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  • 简介:着色芽生菌病(chromoblastomycosis)是由暗色真菌引起皮肤及皮下组织慢性肉芽肿性疾病。致病真菌常通过皮肤微小外伤侵入,损害好发于四肢远端暴露部位。临床表现为疣状增生性斑块或结节,病程持久,迁延不愈。最近我们用伊曲康唑治愈1例着色芽生菌病患者,报告如下。

  • 标签: 着色芽生菌病 伊曲康唑 治疗
  • 简介:目的报告1例茄病镰刀霉引起皮肤透明丝孢霉病。方法从患者皮损取材作真菌镜检、培养及组织病理学检查。结果直接镜检及组织病理切片均发现真菌菌丝,3次培养均为同一菌株生长。镜下可见大分生孢子基部细胞短、钝圆,小分生孢子呈假头状着生,可见厚壁孢子。根据以上形态学特征鉴定为茄病镰刀菌。结论对于透明丝孢霉病应早期诊断,并进行体外抗真菌药物敏感试验,明确并有效控制基础疾病。

  • 标签: 茄病镰刀菌 透明丝孢霉病 皮肤
  • 简介:目的:应用重组杆状病毒表达系统制备由HA、NA、M1和M2蛋白组成H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒,为研究H5N1高致病性禽流感疫苗奠定基础。方法:构建能共表达A/chicken/Jilin/2003(H5N1)禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)、A/PR/8/34(H1N1)流感病毒基质蛋白(M1)和离子通道蛋白(M2)2个二元重组杆状病毒,共同感染HighFive细胞,同时表达HA、NA、M1和M2蛋白,使这4种蛋白在感染细胞内自主组装成病毒样颗粒。经差速离心和蔗糖密度梯度超速离心收获病毒样颗粒,通过Western印迹鉴定病毒样颗粒组成,透射电镜观察病毒样颗粒形态,血凝试验测定病毒样颗粒活性。结果:HA、NA、M1、M2蛋白在昆虫细胞中共表达,并组装成病毒样颗粒;电镜观察到病毒样颗粒形态与流感病毒一致,直径约80nm;血凝试验显示该病毒样颗粒具有凝集鸡红细胞活性。结论:应用该方法可以制备流感病毒样颗粒,为H5N1流感疫苗研究提供了可行方案。

  • 标签: 流感病毒 病毒样颗粒 杆状病毒
  • 简介:目的构建用于白念珠菌MXR1基因敲除载体质粒,并通过Ura-Blaster策略敲除MXR1两条等位基因。方法分别扩增白念珠菌MXR1基因ORF两侧上下游片段,通过酶切与连接反应,将上下游片段分别插入到p5921质粒hisG-URA3-hisG盒两端,从而形成MXR1敲除载体质粒pUC-MXR1-URA3。通过Ura-Blaster策略将载体质粒转染到白念珠菌RM1000内,并采用PCR和Southern-blot杂交方法鉴定各步转染、复筛所得阳性克隆。结果成功获得MXR1基因缺失菌株。结论MXR1基因缺失菌株构建,有助于深入研究白念珠菌耐药机制。

  • 标签: 白念珠菌 MXR1基因 基因敲除
  • 简介:目的构建可用于白念珠菌YPD1基因敲除质粒。方法克隆白念珠菌YPD1基因,构建YPD1载体质粒;通过酶切反应,将p5921中标记基因URA3插入载体质粒YPD1中,形成同源重组质粒。结果成功获得YPD1载体质粒pBluescript-YPD1和敲除质粒pBluescript-YPD1-URA3。结论所获得质粒pBluescript-YPD1-URA3可用于白念珠菌YPD1基因同源重组敲除。

  • 标签: 白念珠菌 基因 质粒
  • 简介:矮脆突变体dwf1(dwarfandfragile1)来源于EMS诱变处理籼型恢复系缙恢10号,主要表现为根、茎、叶、叶鞘、子粒等器官特别脆,同时植株变矮、叶片披垂。株高、穗长、结实、节间长以及千粒重有不同程度降低,细胞壁中纤维素和木质素含量下降、半纤维素含量增加,机械强度下降。茎秆表面锯齿状突起尖锐,薄壁细胞较野生型小、细胞大小不一致、排列紊乱,细胞形状不规则、长度稍有变短。该突变性状受一对隐性核基因控制,位于第9染色体上标记Ind6与Ind4之间,dwf1相对于野生型在LOC_Os09g25490第7外显子上有一个碱基错义突变,导致氨基酸由半胱氨酸突变为精氨酸,该突变发生在基因高度保守区域内。dwf1对深入研究水稻变矮变脆机制具有重要意义。

