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  • 简介:摘要目的探讨缝隙连接蛋白Cx43抑制剂甘珀酸(CBX)对癫痫大鼠认知功能的影响及其可能的机制。方法120只Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、癫痫组、癫痫+溶剂组、癫痫+CBX组,每组30只。后3组大鼠海马内注射海人酸(KA)制备颞叶癫痫模型。癫痫+CBX组大鼠造模前30 min腹腔注射CBX(20 mg/kg),癫痫+溶剂组大鼠造模前30 min腹腔注射等量生理盐水。造模后6、12、24 h采用Western blotting检测大鼠海马CA3区磷酸化(p)-Cx43和微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达,造模后24 h采用免疫组化染色检测大鼠海马CA3区p-Cx43和LC3的定位及其阳性细胞的吸光度值,造模后30 d采用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力的变化。结果Western blotting检测结果显示,与假手术组比较,癫痫组、癫痫+溶剂组大鼠造模后6 h、12 h、24 h海马CA3区p-Cx43、LC3蛋白的表达均增加;与癫痫组、癫痫+溶剂组比较,癫痫+CBX组大鼠各时间点海马CA3区p-Cx43、LC3蛋白的表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色检测结果显示,p-Cx43定位于海马星形胶质细胞的细胞膜和细胞质中,LC3定位于海马神经元胞质内。与假手术组比较,癫痫组、癫痫+溶剂组大鼠海马CA3区p-Cx43、LC3阳性细胞的吸光度值增加;与癫痫组、癫痫+溶剂组比较,癫痫+CBX组大鼠海马CA3区p-Cx43、LC3阳性细胞的吸光度值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Morris水迷宫实验结果显示,与假手术组比较,癫痫组、癫痫+溶剂组大鼠的逃避潜伏期明显延长;与癫痫组、癫痫+溶剂组比较,癫痫+CBX组大鼠的逃避潜伏期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CBX通过抑制癫痫大鼠海马CA3区星形胶质细胞p-Cx43蛋白的表达,减弱神经元自噬,从而减轻其认知功能损害。

  • 标签: 缝隙连接蛋白Cx43 自噬 认知功能 颞叶癫痫
  • 简介:摘要目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在激素性股骨头坏死(ONFH)骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达及其对细胞增殖的作用。方法收集20例激素性股骨头坏死和20例股骨颈骨折患者的股骨骨髓,分离培养BMSCs,培养至第3代用于实验。构建携Cx43的重组慢病毒载体,转染、筛选获得阳性细胞。实验分为A组:激素性股骨头坏死患者BMSCs组;B组:激素性股骨头坏死患者BMSCs经Cx43重组慢病毒感染组;C组:激素性股骨头坏死患者BMSCs经空载体感染组;D组:股骨颈骨折患者BMSCs组。检测上述分组中细胞增殖,细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)水平,增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)、Cx43 mRNA的表达水平。两组间比较采用t检验。结果D组细胞增殖能力高于A、B、C组,B组细胞增殖能力高于A、C组;D组线粒体膜电位明显高于A、B、C组(11.07±0.63比4.84±0.42、9.18±0.35、6.09±0.46,t=70.618、10.761、57.631,P<0.05)。B组线粒体膜电位明显高于A、C组(9.18±0.35比4.84±0.42、6.09±0.46,t=57.719、46.456,P<0.01),但仍低于D组;D组ROS水平明显低于A、B、C组(82.71±6.98比258.91±10.87、108.22±5.33、263.54±12.79,t=-93.457、-8.453、-11.304,P<0.05)。B组的ROS水平明显低于A、C组(108.22±5.33比258.91±10.87、263.54±12.79,t=-65.134、-9.562,P<0.01),但仍高于D组;经Cx43重组慢病毒感染后,B组Cx43 mRNA量显著增多,感染效果满意;过表达Cx43能明显促进PCNA、Cyclin D1、Cyclin E1基因转录。结论激素性股骨头坏死BMSCs中Cx43表达明显降低,过表达Cx43能显著地促进BMSCs增殖。

