFB的增殖、迁移和侵袭。miRNA-143-3p可负向调控ITGB5表达，ITGB5过表达逆转了miRNA-143-3p过表达对KFB增殖、迁移和侵袭的作用。结论miRNA-143-3p通过下调ITGB5表达抑制KFB的增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的探讨miRNA-324-5p（miR-324-5p）、转录因子叉头框C1（FOXC1）在脑胶质瘤中的表达及与患者预后的关系。方法收集2012年3月至2015年3月重庆海吉亚肿瘤医院和重庆市南川区人民医院收治的72例脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织以及28例因颅脑手术切除的正常人脑组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-324-5p、FOXC1 mRNA表达水平，采用免疫组织化学法检测FOXC1蛋白表达情况。采用Pearson法分析脑胶质瘤组织miR-324-5p、FOXC1表达的相关性；Kaplan-Meier法对脑胶质瘤患者进行生存分析；Cox回归分析影响脑胶质瘤患者预后的危险因素。结果FOXC1蛋白主要定位于脑胶质瘤细胞质，在脑胶质瘤组织中的阳性表达率为81.94%（59/72），高于其在正常脑组织中的阳性表达率[17.86%（5/28）]，差异有统计学意义（χ2=35.938，P<0.01）。与正常脑组织相比，miR-324-5p在脑胶质瘤组织中表达下调（0.62±0.19比0.98±0.02，t=9.974，P<0.05），FOXC1 mRNA表达上调（1.41±0.29比0.99±0.02，t=7.633，P<0.05）。miR-324-5p、FOXC1蛋白表达水平与脑胶质瘤原发灶数目、分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关（均P<0.05）。脑胶质瘤组织中miR-324-5p、FOXC1 mRNA表达水平呈负相关（r=-0.550，P<0.01）。miR-324-5p高表达组患者5年总生存率高于低表达组（45.71%比24.33%，χ2=6.531，P=0.011），FOXC1蛋白高表达组患者5年总生存率低于低表达组（30.41%比42.34%，χ2=3.631，P=0.047）。多因素Cox回归分析结果显示，肿瘤分化程度低、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、miR-324-5p低表达、FOXC1蛋白高表达是影响脑胶质瘤患者预后的独立危险因素（均P<0.05）。结论脑胶质瘤组织中miR-324-5p呈低表达，FOXC1呈高表达，二者可能参与调控肿瘤分化转移，并与患者预后不良有关，可能作为脑胶质瘤的潜在治疗靶点。

简介：摘要目的探讨野黄芩素通过miRNA-496（miR-496）、基质细胞衍生因子1（SDF-1）对子宫颈癌细胞株HCC94细胞增殖及迁移能力的影响。方法取对数生长期的HCC94细胞，分别加入20 μmol/L野黄芩素溶液（野黄芩素组）和二甲基亚砜（DMSO）（对照组）。分别采用CCK-8法和Transwell实验检测两组HCC94细胞增殖和迁移能力，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-496和SDF-1 mRNA的相对表达量。采用生物信息学软件TarBase预测miR-496的靶基因，并用双荧光素酶报告基因实验进行验证。采用蛋白质印迹法检测相关蛋白的表达情况。结果与对照组比较，培养第3、4、5天，野黄芩素组HCC94细胞增殖能力均降低（均P<0.05）。野黄芩素组和对照组HCC94细胞的穿胶细胞数分别为（25±5）个和（134±19）个，野黄芩素组细胞迁移能力较对照组降低（t=5.61，P<0.01）。对照组和野黄芩素组miR-496相对表达量分别为1.07±0.12和11.24±2.75，差异有统计学意义（t=3.68，P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验结果证实SDF-1是miR-496的下游靶基因。野黄芩素组和对照组HCC94细胞中SDF-1 mRNA相对表达量分别为0.29±0.05和1.01±0.07，差异有统计学意义（t=7.22，P<0.01）。与对照组比较，野黄芩素促进miR-496表达后，SDF-1蛋白、细胞增殖蛋白细胞周期蛋白依赖激酶3（CDK3）、细胞迁移蛋白Slug和Zeb-2表达均降低。结论野黄芩素可通过miR-496-SDF-1轴抑制子宫颈癌HCC94细胞的增殖及迁移。