  • 标签: 水稻(Oryza SATIVA L.) dwf1突变体 矮秆 脆秆
  • 简介:为研究烟草黑胫病不同亲本来源抗性遗传规律,定位抗性基因位点,本研究利用抗黑胫病品种Beinhart1000-1构建了220个F2分离群体。通过病圃接种鉴定和遗传分析,确定Beinhart1000-1对烟草黑胫病抗性由多基因控制。利用筛选到70对稳定SSR引物对烟草黑胫病抗性进行了QTL分析,绘制了一张包含14条染色体遗传连锁图谱,且定位到5个与烟草黑胫病抗性紧密相关QTLs,分别在2、33、6、12号染色体上,其贡献分别为6.2%、6.0%、6.7%、5.6%和5.1%。此结果使烟草黑胫病抗性研究进一步深入,推进了烟草黑胫病分子标记辅助选择。

  • 标签: 烟草 Beinhart1000-1 黑胫病 SSR QTL定位
  • 简介:耶氏肺孢子菌肺炎(Pneumocystisjirovecipneumonia,PJP,但习惯上仍简称PCP)常发生于未经高效抗反转录病毒药物治疗(highlyactiveantiretroviraldrugstherapy,HAART)艾滋病(acquiredimmunodeficiencysyndrome,AIDS)患者及PCP一级预防(即CD4+T淋巴细胞计数〈200×10^5/L患者接受抗PCP预防性化疗)广泛应用之前,

  • 标签: 卡泊芬净 艾滋病 肺孢子菌肺炎
  • 简介:根据转录组测序获得钙依赖蛋白激酶基因EST序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从油菜中克隆获得BnCDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其cDNA和gDNA全长分别为2115bp和2857bp,含有11个内含子和12个外显子。生物信息学分析表明其开放阅读框为1581bp,编码527个氨基酸,具有CDPKs家族典型特征,含有1个激酶区域和4个钙离子手型结构域,与拟南芥AtCDPK28同源性最高,属于第Ⅳ亚家族。BnCDPK1在油菜根、茎、叶、花、种子中均有表达,但表达丰度存在差异,叶片中表达量最高,其次为茎、根和种子,花中表达量最低;在高抗和高感油菜品种中,菌核菌胁迫均能够诱导BnCDPK1上调表达,但是高抗品种比高感品种反应更迅速,表达量更高。接种前、接种后12h、接种后24h,高抗品种表达量相比高感品种分别提高1.4倍、4倍和3倍,推测其可能参与油菜生长发育以及油菜对菌核菌侵染应答和防御反应。

  • 标签: 油菜 钙依赖蛋白激酶 基因克隆 基因表达 抗病
  • 简介:目的探究ripply1基因在斑马鱼早期背腹轴发生过程中作用.方法利用斑马鱼整封原位杂交技术揭示ripply1基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中表达模式,通过显微注射技术在胚胎1细胞期注射ripply1mRNA来高表达Ripply1蛋白并在后期观察胚胎背腹标记基因变化及胚胎形态变化.利用Tol2转基因技术构建ripply1启动子驱动GFP转基因鱼.结果原位杂交结果显示ripply1基因在斑马鱼原肠早期胚盾期特异表达在胚盾处,即预定背部.高表达ripply1后,在胚盾期背部标记基因表达范围扩大,腹部标记基因表达减弱,受精后24小时胚胎表现出严重背部化表型:头部增大,腹部卵黄延伸减弱,尾部躯干及尾部区域减少,有的甚至形成了第二个体轴.得到转基因鱼揭示ripply1母源表达,并且转录起始位点上游1200个碱基驱动GFP能模拟内源基因表达图式.结论ripply1可能参与斑马鱼胚胎早期背腹轴发生.