  • 标签: 缝隙连接蛋白43 细胞增殖 骨髓间充质干细胞 激素性股骨头坏死
  • 简介:摘要重症监护病房(ICU)患者死亡的主要原因是脓毒症,脓毒症及脓毒性休克严重影响患者的预后,增加了患者的病死率和再次发病率,早期、及时的干预可以降低脓毒症患者的病死率及复发率。脓毒症的发生可能与连接蛋白43(Cx43)的磷酸化有关,而Cx43的磷酸化需要通过各种信号通路实现。Cx43的相关位点通过不同信号通路发生磷酸化,实现了对脓毒症的精准调节,这些位点可能成为治疗脓毒症的相关靶点,为精准化治疗脓毒症提供方向。本文主要分析蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)等与Cx43相关的信号通路在脓毒症发生机制中的作用。

  • 标签: 脓毒症 连接蛋白43 信号通路 发生机制
  • 简介:摘要目的探讨间隙连接蛋白-43(Connexin-43, Cx43)对成骨细胞增殖和成骨分化的影响及调控机制。方法体外分离培养大鼠成骨细胞,在地塞米松作用下以茜素红染色和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测成骨细胞的成骨活性;Western-blot检测成骨细胞中Cx43的表达、成骨蛋白Runx2、ALP、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠtype,COL-Ⅰ)及增殖相关蛋白PCNA、CDK4的表达;免疫荧光染色检测成骨细胞成骨蛋白的表达;CCK8法检测成骨细胞增殖活力。构建慢病毒介导的Cx43基因过表达质粒(Lv-Cx43)并转染成骨细胞,检测成骨细胞的成骨活性及增殖能力。PD98059预处理过表达Cx43的成骨细胞,检测过表达Cx43成骨细胞的成骨活性及增殖能力。结果分离的成骨细胞具备成骨分化能力,1×10-6 mol/L地塞米松处理能够降低成骨细胞钙结节的形成;随地塞米松作用的时间增加,成骨细胞中Cx43、Runx2、ALP、COL-Ⅰ蛋白表达均呈逐渐下降趋势,且PCNA、CDK4及p-ERK1/2表达均下降;正常组成骨细胞在第0、1、2、3、4天的OD值分别为0.316±0.043、0.891±0.623、1.683±0.154、2.315±0.721、2.891±0.323,在地塞米松处理成骨细胞后分别为0.376±0.021、0.657±0.121、1.124±0.285、1.521±0.272、1.987±0.584,地塞米松处理组成骨细胞OD值在第2、3、4天均小于正常组(P<0.05)。对照组、转染空载慢病毒质粒(Lv-NC)组和Lv-Cx43组中Cx43 mRNA的相对表达量分别为0.541±0.086、0.598±0.018、1.000±0.082,Lv-Cx43组中Cx43 mRNA表达水平高于对照组和Lv-NC组(P<0.05)。对照组、Lv-NC组和Lv-Cx43组中Cx43蛋白条带与内参GAPDH条带灰度值的比值分别为0.816±0.737、0.738±0.643、1.145±1.101,与对照组和Lv-NC组比较Lv-Cx43的表达水平增高(P<0.05)。Lv-Cx43组中Runx2、ALP、COL mRNA的表达及相关标志蛋白表达水平均高于对照组和Lv-NC组;Lv-Cx43组中成骨细胞钙结节的数目高于对照组和Lv-NC组。Lv-Cx43+PD98059组中成骨细胞OD值和钙结节的数目低于Lv-Cx43组(P<0.05)。结论在地塞米松作用下成骨细胞的增殖和成骨分化能力明显下降,且细胞中Cx43表达下降;过表达Cx43能够促进成骨细胞的增殖和成骨分化,其调控机制可能通过ERK1/2通路实现。

  • 标签: 连接蛋白43 成骨细胞 细胞增殖 骨坏死
  • 简介:【摘要】目的:分析创伤性休克患者行无缝隙连接急救护理对急救成功率的影响。方法:采用单盲法将2021年1月-2022年1月我院收治的60例创伤性休克患者分为参照组和研究组,各30例,其中参照组行常规护理,研究组行无缝隙连接急救护理,对比两组急救时间、急救成功率、不良事件发生率。结果:研究组确诊时间、急诊至手术时间、急诊至病房时间、住院时间均较参照组更低,且急救成功率更高,不良事件发生率更低(P<0.05)。结论:创伤性休克患者行无缝隙连接急救护理可缩短抢救时间,提高急救成功率,避免不良事件发生。