简介：摘要目的探讨miRNA-522-3p（miR-522-3p）在胃癌组织和细胞中的表达及其对RSU1表达的调控，以及体外对胃癌细胞生物学功能的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测山西白求恩医院2019年5月至2020年6月确诊的50例胃癌患者肿瘤组织和癌旁组织中miR-522-3p的相对表达水平。将胃癌MGC-803细胞和BGC-823细胞分为miR-522-3p抑制剂组（转染miR-522-3p抑制剂）和空载体组（转染空载体），采用CCK-8法检测细胞增殖能力，细胞划痕实验检测细胞的划痕愈合能力，流式细胞术检测细胞凋亡能力；通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-522-3p和RSU1的靶向相关性，蛋白质印迹法检测RSU1蛋白的变化。结果qRT-PCR结果显示，与癌旁组织比较，胃癌组织中miR-522-3p的相对表达水平上调，差异具有统计学意义（0.84±0.31比0.48±0.22，t＝2.93，P<0.05）。不同肿瘤长径和病理分级的胃癌组织中miR-522-3p的相对表达水平差异有统计学意义（均P<0.05）。体外实验表明，48、72 h时miR-522-3p抑制剂组MGC-803细胞、BGC-823细胞的细胞增殖率均下降（均P<0.05），MGC-803、BGC-823细胞转染miR-522-3p抑制剂后，能抑制MGC-803、BGC-823细胞的划痕愈合能力。双荧光素酶报告基因实验验证miR-522-3p能靶向结合RSU1的3'UTR，并影响其荧光活性；蛋白质印迹法结果显示，miR-522-3p抑制剂可促进RSU1蛋白的表达。结论miR-522-3p可能通过调控RSU1表达参与胃癌的进展，其可能是潜在的治疗靶标。

简介：摘要目的观察阿尔茨海默病（AD）患者血清微小核苷酸-26b（miRNA-26b）、同型半胱氨酸（Hcy）、β淀粉样前体蛋白（β-APP）水平变化，分析其与病情程度的相关性及临床意义。方法选取2019年8月至2022年3月聊城市第三人民医院收治的65例AD患者为观察组，男28例，女37例，年龄（75.61±5.13）岁；根据总体衰退量表（GDS）评分为轻度AD组（27例）、中度AD组（21例）、重度AD组（17例），另选取同期60例健康体检者为对照组，男31例，女29例，年龄（74.82±5.27）岁；均检测血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平，采用SPSS 23.0对数据进行分析，多组间比较以单因素方差进行分析，两两比较采用LSD-t检验，对比观察组与对照组、不同病情程度AD患者血清各指标水平，分析其与AD患者病情程度的相关性。结果观察组患者血清miRNA-26b为（0.51±0.16），低于对照组的（1.07±0.28），观察组患者血清Hcy为（21.45±6.29）μmol/L、β-APP（92.57±28.60）ng/L，均高于对照组［（15.07±4.38）μmol/L、（51.54±9.27）ng/L］，两组比较，差异均有统计学意义（均P<0.05）；重度AD组血清miRNA-26b为（0.36±0.15），较轻度AD组（0.58±0.14）、中度AD组（0.54±0.15）低，血清Hcy为（26.27±5.62）μmol/L、β-APP为（102.72±26.47）ng/L，较轻度AD组［（17.83±4.39）μmol/L、（81.21±22.68）ng/L］、中度AD组［（22.20±4.54）μmol/L、（98.96±25.89）ng/L］高（均P<0.05）；重度AD组GDS评分为（6.22±0.43）分，较轻度AD组［（2.51±0.39）分］、中度AD组［（4.36±0.38）分］高，简易智能精神状态量表（MMSE）评分为（6.76±1.31）分、日常生活能力量表（ADL）评分为（13.58±1.68）分，较轻度AD组［（23.47±3.19）分、（24.10±1.37）分］、中度AD组［（16.24±2.55）分、（18.93±1.59）分］低（均P<0.05）；Pearson相关性分析显示，血清miRNA-26b与GDS评分呈负相关，与MMSE、ADL评分呈正相关（r1=-0.613，r2=0.702，r3=0.536，均P<0.05）；血清Hcy与GDS评分呈正相关，与MMSE、ADL评分呈负相关（r1=0.608，r2=-0.549，r3=-0.625，均P<0.05）；血清β-APP与GDS评分呈正相关，与MMSE、ADL评分呈负相关（r1=0.720，r2=-0.568，r3=-0.489，均P<0.05）。结论AD患者血清miRNA-26b水平降低，Hcy、β-APP水平升高，其病情严重程度与血清miRNA-26b、Hcy、β-APP水平变化具有一定相关性，参与AD病情进展。

