简介:摘要目的克隆并表达中国莱姆病螺旋体基因型代表菌株伽氏疏螺旋体(Borrelia garinii,B.garinii)PD91外膜蛋白A(OspA)的126~274 aa肽段,并对其免疫保护性进行初步研究。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增B.garinii PD91的126~274 aa OspA肽段基因,克隆至原核表达载体pET-30a上,构建pET-30a-OspA-pep重组质粒,转入大肠埃希菌感受态细胞BL21(DE3)中,利用IPTG诱导表达,表达产物用Ni-IDA树脂层析纯化,采用Western blot分析其免疫原性。将不同剂量的重组OspA-pep(rOspA-pep)蛋白(20、30、40、50、60、80、100 μg)免疫新西兰家兔,采用间接免疫荧光法(IFA)检测免疫前后的抗体滴度,选取产生抗体滴度最高的剂量组为最佳剂量组。用最佳剂量组的免疫兔血清进行体外中和试验以检测rOspA-pep蛋白免疫后血清抗体的体外杀菌能力,同时用最佳剂量的rOspA-pep蛋白免疫新西兰家兔,观察其抗体滴度变化。结果重组质粒pET-30a-OspA-pep构建成功并在宿主菌体内高效表达。Western blot表明rOspA-pep蛋白与B.garinii PD91的多抗有明显的免疫应答。IFA检测结果表明rOspA-pep蛋白免疫后的兔血清IgG抗体滴度明显升高(最高可达1∶2 480),40 μg为rOspA-pep的最佳免疫剂量。体外中和试验结果表明该剂量rOspA-pep蛋白免疫家兔后产生的抗体对106个/ml的B.garinii和阿弗西尼疏螺旋体(Borrelia afzelii,B.afzelii)型代表菌株PD91和FP1的中和率达100%,对107个/ml的FP1的中和率为100%,对107个/ml的PD91的中和率为60%。用40 μg rOspA-pep在1 d和30 d免疫新西兰家兔2次后,其抗体达到高峰,持续时间为3~4个月,之后抗体滴度逐渐下降。结论中国莱姆病螺旋体基因型代表菌株B.garinii PD91的126~274 aa OspA肽段具有较好的免疫原性,其诱导的抗体有较好的体外中和能力,可作为中国二代亚单位疫苗的候选成分。
简介:摘要目的对比分析罗氏电化学发光Cobase601与希森美康化学发光酶联免疫HISCL5000检测梅毒螺旋体特异性抗体的结果。方法选择在罗氏Cobase601检测仪上检测梅毒螺旋体特异性抗体结果大于1.00CIO,同时在希森美康HISCL5000进行检测,并进行相关性分析。结果检测标本数49例,其中罗氏检测结果为1-10COI的标本10份,两者的直线回归方程为Y=0.118X+0.462,相关系数0.225,10.10-350COI的39份标本中,两者的直线回归方程为Y=0.471X-12.70,相关系数0.936。结论罗氏检测结果1-10COI之间,两种方法结果无相关性,罗氏检测结果为10.10-350.00COI之间,两种方法结果具有高度相关性。
简介:摘要:目的:在本次的研究中主要的目的是为了探究在对血液病患者梅毒螺旋体抗体检测当中使用人免疫球蛋白的临床应用价值,并对应用前后的数据进行对比比较。方法:在此次的研究当中,选取的是来我院进行治疗并且被诊断为血液病患者同时具有梅毒螺旋体抗体的样本数52例,选取其中患者注入人免疫球蛋白一共42例,剩下的9例血液病患者则是不使用人免疫球蛋白。通过对这两组人员在使用和没有使用人免疫球蛋白后体内梅毒螺旋体抗体检测的结果进行相互的比较。结果:根据两组人员体内梅毒螺旋体抗体检测数据结果分析能够了解到,在52例样本当中,经过梅毒螺旋体血凝实验检测出具有阳性的一共有10例,被注入人免疫球蛋白的42例患者,经过三种试剂的检测程阳性的概率分别为:强生试剂检测下的阳性率为78.6%、万泰试剂检测下的阳性率为88.1%、索林试剂检测下的阳性率为66.7%,并且在经过梅毒螺旋体血凝实验检测都为阳性。而剩下的9例患者在没有使用人免疫球蛋白的检测结果逐渐的转变为阴性,两组数据之间对比具有较大差异性,差异具有统计学意义,P
简介:摘要通过对煤粉气化两种典型的输送系统的研究,分析了粉体密相输送技术和粉体加压泵技术特性,即粉体仓泵和固体加压泵输送系统的两种典型技术特性,目的是解决密相输送的关键技术问题,提出固体加压泵技术的研究方向。
