简介：目的：观察大鼠颌下腺上皮间紧密连接蛋白表达特点。方法：分离大鼠颌下腺，冰冻切片，免疫荧光染色检测ZO-1、Occludin、Claudin-3和Claudin-4等紧密连接蛋白的表达。结果：Claudin-3表达于涎腺腺泡上皮及导管上皮，与Occludin及ZO-1共表达提示位于紧密连接处。Claudin-4只表达于导管，腺泡中不表达。结论：Claudin在鼠颌下腺中表达具组织特异性。

简介：摘要重症监护病房（ICU）患者死亡的主要原因是脓毒症，脓毒症及脓毒性休克严重影响患者的预后，增加了患者的病死率和再次发病率，早期、及时的干预可以降低脓毒症患者的病死率及复发率。脓毒症的发生可能与连接蛋白43（Cx43）的磷酸化有关，而Cx43的磷酸化需要通过各种信号通路实现。Cx43的相关位点通过不同信号通路发生磷酸化，实现了对脓毒症的精准调节，这些位点可能成为治疗脓毒症的相关靶点，为精准化治疗脓毒症提供方向。本文主要分析蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C（PKC）、丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）等与Cx43相关的信号通路在脓毒症发生机制中的作用。

简介：摘要目的探讨间隙连接蛋白-43（Connexin-43, Cx43）对成骨细胞增殖和成骨分化的影响及调控机制。方法体外分离培养大鼠成骨细胞，在地塞米松作用下以茜素红染色和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）染色检测成骨细胞的成骨活性；Western-blot检测成骨细胞中Cx43的表达、成骨蛋白Runx2、ALP、Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠtype，COL-Ⅰ）及增殖相关蛋白PCNA、CDK4的表达；免疫荧光染色检测成骨细胞成骨蛋白的表达；CCK8法检测成骨细胞增殖活力。构建慢病毒介导的Cx43基因过表达质粒（Lv-Cx43）并转染成骨细胞，检测成骨细胞的成骨活性及增殖能力。PD98059预处理过表达Cx43的成骨细胞，检测过表达Cx43成骨细胞的成骨活性及增殖能力。结果分离的成骨细胞具备成骨分化能力，1×10-6 mol/L地塞米松处理能够降低成骨细胞钙结节的形成；随地塞米松作用的时间增加，成骨细胞中Cx43、Runx2、ALP、COL-Ⅰ蛋白表达均呈逐渐下降趋势，且PCNA、CDK4及p-ERK1/2表达均下降；正常组成骨细胞在第0、1、2、3、4天的OD值分别为0.316±0.043、0.891±0.623、1.683±0.154、2.315±0.721、2.891±0.323，在地塞米松处理成骨细胞后分别为0.376±0.021、0.657±0.121、1.124±0.285、1.521±0.272、1.987±0.584，地塞米松处理组成骨细胞OD值在第2、3、4天均小于正常组（P<0.05）。对照组、转染空载慢病毒质粒（Lv-NC）组和Lv-Cx43组中Cx43 mRNA的相对表达量分别为0.541±0.086、0.598±0.018、1.000±0.082，Lv-Cx43组中Cx43 mRNA表达水平高于对照组和Lv-NC组（P<0.05）。对照组、Lv-NC组和Lv-Cx43组中Cx43蛋白条带与内参GAPDH条带灰度值的比值分别为0.816±0.737、0.738±0.643、1.145±1.101，与对照组和Lv-NC组比较Lv-Cx43的表达水平增高（P<0.05）。Lv-Cx43组中Runx2、ALP、COL mRNA的表达及相关标志蛋白表达水平均高于对照组和Lv-NC组；Lv-Cx43组中成骨细胞钙结节的数目高于对照组和Lv-NC组。Lv-Cx43+PD98059组中成骨细胞OD值和钙结节的数目低于Lv-Cx43组（P<0.05）。结论在地塞米松作用下成骨细胞的增殖和成骨分化能力明显下降，且细胞中Cx43表达下降；过表达Cx43能够促进成骨细胞的增殖和成骨分化，其调控机制可能通过ERK1/2通路实现。