简介：摘要目的探讨全反式维甲酸（ATRA）对骨肉瘤143B细胞增殖和侵袭的影响及其可能的调控机制。方法采用不同浓度ATRA处理人骨肉瘤143B细胞，选取影响细胞增殖的最佳浓度和处理时间。分别采用MTS法、Transwell迁移和侵袭实验检测ATRA处理后143B细胞增殖、迁移和侵袭能力变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法检测ATRA处理后骨肉瘤143B细胞中miRNA-34a（miR-34a）、E2F1和Eag1的表达变化。干扰miR-34a和过表达E2F1，检测143B细胞增殖、侵袭和迁移能力以及miR-34a、E2F1和Eag1表达的变化。结果ATRA浓度为10 μmol/L、处理72 h对143B细胞增殖的抑制作用最明显。10 μmol/L ATRA作用72 h的迁移细胞数、侵袭细胞数均低于阴性对照组[（73±3）个比（182±5）个，t=21.46，P<0.01；（94±3）个比（203±7）个，t=13.70，P<0.01]。10 μmol/L ATRA可促进143B细胞中miR-34a的表达，抑制Eag1和E2F1的表达（均P<0.01）。与ATRA组比较，处理72 h后ATRA+miR-34a干扰组可恢复细胞的增殖能力[细胞存活率（41.0±2.2）%比（25.0±3.6）%，t=108.68，P<0.01]。与ATRA组比较，ATRA+miR-34a干扰组可恢复细胞的迁移和侵袭能力[（122±14）个比（64±10）个，t=21.06，P<0.01；（103±10）个比（59±8）个，t=24.27，P<0.01]，并可促进细胞中Eag1和E2F1的mRNA和蛋白表达（均P<0.01）。与ATRA组相比，ATRA+E2F1过表达组可恢复细胞的增殖能力[细胞存活率（40.0±3.4）%比（24.0±3.1）%，t=108.74，P<0.01]，可恢复细胞迁移和侵袭能力[（78±12）个比（29±8）个，t=13.52，P<0.01；（75±12）个比（49±10）个，t=6.28，P<0.01）]，并促进细胞中Eag1和E2F1的mRNA和蛋白表达（均P<0.01）。结论ATRA通过调控miRNA-34a-E2F1-Eag1信号通路抑制骨肉瘤细胞增殖和侵袭，其可能成为骨肉瘤有效的治疗药物之一。

