简介:摘要:食品安全是一个越来越引起人们重视的问题,不仅影响到人们的生活、工作和健康,更是关系到国计民生的大事。在各种食物中毒中,细菌性食物中毒是食物中毒的主要因素。多重 PCR是通过在同一个 PCR反应体系中,引用多对引物,同时完成多个特异性目的基因片段的扩增方法,具有高效、系统、经济简易的优点。本文对多重 PCR技术在食品病原细菌检测中的应用进展进行了综述。
简介:Objective:Tocomparethesensitivityandspecificityofthecervical/urethralswabswithvoidedurinespecimensforthedetectionofgenitourinarytractinfectionwithChlamydiatrachomatisanddeterminewhetherurinespecimenscanreplacethecervical/urethralswabsindetectionofC.trachomatis.Methods:Thematchedcervical/urethralswabsandvoidedurinespecimenswerecollectedfrom569patientsofSTDclinics.Polymerasechainreaction(PCR)assayspecificforC.trachomatisplasmidDNAandrapidantigentesting(Clearviewassay)wasusedtodetectC.trachomatis.Standardcriteriathatdefined""""true""""positiveincluded:1)positivePCRresultsbothincervical/urethralswabandvoidedurinespecimenor2)positivevoidedurineresultsbothbyPCRassayandclearviewtestor3)positiveresultsinbothPCRassayofcervical/urethralswabandclearviewtestofvoidedurine.Forstatisticalanalysis,thechi-squaretestwasused.Results:TheprevalenceofC.trachomatisinpatientswithsymptomswas12.1%(28/231)inwomenand10.4%(10/96)inmen,withnosignificantdifferencebetweenthem(x^2=0.21,P>0.05).TheprevalenceofC.trachomatisinpatientswithnosymptomswas11.0%(11/100)inwomenand15.5%(22/142)inmen,withasignificantdifferenceexistingbetweenthem.(x^2=4.0,P<0.05).Nosignificantdifference(P>0.05)existedbetweenPCRtestingofswabs(sensitivity87.3%;specificity99.2%)andPCRtestingofurine(sensitivity88.7%;specificity98.8%).Asforclearviewassay,sensitivitywas60.6%andspecificitywas100%.Conclusions:PCRassayissuperiortoclearviewindetectingC.trachomatis.AlthoughbothPCRtestingofswabsandPCRtestingofurinespecimensbothhavehighsensitivityandspecificity,urinespecimentestingismorecost-effective,practicalandnoninvasive.ThusurinespecimenscantaketheplaceoftheswabsinPCRtestingforchlamydia.
简介:目的:探讨荧光定量PCR仪检测疟原虫的应用价值。方法:选取我省出入境单位收集到的已经镜检法证实为恶性疟疾的全血样本32例、镜检为阴性的全血样本13例作为研究对象,所有样本中均提取DNA并加入RT-PCR检测试剂进行荧光定量PCR仪检测,观察分析检测结果。结果:荧光定量PCR仪检测结果显示:恶性疟疾全血样本23例、间日疟疾全血样本11例,阴性全血样本11例,诊断符合率95.6%。复检结果显示:2例标本通过PCR扩增、序列对照,发现其测序结果与公布的疟原虫序列一致,确定均含有疟原虫。结论:荧光定量PCR仪检测疟原虫的应用价值高,能够敏感、可靠的检出疟原虫DNA。
简介:目的:建立党参的ISSR-PCR反应体系,为今后利用ISSR标记技术进行党参鉴定及种质遗传多样性分析提供一个标准化程序.方法:采用试剂盒法提取党参基因组DNA为模板,通过单因素实验分析了ISSR-PCR反应体系中MgCl2、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、模板DNA用量及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响.结果:建立了重复性好,分辨率高的ISSR-PCR反应体系,即在25μL反应体系中,含有10×PCRBuffer缓冲液2.5μL,MgCl22.0mmol·L-1,dNTPs0.5mmol·L-1,引物0.4μmol·L-1,TaqDNA聚合酶1.0U,模板DNA为30ng;扩增程序为:94℃预变性5min,然后94℃变性30s,51.7℃退火1min,72℃延伸1.5min,共计35个循环,循环结束后在72℃延伸7min,4℃保存.结论:建立了适用于党参的ISSR-PCR反应体系,为应用ISSR技术鉴定党参种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础.
简介:AllfactorsaffectingthePCRsysteminPinusmassonianaLambwereinvestigatedonebyone.TheresultsshowthattheoptimumPCRsystemofEST-SSRwere:2μL10×Buffer(Mg2+Free),30ngtemplateDNA,0.1875mmol/LdNTPs,3.75mmol/LMg2+,8pmolprimerpair,1.0UTaqDNApoly-meraseintotal20μLreactionsystem.Finally,atotalof11isolatesofP.massonianawasusedfortestingthestabilityofthePCRamplification.TheresultsprovethattheoptimumPCRsystemwasstable,reliable,highlyrepetitive.
简介:【摘要】目的:分析实时定量PCR实验室开展强化管理对污染的预防效果。方法:我中心于2020年6月在实时定量PCR实验室开展强化管理,分别于强化管理开展前(2019年6月-2020年5月)、强化管理开展后(2020年6月-2021年5月)对工作人员项目合格率进行对比。结果:强化管理后,工作人员操作流程知晓、污染来源知晓、个人防护措施、手卫生、污物处理、高压消毒锅使用等检查项目合格率均较强化管理前更高,数据差异有统计学意义(P<0.05)。结论:实时定量PCR实验室开展强化管理有助于提高工作人员防范意识,做好污物处理,避免污染发生,值得推广。