简介：摘要目的探讨院前心肺复苏及无缝隙连接急救中急诊护理流程的应用价值。方法选取急诊科呼吸心跳停止行心肺复苏的患者100例，均为2014年5月—2016年5月收治，采用数字表抽取法随机分组，就常规急救干预（对照组，n=50）与应用急诊护理流程干预（观察组，n=50）效果展开对比。结果观察组急救信息平均受理用时、呼叫-出车时间均少于对照组（P<0.05）。观察组患者一般情况判断平均用时（30.2±3.2）s，对照组（45.2±1.9）s，对比有统计学意义。观察组气管插管、心电除颤仪、心电监护仪完好率、器械摆放合理率均为100%，对照组分别为88%，86%，对比有统计学差异（P<0.05）。观察组出诊速度（3.8±1.2）min，对照组（6.1±2.4）min，对比有统计学差异（P<0.05）。观察组急救技术实施成功率、患方满意度率均高于对照组，差错事故率低于对照组，对比有统计学差异（P<0.05）。结论在心肺复苏及无缝隙连接急救中应用急救护理流程，可增强院前、院内急救时效性，提高整体护理质量。

简介：目的研究间隙连接蛋白43（Cx43）在胰腺癌细胞凋亡中的作用，并探讨其机制。方法采用脂质体2000法将pcDNA—Cx43、pcDNA—Cx43N、空质粒pcDNA3．0、siRNA—Cx43和对照siRNA-NC分别转染BxPC3细胞。Westernblotting检测细胞Cx43蛋白表达、细胞色素C（CytC）含量；流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位；荧光分光光度计检测细胞Caspase-9和Caspase-3活性；染料传递法测定细胞间间隙连接（GJ）。结果Cx43转染BxPC3细胞后，Cx43蛋白表达明显上调，细胞凋亡从空质粒转染组的（6．35±0．43）％增加到（14．29±1．24）％，经H2O2处理后，从（20．34±2．47）％增加到（31．27±2．56）％（P〈0．05），同时线粒体膜电位下降，CytC从线粒体释放增多，Caspase蛋白酶活性增加；而siRNA43干扰细胞后，细胞凋亡从（7．42±0．47）％减少到（5．19±1．37）％，经H2O2处理后，从（19．43±1．71）％减少到（11．67±1．97）％（P〈0．05），线粒体膜电位去极化，CytC从线粒体释放减少，Caspase酶活性下调。细胞间间隙连接指数在无GJ抑制剂B—GA情况下从对照组的14．52±0．57增加到pcDNA—Cx43转染组的23．05±3．84，在存在β—GA情况下从1．70±0．24增加到3．84±0．45（P〈0．05），但细胞凋亡率改变无显著差异。结论Cx43可通过线粒体凋亡途径促进BxPC3细胞凋亡，Cx43调节细胞凋亡存在间隙连接以外的机制。

简介：

简介：摘要目的分析研究临床应用胎儿纤维连接蛋白对先兆早产孕妇进行早产预测时的临床价值。方法选取我院近期内收治的86例先兆早产孕妇并对其应用ELISA法测定宫颈分泌物胎儿纤维连接蛋白的水平，以50μg/L为中线分为两组，比较两组孕妇的临产孕周的长短及早产率。结果86例孕妇中有，胎儿纤维连接蛋白检测显示为阳性的有62例，阴性24例；62例阳性孕妇的平均临产孕周明显短与24例阴性产妇的平均临床孕周（P<0.05）；62例阳性产妇中有51例发生早产，早产率82.26%，与24例阴性孕妇的早产率33.33%相比，差异显著（P<0.05）。结论胎儿纤维连接蛋白检测结果与孕妇早产的发生存在密切关联，临床应用其对先兆早产的孕妇进行时可提高早产率检测的准确性。