简介：摘要目的评价长链非编码RNA-肺癌转移相关转录本1/微小RNA-145/Bcl-2和腺病毒E1B19k Da相互作用蛋白3(Lnc-MALAT1/miRNA-145/BNIP3)信号通路在舒芬太尼预处理对大鼠心肌保护效应中的作用。方法大鼠H9C2细胞以1×106个/ml密度接种于6孔培养板或培养瓶，采用随机数字表法分为5组(n＝30)：对照组(C组)、缺氧复氧组(H/R组)、舒芬太尼预处理组(S组)、真核细胞表达载体pcDNA3.0组(pcDNA组)和pcDNA-MALAT1组(MALAT1组)。S组用10 μmol/L舒芬太尼孵育2 h，随后制备缺氧复氧损伤模型；pcDNA组和MALAT1组分别用pcDNA3.0及pcDNA-MALAT1转染，转染后24 h用10 μmol/L舒芬太尼孵育2 h，随后制备缺氧复氧损伤模型。于复氧后2 h时，采用Real-time PCR法检测Lnc-MALAT1、miRNA-145及BNIP3 mRNA的表达水平；采用CCK-8法检测细胞存活率；采用流式细胞仪检测细胞凋亡率；分别采用硫代巴比妥酸显色法、羟胺法和微板法检测细胞MDA、SOD水平及LDH漏出量；采用Western blot法检测Bcl-2、Bax及cleaved-caspase-3表达水平。结果与C组比较，其余4组细胞存活率降低，凋亡率升高，MDA水平及LDH漏出量升高，SOD水平降低，LncRNA-MALAT1、BNIP3 mRNA、Bax和cleaved-caspase-3表达上调，miRNA-145和Bcl-2表达下调(P<0.05)；与H/R组比较，S组和pcDNA组细胞存活率升高，凋亡率降低，MDA水平及LDH漏出量降低，SOD水平升高，LncRNA-MALAT1、BNIP3 mRNA、Bax和cleaved-caspase-3表达下调，miRNA-145和Bcl-2表达上调(P<0.05)；与S组比较，MALAT1组细胞存活率降低，凋亡率升高，MDA水平及LDH漏出量升高，SOD水平降低，LncRNA-MALAT1、BNIP3 mRNA、Bax和cleaved-caspase-3表达上调，miRNA-145和Bcl-2表达下调(P<0.05)。结论舒芬太尼预处理对大鼠心肌保护效应的机制与抑制Lnc-MALAT1/miRNA-145/BNIP3信号通路有关。

简介：摘要目的探讨玻璃体腔注射雷珠单抗治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)的临床疗效，及其对患者血浆中微小RNA(miRNA)-126、血管内皮生长因子(VEGF)-A的表达水平的影响。方法前瞻性研究。纳入2018年6月—2019年6月蚌埠医学院第一附属医院眼科收治40例(40只眼)wAMD患者为wAMD组，其中男17例、女23例，年龄50～86岁。纳入同期在蚌埠医学院第一附属医院体检中心进行健康体检的中老年人为对照组(40人)，其中男18人、女22人，年龄53～81岁。wAMD组患者均接受单次玻璃体腔注射雷珠单抗0.05 mL治疗。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测对照组和wAMD组治疗前及治疗后1个月血浆miRNA-126相对表达水平，酶联免疫吸附试验检测血浆中VEGF-A水平。(1)比较对照组、wAMD组治疗前miRNA-126及VEGF-A的表达水平。(2)比较wAMD组治疗前、治疗后1个月血浆miRNA-126、VEGF-A表达水平，以及最佳矫正视力(BCVA)、黄斑中央区视网膜厚度(CMT)、脉络膜新生血管(CNV)面积的变化情况。(3)分析wAMD组患者治疗前、治疗后1个月血浆miRNA-126的相对表达量与VEGF-A水平、CMT、CNV面积的相关性。结果(1)wAMD组患者的miRNA-126相对表达量(0.86±0.11)低于对照组(1.04±0.10)，VEGF-A水平(329.09±17.58)pg/mL高于对照组(295.74±14.80)pg/mL，差异均有统计学意义(t＝8.010、9.179，P值均<0.01)。(2)wAMD组治疗后1个月miRNA-126相对表达量(1.47±0.27)较治疗前(0.86±0.11)增加，VEGF-A水平(315.36±15.44)pg/mL较治疗前(329.09±17.58)pg/mL降低，差异均有统计学意义(t＝19.410、8.048，P值均<0.01)；BCVA(0.45±0.11)较治疗前(0.83±0.16)增加，CMT与CNV面积分别为(296.53±21.52)μm，(0.58±0.18)mm2，较治疗前的(311.88±37.25)μm、(0.70±0.17)mm2均降低，差异均有统计学意义(t＝12.667、3.602、4.906，P值均<0.01)。(3)wAMD组患者治疗前及治疗后1个月血浆miRNA-126相对表达水平与VEGF-A、CMT、CNV面积均呈显著负相关(r治疗前＝－0.706、－0.723、－0.552，r治疗后1个月＝－0.783、－0.709、－0.620, P值均<0.01)。治疗前拟合VEGF-A、CMT、CNV面积与miRNA-126相对表达量之间的线性回归方程分别为：ŶVEGF-A＝－112XmiRNA－126＋426, ŶCMT＝－243XmiRNA-126＋522, ŶCNV＝－0.84XmiRNA-126＋1.42；治疗后线性回归方程分别为：ŶVEGF-A＝－45.64XmiRNA-126＋382，ŶCMT＝－57.53XmiRNA-126＋381，ŶCNV＝－0.41XmiRNA-126＋1.18。结论雷珠单抗可通过降低VEGF-A的表达，减少CMT及CNV面积，有效改善BCVA。雷珠单抗在取得临床疗效的同时，可能通过增强miRNA-126基因表达活性而延缓wAMD的进展。