  • 标签: 无缝隙连接急救护理 创伤性休克 急救成功率
  • 简介:【摘要】目的:分析创伤性休克患者行无缝隙连接急救护理对急救成功率的影响。方法:采用单盲法将2021年1月-2022年1月我院收治的60例创伤性休克患者分为参照组和研究组,各30例,其中参照组行常规护理,研究组行无缝隙连接急救护理,对比两组急救时间、急救成功率、不良事件发生率。结果:研究组确诊时间、急诊至手术时间、急诊至病房时间、住院时间均较参照组更低,且急救成功率更高,不良事件发生率更低(P<0.05)。结论:创伤性休克患者行无缝隙连接急救护理可缩短抢救时间,提高急救成功率,避免不良事件发生。

  • 标签: 无缝隙连接急救护理 创伤性休克 急救成功率
  • 简介:摘要目前胚胎种植成功率为30%~40%,并有研究证实有50%~75%的妊娠失败源于胚胎植入的异常。胚胎植入是正常妊娠建立的一个关键环节,子宫内膜容受性受损与子宫内膜间质蜕膜化失败是导致胚胎植入失败的主要原因。胚胎植入涉及一系列信号分子及细胞因子参与,许多研究证实缝隙连接蛋白参与胚胎植入及子宫内膜蜕膜化的调控。本文就连接蛋白在胚胎植入前子宫内膜容受性、内膜蜕膜化、血管重塑及植入过程中的作用及其调控机制作一综述,以期为不孕症、反复植入失败患者的治疗提供理论依据,为药物研发提供新的研究靶点。

  • 标签: 连接蛋白 胚胎植入 蜕膜化 子宫内膜容受性
  • 简介:摘要目的制备针对纤维连接蛋白亚型胞外结构域B(EDB-FN)的特异性分子探针18F-AlF-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸-(聚乙二醇)4-ZD2(18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2),并进行体内外理化性质评价。方法通过Al18F一步螯合标记的方法制备18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2,通过高效液相色谱(HPLC)测定其放化纯和体外稳定性,测定脂水分配系数(logP),并行细胞摄取实验[将三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞(1×106/管)分为3组(各3管),分别为阳性组、抑制组和控制对照组]。取MDA-MB-231荷瘤裸鼠(n=3;实验组)行18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2 microPET显像(30、60、90和120 min),并与阻断组(n=3;注射NOTA-PEG4-ZD2后0.5 h再注射18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2)进行对照。采用两独立样本t检验分析数据。结果成功制备18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2,优化后的放化产率为(33.8±2.1)%(未行衰变校正,n=8),放化纯>96%;37 ℃放置120 min,18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2在人血清和PBS中的放化纯均>93%,体外稳定性好;产物比活度为(11.1±3.2) GBq/μmol;logP为-1.43±0.05。注射18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2后120 min,阳性组肿瘤细胞摄取为(1.77±0.28)百分加样活度(%AR)/106个细胞,抑制组细胞摄取为(0.76±0.07)%AR/106个细胞(t=4.30,P=0.032)。荷瘤裸鼠microPET显像示,18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2主要经肝肾代谢,注射后60 min实验组肿瘤摄取为(1.94±0.21)每克组织百分注射剂量率(%ID/g),注射后90 min肿瘤/肌肉比值为3.80±0.25;阻断组注射后60 min肿瘤摄取为(0.43±0.09) %ID/g(t=3.18,P=0.006)。结论18F-AlF-NOTA-PEG4-ZD2制备简单、标记率高、体外稳定性好,microPET显像肿瘤摄取和靶本比高,特异性良好,有较长的肿瘤滞留时间,在EDB-FN高表达的三阴性乳腺癌中具有良好的应用前景。