简介：摘要目的探讨连接蛋白43（connexin 43，Cx43）在大鼠激素性股骨头坏死组织和成骨细胞中的表达变化及调控机制。方法建立大鼠股骨头坏死模型，分别采用MicroCT和HE染色观察骨小梁破坏程度和空骨陷窝发生率；采用RT-PCT和Western blot检测模型组和对照组中Cx43和PI3K/Akt信号通路相关分子及成骨相关蛋白的表达水平；进一步分离大鼠成骨细胞进行体外培养，在地塞米松（dexamethasone，Dex）作用下，采用Western blot法和免疫荧光检测Dex对成骨细胞中Cx43表达的影响；采用Western blot法检测GCs对PI3K/Akt/β-catenin信号通路相关分子表达的影响，并采用Akt激活剂（SC79）和PI3K抑制剂（LY294002）研究Dex对成骨细胞中Cx43表达调控的分子机制；采用免疫共沉淀和siRNA技术研究β-catenin与Cx43之间的调控关系。结果成功建立大鼠激素性股骨头坏死（GC-ONFH）模型，证明Cx43在GC-ONFH模型组中的表达水平显著低于对照组，且Cx43表达水平与PI3K/Akt信号通路相关分子及成骨相关蛋白Runx2、ALP和Collagen I type（COL）表达呈正相关；此外，分离大鼠成骨细胞体外培养，在Dex作用下，随作用时间的延长，成骨细胞中Cx43的表达与p-PI3K、p-Akt和β-catenin表达逐渐下降，且在SC79预处理下，能够显著逆转GCs对Cx43表达的抑制作用，而LY294002能够显著增强GCs对Cx43的抑制作用；且免疫共沉淀结果表明β-catenin表达与Cx43表达之间存在紧密联系，进一步研究表明β-catenin-siRNA能够明显下调Cx43的表达。结论在激素作用下，Cx43在骨组织和成骨细胞中的表达水平显著下降，其可能的机制是GCs通过抑制PI3K/Akt/β-catenin信号通路进而抑制Cx43的表达，为进一步研究Cx43在激素性股骨头坏死发病过程中的作用奠定新的理论基础。

简介：摘要目的探讨应用急救护理新模式后危重创伤急救的护理质量。方法通过将信息化、网络化、整体化无缝隙连接的急救新模式对63例中重度创伤患者评估其危重情况及伤情,并快速作出计划,迅速实施急救措施,然后进行评价。结果应用急救护理新模式后,63例中重度创伤患者全部病情稳定后转入相关科室继续治疗,跟踪治愈率上升了13.77%,死亡率比以前下降了39.45%。结论无缝衔接急救护理新模式在危重创伤急救中的应用是切实可行的,明显提高了急救的护理质量,同时提升了急救护理队伍的应变速度和护士的综合能力。

简介：目的研究尿纤维连接蛋白试纸（FN试纸）诊断膀胱尿路上皮癌的灵敏度和特异度,探讨其与膀胱尿路上皮癌各项临床指标之间的关系,为进一步无创性地诊断、随访膀胱尿路上皮癌提供依据.方法运用自主研制的FN试纸测定膀胱尿路上皮癌患者、良性泌尿系疾病患者、正常体检人群尿液纤维连接蛋白.结果FN试纸诊断膀胱尿路上皮癌的敏感度和特异度分别为72.94%和79.03%,其阳性预测值和阴性预测值分别为85.67%和68.06%;尿液细胞学诊断膀胱尿路上皮癌的特异度较高（100%）,但其敏感度仅为47.06%.结论FN试纸检测对不同分化及浸润深度的膀胱尿路上皮癌有着较高的灵敏度与特异度,诊断价值高于尿液液基细胞学检查,但不能对膀胱肿瘤的分级以及病灶数量进行检测.