  • 标签: 斑马鱼 ripply1 早期胚胎发育 背腹发生
  • 简介:目的:克隆并表达caspase-8/10相关RING结构域蛋白1(CARP1)基因,检测其泛素连接酶活性。方法:提取结肠癌HCT116细胞总RNA,RT-PCR扩增CARP1基因,将其克隆到真核表达载体pcDNA3-Flag中,序列正确阳性克隆进行扩增,提取质粒转染至293T细胞中进行瞬时表达,通过体内泛素化检测其泛素化酶活性,通过萤光素酶报告基因方法检测其对NF-kB转录活性影响,利用细胞生长曲线检测CARP1基因对结肠癌细胞生长影响。结果:免疫印迹实验表明CARP1基因在293T细胞中获得有效表达;免疫共沉淀实验表明,当CARP1存在时,受体相互作用蛋白1(RIP1)被泛素化;萤光素酶实验结果表明CARP1抑制肿瘤坏死因子a(TNFa)引起NF-kB报道基因激活;通过生长曲线发现CARP1能促进结肠癌细胞系HCT116生长,并能部分抵抗顺铂抑制细胞生长作用。结论:构建的人CARP1基因真核表达载体在293T细胞中获得表达,表达产物具有RIP1泛素连接酶活性,可抑制TNFa引起NF-kB报告基因激活,并且促进结肠癌细胞生长,为进一步基因功能研究奠定了基础。

  • 标签: CASPASE 8 10相关RING结构域蛋白1 真核表达 泛素连接酶 细胞生长
  • 简介:椎间盘退行性变动物模型已经应用于研究椎间盘生物力学行为、生物化学变化和生物学改变。为了探讨生骨蛋白-1(OsteogenicProtein-1,OP-1)在椎间盘合成代谢和抗分解代谢中作用,美国Rush大学生化系ChubinskayaS等人用椎间注射方法制作了椎间盘退行性变模型,并用生物学和免疫组化方法开展了研究工作。该实验共用了34只大鼠,分成5组:空白对照组、阴性对照组、核浆(nucleuspulposus,NP)盐注射加压组、两组OP-1注射组:COP-1组(椎间盘注射OP-1后持续加压)和ROP-1组(OP-1注射后停止加压)。

  • 标签: 椎间盘 分解作用 挤压性 慢性 生物化学变化 动物模型
  • 简介:头癣是一种常见浅部真菌感染性疾病,多发生于儿童。大量流行病学资料显示其发病逐年上升。由于头癣愈后可形成萎缩性瘢痕或永久性秃发,严重影响患者身心健康,因此明确头癣发病机制意义重大。目前头癣发病机制尚不清楚,国内尚无系统相关研究综述。该文针对头癣发病机制国内外相关研究成果,从镜下真菌-头发形态学变化、头癣与蛋白酶、头癣与宿主免疫等方面详细介绍最新研究动态。

  • 标签: 头癣 发病机制 扫描电镜 蛋白酶 宿主-免疫
  • 简介:目的:构建EF-1α-Flag到pcDNA3.0表达载体上,在哺乳动物细胞中表达并纯化延伸因子1α(EF-1α),测定其对体外蛋白翻译影响。方法:通过PCR技术从293T细胞cDNA文库中扩增EF-1α基因片段,连接到pcDNA3.0载体上,经电泳、测序和转入细胞中检测EF-1α-Flag蛋白表达等方式验证所构建重组质粒是否正确,然后经Flag肽置换法纯化出EF-1α蛋白用于体外蛋白翻译实验,萤光素酶活性检测翻译出蛋白含量。结果:测序和蛋白表达鉴定结果表明扩增EF-1α-Flag基因序列正确,所构建重组载体在哺乳动物细胞中能获得表达;考马斯亮蓝染色发现经Flag肽置换EF-1α蛋白纯度较高,在体外蛋白翻译实验中EF-1α蛋白能促进蛋白翻译。结论:从哺乳动物细胞中纯化EF-1α蛋白能促进蛋白翻译,可能与其作为翻译延伸因子相关,为进一步研究EF-1α功能奠定了基础。

  • 标签: 延伸因子1α Flag肽置换 蛋白翻译
  • 简介:Inthispaperwedevelopanelasto-dynamicmodelofthehumanarmforuseinneuro-muscularcontrolanddynamicinteractionstudies.Themotivationforthisworkistopresentacasefordevelopingandusingnon-quasistaticmodelsofhumanmusculo-skeletalbiomechanics.Themodelisbasedonhybridparametermultiplebodysystem(HPMBS)variationalprojectionprinciples.Inthispaper,wepresentanoverviewoftheHPMBSvariationalprincipleappliedtothefullelasto-dynamicmodelofthearm.Thegeneralityofthemodelallowsonetoincorporatemuscleeffectsaseitherloadstransmittedthroughthetendonatpointsoforiginandinsertionorasaneffectivetorqueatajoint.Thoughthetechniqueissuitablefordetailedboneandjointmodeling,wepresentinthisinitialeffortonlysimplegeometrywiththebonesdiscretizedasRayleighbeamswithelongation,whileallowingforlargedeflections.Simulationsdemonstratetheviabilityofthemcthodforuseinthecompanionpaperandinfuturestudies.