简介：【摘要】目的 对人肺腺癌吉非替尼获得性耐药株H1975细胞和敏感株PC9细胞miRNA谱在表达上的不同进行对比。 方法 使用特定芯片先对H1975细胞进行检测，再检测PC9细胞miRNA表达谱，经特定软件筛选表达差异超出5倍的miRNA，对存在差异者可能靶基因进行分析，通过实时定量PCR技术对芯片检测结果予以验证。 结果 22个H1975细胞株miRNA表达上调超出5倍，24个表达下调在5倍以上；表达异常的33个miRNA有潜在靶基因。 结论 H1975对吉非替尼耐药，可能受miRNA谱异常表达影响，后者可能在调控靶基因的过程中参与获得性耐药。

简介：   摘要：目的：探讨骨髓间充质干细胞源性外泌体miRNA介导TNF-α通过NF-κB信号通路对BMSCs成骨分化的影响。方法：将MC3T3-E1细胞株分对照组（正常培养的MC3T3-E1细胞株）、BMSCs-EXOS组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-EXOS共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS mimics组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS mimics共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor共同培养）及BMSCs-miR-326-EXOS-NC inhibitor组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor共同培养）。采用qRT-PCR方法检测各组细胞miR-326表达；茜素红染色定量分析矿化；碱性磷酸酶染色检测分化；免疫印迹检测各组细胞ALP、OPG、BMP2、TNF-α及NF-κB蛋白水平。结果：与对照组相比，BMSCs-EXOS组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平升高，TNF-α及NF-κB蛋白水平降低（P＜0.05），BMSCs-EXOS组及BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组组间比较无意义（P＞0.05），与BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组相比，BMSCs-miR-326-EXOS-mimics组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平升高，TNF-α及NF-κB蛋白水平降低（P＜0.05），BMSCs-miR-326-EXOS-NC inhibitor组无意义（P＞0.05），BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平降低，TNF-α及NF-κB蛋白水平升高（P＜0.05）。结论：骨髓间充质干细胞源性外泌体miR-326可通过抑制TNF-α及NF-κB蛋白而促进BMSCs成骨分化。

简介：微RNA（microRNA,miRNA）是一种非编码的小RNA分子,在人体内含量丰富且参与许多生命活动的调控。MiRNA在血小板形成、mRNA调控、蛋白合成及激活各个过程均有特异性表达,如miRNA参与调节巨核细胞的生成、分化和血小板激活通路等。许多研究试图进一步阐明miRNA与血小板活性的关系,为寻找评估抗血小板治疗效果的生物标志物提供了新的方向。