简介：摘要泛连接蛋白（pannexins，Panxs）是一类在脊椎动物中存在，编码缝隙连接蛋白的基因家族，与非脊椎动物连接蛋白Innexin具有25%~33%的序列同源性。Panxs分为三个亚型：Panx1、Panx2和Panx3。Panxs在细胞膜上形成半通道，与ATP释放、Ca2+稳态、神经递质释放、细胞凋亡、免疫反应等密切相关。近年来，Panxs在听觉功能方面的作用受到人们的关注，也存在很大的争议。本文将对耳蜗内Panxs的表达及功能做一综述。

简介：

简介：目的探讨微小RNA-206（miR-206）和连接蛋白（Cx）43在乳腺癌原发灶（PTs）及腋窝转移淋巴结（MLNs）中的表达变化关系。方法收集8例经病理学证实为浸润性导管癌的乳腺癌患者，取手术切除的癌旁正常腺体组织、乳腺癌PTs、配对的正常腋窝淋巴结（NLNs）及MLNs，采用实时定量PCR和Westernblotting等实验方法，检测正常腺体组织、乳腺癌PTs、配对的NLNs、MLNs中miR-206和Cx43的mRNA和蛋白表达。各组间均数比较行单因素方差分析和Posthoc检验（SNK／LSD）。结果与正常乳腺腺体组织比较，乳腺癌PTs和NLNs中miR-206的mRNA表达明显降低，配对的MLNs中miR-206的mRNA表达较PTs和NLNs进一步降低（P〈O．05）。PTs、NLNs和MLNs中Cx43mRNA表达较正常乳腺组织明显降低（P〈O．05），而PTs与MLNs中Cx43mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。PTs和NLNs中Cx43蛋白表达较正常乳腺组织明显降低（P〈O．05）；与PTs比较，NLNs中Cx43蛋白表达的差异无统计学意义（P〉O．05），而MLNs中Cx43蛋白的表达明显增加（P〈O．05）。结论miR-206和Cx43基因的相互作用可能与乳腺癌腋窝淋巴结转移有关。

简介：摘要人体细胞间广泛存在缝隙连接通道，这种特别的结构，允许小分子水溶性物质和离子在两个细胞间流通，产生了“细胞间直接通讯，细胞间能量、营养物质及代谢终产物的从新分配”。因缝隙连接通道有条件的开关，造就了缝隙连接通道的可控性、方向性及目的性，即缝隙连接可成为人体又一独立、重要的系统，人体中枢神经系统左右着缝隙连接系统的开关，控制着人体能量及营养物质的分配，从而左右着人体全身器官的兴衰存亡。缝隙连接系统有类似“中医经络系统”的功能。可从新认识“梦境形成、再灌损伤及癌症等”诸多医学问题。值得我们进一步探索。

简介：【摘要】目的：分析创伤性休克患者行无缝隙连接急救护理对急救成功率的影响。方法：采用单盲法将2021年1月-2022年1月我院收治的60例创伤性休克患者分为参照组和研究组，各30例，其中参照组行常规护理，研究组行无缝隙连接急救护理，对比两组急救时间、急救成功率、不良事件发生率。结果：研究组确诊时间、急诊至手术时间、急诊至病房时间、住院时间均较参照组更低，且急救成功率更高，不良事件发生率更低（P＜0.05）。结论：创伤性休克患者行无缝隙连接急救护理可缩短抢救时间，提高急救成功率，避免不良事件发生。

简介：【摘要】目的：分析创伤性休克患者行无缝隙连接急救护理对急救成功率的影响。方法：采用单盲法将2021年1月-2022年1月我院收治的60例创伤性休克患者分为参照组和研究组，各30例，其中参照组行常规护理，研究组行无缝隙连接急救护理，对比两组急救时间、急救成功率、不良事件发生率。结果：研究组确诊时间、急诊至手术时间、急诊至病房时间、住院时间均较参照组更低，且急救成功率更高，不良事件发生率更低（P＜0.05）。结论：创伤性休克患者行无缝隙连接急救护理可缩短抢救时间，提高急救成功率，避免不良事件发生。