简介:【摘要】 目的 探讨电化学发光免疫( ECLIA)检测梅毒螺旋体 (TP)特异性抗体的系统性能和临床价值 。方法 研究开展时间为2019年 9月 -2020年 1月, 选取129例高危 梅毒螺旋体(TP)特异性抗体阳性 患者(观察组)以及120例健康体检者(对比组)进行研究。受检者均采用 电化学发光免疫进行检测,并将检验结果与金标准进行对比,观察其应用价值。结果 金标准诊断TP特异性抗体阳性 50例,占比 38.76%,阴性 78例,占比 60.47%。 对比组
简介:摘要目的对比分析采用乙型肝炎表面抗原/梅毒螺旋体抗体联合检测试纸条对无偿献血者献血前进行快速检测前后的结果,优化献血前筛查策略。方法对献血者献血前采用乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋体抗体联合检测试纸条(胶体金法),进行快速检测,对筛查合格的献血者样本进行HBV、TPELISA双试剂检测。比较开展HBsAg、TP联合快速检测前、后血液HBV及TP阳性报废率。结果2017年2月—2018年7月42467例初筛合格无偿献血者样本中,检出HBsAg反应性样本317例,阳性报废率0.75%;检出TP反应性样本200例,阳性报废率0.47%,低于2015年7月—2017年1月未开展HBsAg及TP联合快速筛查前,HBsAg及TP阳性报废率。结论开展乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋体抗体联合检测试纸条快速筛查,能有效降低血液HBV及TP阳性率;减少对不合格血液采集所造成的资源浪费,提升献血服务质量及水平,进一步保障了临床用血安全。
简介:摘要本文着重讨论“长篇小说热”形成、发展过程中出现的文本与作者经验的缺乏问题,层层剖析文本与现实的关系、作家经验、文本的思想深度等问题从而对“长篇小说热”进行一种“冷”的思考。
简介:摘要目的了解caspase-11非经典炎症小体对问号钩端螺旋体(钩体)诱导J774A.1细胞分泌炎性细胞因子的影响。方法采用钩体56601株感染小鼠单核-巨噬细胞株(J774A.1)建立细胞模型,应用real-time RT-PCR检测J774A.1细胞caspase-11、IL-1β、IL-1α和IL-18 mRNA水平,采用ELISA定量检测J774A.1细胞上清液中caspase-11、IL-1β、IL-1α和IL-18水平。结果Real-time RT-PCR检测结果显示,钩体感染J774A.1细胞1、2、4、8、12和24 h后,caspase-11 mRNA水平分别为未感染细胞的5.12、14.21、8.94、14.06、18.58和0.93倍,caspase-11阻断后分别下降至0.10、0.07、0.10、0.09、0.07和0.45倍(P<0.05);钩体感染后,IL-1β、IL-1α和IL-18 mRNA水平均显著上调,caspase-11阻断后IL-1β mRNA水平分别下降至0.05、0.03、0.02、0.05、0.06和0.02倍(P<0.05);IL-1α mRNA分别下降至0.14、0.07、0.15、0.10、0.03和0.06倍(P<0.05);IL-18 mRNA分别下降至0.08、0.10、0.16、0.18、0.10和0.07倍(P<0.05)。ELISA检测结果显示,钩体感染J774A.1细胞后细胞上清液中caspase-11、IL-1β、IL-1α和IL-18水平均显著上调,caspase-11阻断后caspase-11分别下降至43.07、41.64、51.96、86.56、105.36和129.95 pg/ml(P<0.05);IL-1β分别下降至15.01、14.19、68.02、31.20、173.13和104.98 pg/ml(P<0.05);IL-1α分别下降至12.14、15.40、38.01、21.97、24.48和27.09 pg/ml(P<0.05);IL-18分别下降至96.27、102.21、85.34、116.28、155.36和114.03 pg/ml(P<0.05)。结论Caspase-11非经典炎症小体参与介导问号钩体诱导小鼠单核-巨噬细胞IL-1β、IL-1α和IL-18的分泌。