简介：摘要目的探讨miRNA-186-3p（miR-186-3p）对子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭的影响及与转化生长因子β（TGF-β）-Smad信号通路的关系。方法将载有miR-186-3p抑制基因、miR-186-3p模拟物的质粒分别转染至子宫颈癌CaSki细胞，分别为miR-186-3p-I组、miR-186-3p-M组；另将转染空载质粒的CaSki细胞作为对照，为miR-186-3p-C组。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，采用Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力；采用蛋白质印迹法检测各组细胞TGF-β-Smad信号通路相关蛋白表达水平；采用Starbase软件预测miR-186-3p靶基因，并用双荧光素酶报告基因实验进行验证。结果miR-186-3p-M组细胞凋亡率均低于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[（7.5±3.2）%比（13.9±0.7）%、（12.7±0.6）%，均P<0.05]。miR-186-3p-M组迁移细胞数[（218±25）个比（168±13）个、（175±13）个，均P<0.001]和侵袭细胞数均多于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[（165±21）个比（130±11）个、（142±12）个，均P<0.001]。miR-186-3p-M组TGF-β、Smad2、Smad3、磷酸化Smad2（p-Smad2）、磷酸化Smad3（p-Smad3）蛋白相对表达量均最低，与另两组比较，差异均有统计学意义（均P<0.001）。采用Starbase软件预测miR-186-3p与XIST RNA互补结合；双荧光素酶报告基因实验显示，XIST野生型载体+miR-186-3p模拟物质粒共转染的细胞相对荧光素酶活性低于XIST野生型载体+miR-186-3p空载质粒共转染的细胞（P<0.001）。结论miR-186-3p可能直接与XIST RNA结合而下调TGF-β-Smad信号通路活性，进而增强子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭活性。

简介：摘要目的评价右美托咪定对小鼠内毒素性急性肾损伤时细胞焦亡的影响及其与miRNA-223-3p的关系。方法清洁级健康雄性ICR小鼠32只，8~12周龄，体重20~25 g，采用随机数字表法分为4组(n＝8)：对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+右美托咪定组(LD组)和LPS+右美托咪定+阿替美唑组(LDT组)。腹腔注射LPS 400 μg/kg，8 h后腹腔注射LPS 10 mg/kg制备小鼠内毒素性急性肾损伤模型。LD组造模后30 min时腹腔注射右美托咪定40 μg/kg，每2 h 1次，共3次；LDT组于造模结束即刻腹腔注射阿替美唑750 μg/kg，30 min后腹腔注射右美托咪定40 μg/kg，每2 h 1次，共3次；C组腹腔注射等容量生理盐水。造模后24 h时经心脏取血，检测血清Cr和BUN浓度。处死小鼠取左侧肾脏组织，HE染色后光镜下观察病理学结果，采用Western blot法及qRT-PCR法检测caspase-1 p20、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、ASC及其mRNA表达水平，采用ELISA法测定IL-1β和IL-18含量，采用TUNEL法确定肾皮质细胞焦亡率。结果与C组比较，L组血清Cr及BUN浓度升高，肾组织NLRP3、caspase-1 p20、ASC及其mRNA表达上调，IL-1β和IL-18含量升高，肾皮质细胞焦亡率升高(P<0.05)，miRNA-223-3p表达差异无统计学意义(P>0.05)，肾脏病理学损伤加重。与L组比较，LD组血清Cr及BUN浓度降低，肾组织NLRP3、caspase-1 p20、ASC及其mRNA表达下调，IL-1β和IL-18含量降低，肾皮质细胞焦亡率降低，miRNA-223-3p表达上调(P<0.05)，肾脏病理学损伤减轻。与LD组比较，LDT组血清Cr及BUN浓度升高，肾组织IL-1β和IL-18含量升高，肾组织NLRP3、caspase-1 p20、ASC及其mRNA表达上调，肾皮质细胞焦亡率升高，miRNA-223-3p表达下调(P<0.05)，肾脏病理学损伤加重。结论右美托咪定减轻小鼠内毒素性急性肾损伤的机制可能与上调miRNA-223-3p表达，抑制细胞焦亡有关。