简介：摘要目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源外泌体微小RNA(miR)-20a对前列腺癌细胞间通讯连接(GJIC)、侵袭和转移能力的影响及其机制。方法构建CAFs来源近红外荧光蛋白(IRFPs)标记外泌体，以不同浓度(0、10、100、200 mg/L)与PC-3细胞共培养。蛋白质印迹法检测PC-3细胞中CX43蛋白的相对表达水平；荧光漂白恢复技术测定PC-3细胞间缝隙连接功能；Transwell小室侵袭和迁移实验检测PC-3侵袭能力。构建高表达和低表达miR-20a的CAFs，分别与PC-3细胞共培养，检测缝隙链接蛋白43(Connexin 43, CX43)表达、细胞缝隙连接功能、细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证PC-3细胞中miR-20a与CX43基因是否直接结合。用Student’t检验分析组间差异。结果PC-3细胞的CX43表达水平及细胞缝隙连接功能均随外泌体浓度增加而降低(0.715±0.058、0.544±0.039、0.313±0.028和0.196±0.020，F＝19.031，P<0.05)，差异有统计学意义。Transwell小室检测结果表明，CAFs来源外泌体促进PC-3细胞迁移[各组每视野穿膜细胞数分别为(176.0±9.2)、(485.0±12.8)、(159.5±9.7)和(198.0±10.5)个，F＝11.475，P<0.01]和侵袭[各组每视野穿膜细胞数分别为(150.0±8.4)、(443.0±21.7)、(182.0±11.2)和(153.5.0±10.1)个，F＝16.306，P<0.01]，差异有统计学意义；增强细胞缝隙连接能抑制此效应(F＝14.052，P<0.01；F＝14.804，P<0.01)。高表达miR-20a组的PC-3细胞的CX43表达水平(0.126±0.062比0.834±0.103，t＝9.430，P<0.05)、荧光恢复率[(25.02±7.85)%比(46.65±6.98)%，t＝5.782，P<0.05]均显著低于低表达miR-20a组，但细胞的迁移[(502.5±18.6)个比(128.5.0±9.4)个，t＝9.120，P<0.05]和侵袭能力(458.0±16.8比194.5±9.2，t＝6.286，P<0.05)均显著高于表达miR-20a组，差异均有统计学意义。双荧光素酶报告实验结果显示，野生型CX43的PC-3细胞中，转染miR-20a的细胞荧光活性显著低于miR-NC组(0.46±0.08比0.99±0.14，t＝10.208，P<0.05)，差异有统计学意义；而突变型CX43的PC-3细胞中，miR-20a组与miR-NC组细胞荧光活性差异无统计学意义(0.94±0.06比0.97±0.08，t＝0.142，P>0.05)。结论CAFs来源外泌体miR-20a通过直接作用CX43基因，下调PC-3细胞CX43的表达，从而显著降低细胞间通讯连接功能，增强前列腺癌细胞的增殖、侵袭和转移能力。

简介：目的探讨胃癌发生过程中α-连接蛋白（alpha-cmemn，α-Cat）表达与幽门螺杆菌（helicobactcrpylori，Hp）感染的关系，及其在胃癌发生发展中的可能机制。方法选择胃黏膜活检及手术切除的胃癌病理标本96例，癌旁组织96例，对照标本15例。应用免疫组化SP法检测各组组织中α-Cat的表达。用快速尿素酶试验或组织学Warthin-Starry嗜银染色法检测胃黏膜Hp感染情况。结果α-Cat在胃癌组、癌旁组织组、对照组的阳性表达率分别为34．4％、56．2％、100．0％，胃癌组显著低于癌旁组织组和对照组（P〈0．05）；96例胃癌组织中Hp阳性组α-Cat表达明显低于Hp阴性组（46．3％vs59．2％，P〈0．05）；α—Cat阳性率在高、中分化和低、未分化型胃癌组织中阳性率呈现递减趋势（69．1％vs10．7％，P〈0．01），但α-Cat表达和淋巴结转移、癌肿浸润深度无密切相关。结论在胃黏膜癌变过程中，α-Cat的表达逐渐上调。胃癌组织中α—Cat的表达与Hp感染相关，提示Hp感染可通过对α-Cat表达的影响，在胃癌的发生发展过程中发挥一定作用。