  • 标签: 纤连蛋白类 同位素标记 氟放射性同位素 正电子发射断层显像术 体层摄影术,X线计算机 乳腺肿瘤 肿瘤细胞,培养的 小鼠,裸
  • 简介:摘要目的通过构建含有不同大小乘客结构域的Ag43表面展示载体,观察其将外源蛋白HPV16L1展示在细菌细胞表面的效率。方法(1)利用基因工程手段将不同长度的Ag43基因序列连接到pET22b载体,获得4种Ag43表面展示载体:Ag43/138、Ag43/551、Ag43/552、Ag43/700;(2)克隆HPV16L1编码基因序列,利用基因工程手段将其分别连接到上述4种Ag43表面展示载体,获得4种重组蛋白表达载体;(3)HPV16L1-Ag43融合蛋白表达及SDS-PAGE分析;(4)利用胰蛋白酶消化验证HPV16L1蛋白在大肠埃希菌的表面展示。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示PCR扩增获得的Ag43和HPV16L1条带与预期大小一致,表面展示载体和重组蛋白表达载体的基因序列均通过基因测序验证无误。经IPTG诱导后,构建的4种Ag43表面展示载体均能表达HPV16L1蛋白。胰蛋白酶消化后,4种重组蛋白条带均减弱,且Ag43/700-HPV16L1条带减弱最明显。结论成功构建了基于自转运蛋白Ag43的细菌表面展示载体,HPV16L1蛋白可通过构建的4种Ag43表面展示载体表达并展示在大肠埃希菌表面,且仅保留α-螺旋和β-桶状结构域部分的Ag43表达载体即Ag43/700的表面展示效果最优。

  • 标签: 自转运蛋白 细菌表面展示 HPV16L1 Ag43
  • 简介:[摘要]目的:探讨miR-206对急性心肌缺血再灌注(MIR)心肌细胞Cx 43表达的的影响及机制。方法:将H9C2大鼠心肌细胞分为:正常对照组、MIR组、miR-206 mimics组和阴性核苷酸组。使用糖氧剥夺再恢复构建心肌细胞MIR模型并培养,然后分别加入miR-206 mimics和阴性对照核苷酸转染。继续培养48h后收集细胞及培养基上清进行指标测定。结果:1.与正常对照组相比,MIR组细胞活力明显下降而凋亡率显著增加(p<0.05),miR-206 mimics组与MIR组比较,细胞活力进一步下降,凋亡率又有明显增加(p<0.05)。2.与正常对照组比较,MIR组Cx43、pCx43蛋白表达均明显下调,p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK、p-p38/p38、p-AKT/AKT等相关蛋白比值均明显下降,而P65蛋白和miR-206表达显著增加,两组间比较均有明显差异(P

  • 标签: miRNA-206 心肌缺血再灌注 心肌细胞 Cx43 MAPK
  • 简介:摘要:线缆组装件是系统之间、单元之间相互联系的纽带,线缆组件的质量是系统可靠、安全工作的基础。在生产过程中往往忽略其连接工艺,本文主要对比论述了我司电连接器常用的焊接和压接两种连接方式的工艺特点及失效模式,为电缆组件设计和生产人员提供一定的实操及理论指导。

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  • 简介:摘要TAR DNA/RNA结合蛋白43(TDP-43)是阿尔茨海默病(AD)等神经系统退行性疾病的致病因素之一,清除异常聚集的TDP-43可能是AD潜在的治疗靶点。泛素-蛋白酶体系统(UPS)是TDP-43蛋白的主要清除方式之一,UPS功能障碍在AD的发病机制和进程中起重要作用。故本文围绕TDP-43、UPS在AD发病进程中的作用,以及UPS介导清除TDP-43在AD治疗中的研究进展综述如下。

  • 标签: TAR DNA/RNA结合蛋白43 泛素-蛋白酶体系统 阿尔茨海默病
  • 简介:摘要:火力发电厂输煤系统缝隙式汽车卸煤沟在卸煤时出现的物料自流、料块飞溅,同时伴随大量粉尘飞扬等问题,是厂区无组织排放的重要组成部分,随着环保要求的日趋严苛和涉粉涉爆的安全管控,基于此提出煤沟挡板技术改造和优化方案,探讨汽车卸煤及叶轮给煤机运行时缝隙式煤沟底防溜煤、抑粉尘等措施的应用,有效改善工作环境,从而保证卸煤沟底的清洁,满足设备及工人安全作业,提高给煤效率。