  • 标签: elasto-dynamics HYBRID PARAMETER system musculo-skeletal MODEL
  • 简介:在这研究,L1蛋白质定序的人乳头状瘤病毒(HPV)107种类型从可得到数据库,和这些HPVL1蛋白质原子本地化信号(NLS)被获得被生物信息分析分析并且预言。从107种类型,39种类型NLS被PredictNLS软件(由两部组成NLS35种类型和单音深裂NLS4种类型)预言。留下HPV类型NLS象NLS一般规则一样根据特征和已经预言NLS相同被预言。根据结果,HPVL1蛋白质107种类型NLS被分类进15个范畴。在一样NLS范畴HPVL1蛋白质不同类型能分享类似或一样nucleocytoplasmic运输小径。他们可能被用作一样目标阻止并且对待HPV感染不同类型。结果也证明生物信息技术能被用来分析并且预言蛋白质NLS。

  • 标签: 疾病预防 核信号 人类乳头瘤病毒 病毒感染
  • 简介:ToexplorethemolecularmechanismofchromatinremodelinginvolvedintheregulationoftranscriptionalactivationofspecificgenesbyamyogenicregulatoryfactorMyogenin,weusedNIH3T3fibroblastswithastablyintegratedH1.1-GFPfusionproteintomonitorhistoneH1movementdirectlybyfluorescencerecov-eryafterphotobleaching(FRAP)inlivingcells.TheobservationfromFRAPexperimentswithmyogenintransfectedfibroblastsshowedthattheexchangerateofhistoneH1inchromatinwasobviouslyincreased,indicatingthatforcedexpressionofexogenousMyogenincaninducechromatinremodeling.Thehyper-acetylationofhistonesH3andH4frommyogenintransfectedfibroblastswasdetectedbytriton-acid-urea(TAU)/SDS(2-D)electrophoresisandWesternblotwithspecificantibodiesagainstacetylatedN-terminiofhistonesH3andH4.RT-PCRanalysisindicatedthatthenAChRa-subunitgenewasexpressedinthetrans-fectedfibroblasts.TheseresultssuggestthattheexpressionofexogenousMyogenincaninducechromatinremodelingandactivatethetranscriotionofMvogenin-targetedgeneinnon-musclecells.

  • 标签: 染色体 组蛋白 染色体改变 乙酰化
  • 简介:目的:报道1例马尔尼菲青霉败血症。方法患者男性,39岁,主因“发热伴淋巴结肿大1个月”就诊。进行骨髓瑞士染色、血液接种于有氧及厌氧培养瓶、沙氏培养基培养等检查,并对培养物进行形态学及rDNA序列鉴定。结果骨髓涂片见细胞内分隔孢子,3种培养方法均见真菌生长。沙氏培养基上菌落为丝状菌,表面为黄绿色粉末状,背面为红色;脑心浸汁培养基为酵母样菌落,37℃培养受限制。经DNA序列分析,与马尔尼菲青霉相似性在100℅,鉴定为马尔尼菲青霉。患者诊断为艾滋病并马尔尼菲青霉败血症,立即给予氟康唑治疗,转入传染病医院后因极度衰弱死亡。结论败血症可作为马尔尼菲青霉病首发症状,临床应予以重视;患者血液极具传染性,应注意隔离;对于有冶游史不明原因发热患者,注意考虑本病可能,必要时行血液培养及HIV检测。

  • 标签: 马尔尼菲青霉 败血症 AIDS
  • 简介:肺曲霉感染分为侵袭性曲霉病、半侵袭性曲霉病(包括过敏性支气管肺曲霉病和过敏性肺炎)、过敏性曲霉病和曲霉球等4型。肺曲霉球是寄生型肺曲霉感染,大多寄生在肺结核、支气管扩张、肺囊肿、慢性肺脓肿、肺癌等空洞或空腔内。

  • 标签: 伊曲康唑 肺曲霉球 病例报告