简介：摘要目的探索羧基末端连接蛋白反应蛋白（CtIP）对脑内皮细胞氧化损伤功能的作用，并探讨其作用机制。方法通过添加三丁基过氧化氢（TBHP）刺激诱导脑内皮细胞氧化应激，采用过表达和干扰慢病毒技术制备CtIP基因表达和沉默表达细胞系，Caspase-3免疫荧光检测细胞的损伤程度，免疫印迹检测细胞CtIP、Caspase-3蛋白的表达，实时荧光定量PCR（Realtime RT-PCR）检测CtIP信号通路基因的表达。结果免疫荧光和免疫印迹检测结果显示，过表达CtIP后，Caspase-3的表达降低至正常细胞的1/3水平（相对表达量），表明血管内皮细胞损伤程度减轻。而干扰CtIP表达后，Caspase-3表达显著增加至正常细胞的4/5水平（相对表达量），提示血管内皮细胞损伤程度提高。Realtime RT-PCR结果显示，CtIP基因显著上调BRCA1和ZBRK1基因的表达，而抑制了p21基因的表达。结论证实CtIP基因对脑内皮细胞氧化损伤具有显著的抑制作用，并确定了CtIP基因与BRCA1、ZBRK1和p21基因在损伤过程中的调控关系。

简介：摘要目的观察金黄色葡萄球菌和纤维连接蛋白结合蛋白A基因（fnBA）敲除金黄色葡萄球菌菌株对人微血管内皮细胞（HMEC-1）紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5的影响，并探讨金黄色葡萄球菌侵袭血管内皮细胞的机制。方法将野生金黄色葡萄球菌菌株NCTC8325与HMEC-1按100︰1比例共培养，实时定量RT-PCR检测共培养30 min、60 min和120 min时HMEC-1紧密连接成份ZO-1和Claudin-5 mRNA的表达，同时应用Western blot分析和免疫组织化学染色观察共培养不同时间紧密连接蛋白ZO-1和Claudin-5的表达。构建fnBA基因敲除突变菌株NCTC8325ΔfnbA，以野生金黄色葡萄球菌菌株NCTC8325为阳性对照，观察突变株NCTC8325ΔfnbA与HMEC-1共培养120 min后紧密连接蛋白ZO-1和Claudin-5的变化。结果金黄色葡萄球菌NCTC8325与HMEC-1共培养30 min、60 min和120 min后紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5 mRNA的表达在30 min、120 min时较对照组显著下降[30 min时与对照组比较：ZO-1：t = 4.104、P = 0.015，Claudin-5 mRNA：t = 2.802、P = 0.049；120 min时与对照组比较：ZO-1：t = 3.478、P = 0.025，Claudin-5 mRNA：t = 1.802、P = 0.261]，但60 min时ZO-1、Claudin-5 mRNA的表达有一过性升高。与金黄色葡萄球菌NCTC8325共培养后，免疫组织化学结果发现在30 min时ZO-1和Claudin-5两种紧密连接蛋白较对照组表达显著下降（t = 33.6、59.03，P均< 0.001），120 min时ZO-1和Claudin-5两种紧密连接蛋白较对照组表达亦显著下降（t = 31.8、60.75，P均< 0.001）；Western blot与免疫组组织化学结果一致。与突变菌株NCTC8325ΔfnbA共培养30 min、60 min和120 min后，在30 min和60 min时ZO-1、Claudin-5蛋白的表达与NCTC8325组差异无统计学意义（P均> 0.05），在120 min时ZO-1和Claudin-5蛋白的表达较NCTC8325组显著升高，差异均有统计学意义（ZO-1：t = 14.89、P < 0.001，Claudin-5：t = 7.008、P = 0.002）。结论金黄色葡萄球菌能通过下调紧密连接蛋白破坏HMEC-1紧密连接屏障，且其表面蛋白FnBPA发挥了重要作用。