  • 标签: 缝隙式煤沟挡板  惯性自流 料块飞溅 粉尘 闭锁 改善环境
  • 简介:摘要:由于我国经济的快速发展,交通基础建设也开始迈向新的领域。交通运输量不断增加,车辆的负荷率加大,使得桥梁运营出现问题。桥梁出现缝隙是桥梁运营中非常常见的一个问题,可能是运营过程中出现的裂缝,也可能是施工是内部受到影响形成的裂缝。本文针对当前的桥梁施工情况进行分析,对桥梁的施工防护进行探究,从而明确桥梁出现缝隙的原因,加强施工防护和修补措施。

  • 标签: 桥梁施工 缝隙成因 施工防护
  • 简介:摘要:各种桥型结构中为了使结构能建立起并运作,采用的不同种的连接方式与约束方式。并介绍了钢-混凝土组合结构桥梁的连接件的类型,以及设计要点。最后介绍了对未来设计桥梁的一些展望和未来的趋势:新材料,新结构,新理念。

  • 标签: 桥梁连接件 组合梁 未来趋势
  • 简介:摘要:每个大城市非常重要的交通工具就是地铁,为人们的生活、工作、出行提供了诸多方便。地铁车辆融合了各种先进的新技术,车辆充电量越来越大,电线也越来越复杂。尤其是伴随现阶段信息技术的开展,安装在车辆上的各种设备越来越多,而目前一个重要的研究课题就是车辆电气连接技术。列车电气安全的重要保障是城市轨道交通电气连接的准确性,地铁车厢继电器、接线端子、接插件等将连接比较密集,接线容易出现错误。鉴于地铁车厢电气连接的现状,对终端压接形式进行了研究,将讨论电气连接的一般形式及其好处以及缺点。

  • 标签: 地铁车辆 电气连接
  • 简介:摘要:探讨无缝隙护理模式在妇产科感染预防控制中的应用效果。方法:从我院妇产科收治患者中选取住院患者90例(2020年5月至2021年8月收治)开展本次研究,分为两组,其中实施常规护理的45例划分至对照组,实施无缝隙护理模式的45例划分至研究组,比较两组不同护理模式下感染率及对护理服务的满意度。结果:对比两组总感染率,对照组8.89%(4/45)>研究组2.23%(1/45);对比两组护理满意度,对照组91.12%(41/45)

  • 标签: 无缝隙护理 妇产科 感染预防控制 应用效果
  • 简介:摘要:随着医疗技术的发展,人们对妇产科的服务质量和护理工作提出了更高要求。在医院护理工作中,妇产科的护理工作繁多复杂。通过分析妇产科的护理现状,从影响妇产科护理质量的几个关键因素入手,提出提高妇产科护理质量的安全管理措施,其主要包括:重视对患者入院后的健康教育、提高护理人员的护理水平、建立健全安全护理管理制度。护理人员要在医院的各种护理技术培训活动中不断提升自己的专业技术水平,在与病患沟通的过程中,保持积极的态度,及时做好与患者及家属的沟通交流工作,做好患者的健康宣教工作,不断提高妇产科的护理工作质量。

  • 标签: 妇产科 质量控制 安全管理
  • 简介:摘要:文章结合水工隧洞灌浆施工实践经验,主要针对水工隧洞灌浆施工中注意要点进行了分析与研究,并提出了自己的看法及建议,旨在为以后隧洞灌浆施工提供参考与借鉴。

  • 标签: 水工隧洞回填灌浆固结灌浆施工技术
  • 简介:摘要:电感耦合等离子质谱法(ICP-MS)检测超纯水中43项痕量金属杂质。将传统需三次实验简化成一次,保证检验准确性及精密度的同时,达到降本增效的目的。实验结果证明:实验校正曲线线性相关系数、检验回收率、检验相对标准偏差均符合要求。此优化方法可行,值得推荐。

  • 标签: ICP-MS检测 半导体 检测方法优化 降本增效