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  • 简介:目的比较正常组、模型组及对照组图形视觉诱发电位(PVEP)和扫描视觉诱发电位(SVEP)视力,研究各组视觉电生理表现,探讨单眼睑缝合1周是否可以建立形觉剥夺性弱视模型。方法分析三组PVEP波形变化、潜时及完成一次诱发反应时间;比较各组由SVEP得出客观视力。结果①正常组PVEP由2个波峰组成“M型”(正向波向上),模型组及对照组出现波分离一波形由多个波组成,而且完成一次反应时间延长。②缝合侧N75延迟,SVEP视力较正常组差且差别有统计学意义。③对照组未缝合侧视力恢复到正常水平而缝合侧视力仍差且与正常组有统计学差异。结论短期形觉剥夺视觉电生理变化是弱视猫一种表现,单眼睑缝合1周即可建立形觉剥夺性弱视猫模型。

  • 标签: 弱视 形觉剥夺 视觉电生理
  • 简介:目的克隆广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区(CDS)序列,利用RT-PCR和QRT-PCR方法分析PGC-1αmRNA组织表达情况。方法本实验以广西巴马小型猪背最长肌cDNA为模版,PCR扩增PGC-1α基因CDS序列,将其连接至pEASY-T5载体,转染细菌、验证和序列测定;通过RT-PCR半定量和QRT-PCR实时荧光定量检测PGC-1α基因在小型猪多个组织中表达情况。结果克隆获得广西巴马小型猪PGC-1α基因CDS序列,全长2391bp,编码796个氨基酸,与参考序列同源性为99.9%,两处碱基发生同义突变,分别是C-A1105和GA1524;PGC-1α基因在广西巴马小型猪心脏和肾脏中表达丰度最高,其次是肝脏、皮下脂肪和背最长肌,而在胰腺中未检测到其表达。结论成功克隆了广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区序列并进行了多种组织表达分析,为后续研究PGC-1α在小型猪2型糖尿病发生过程中作用途径打下基础。

  • 标签: 广西巴马小型猪 PGC-1Α基因 序列分析 组织表达
  • 简介:摘要二乙酰胆碱酯酶(王牌)基因在许多昆虫种类被报导了。在象Helicoverpaassulta和Plutellaxylostellas那样害虫,ace1基因编码是organophosphorus(OP)和氨基甲酸酯杀虫剂主要目标的占优势synaptic酶。杀虫剂选择影响王牌基因进化,这被报导了。驯养蚕,Bombyx粗腐殖质i,也有二王牌基因。当这没在过去十年面对杀虫剂选择,我们在蚕学习了王牌基因表情和酶活动。二王牌基因,Bm-ace1和Bm-ace2表情层次,被量即时聚合酶链反应估计。Bm-ace2在不同发展阶段或纸巾所有测试样品比Bm-ace1更高度被表示,建议ace2,而非ace1,在Bombyx粗腐殖质i是乙酰胆碱酯酶(疼痛)主要类型。这与上述鳞翅目ons不一致农业害虫,部分由于可以在这些害虫导致ace1基因高表示杀虫剂普遍使用。除在头高表示以外,Bm-ace1也在丝绸腺高度表示,Bm-ace2充满细菌线,暗示两王牌基因可以有在开发潜在non-hydrolytic角色。而且,我们发现二王牌基因和他们比率(ace2/ace1)mRNA层次在第一和第三中间形态把白天改变到白天。这质问作为一个酶答案用粗略摘录估计酶活动常规方法,因为它是AChE1和AChE2混合物。为分开不同疼痛一个有效、简单方法为可靠毒物学分析是必要

  • 标签: 乙酰胆碱酯酶 基因 活性 小菜蛾
  • 简介:Inmacrophages,theaccumulationofcholesterylesterssynthesizedbytheactivatedacyl-coenzymeA:cholesterolacyltransferase-1(ACAT1)resultsinthefoamcellformation,ahallmarkofearlyatheroscleroticlesions.Inthisstudy,withthetreatmentofaglucocorticoidhormonedexamethasone(Dex),lipidstainingresultsclearlyshowedthelargeaccumulationoflipiddropletscontainingcholesterylestersinTHP-1-derivedmacrophagesexposedtolowerconcentrationoftheoxidizedlow-densitylipoprotein(ox-LDL).Morenotably,whentreatedtogetherwithspecificanti-ACATinhibitors,theabundantcholesterylesteraccumulationwasmarkedlydiminishedinTHP-l-derivedmacrophages,confirmingthatACATisthekeyenzymeresponsibleforintracellularcholesterylestersynthesis.RT-PCRandWesternblotresultsindicatedthatDexcausedup-regulationofhumanACAT1expressionatboththemRNAandproteinlevelsinTHP-1andTHP-1-derivedmacrophages.TheluciferaseactivityassaydemonstratedthatDexcouldenhancetheactivityofhumanACAT1geneP1promoter,amajorfactorleadingtotheACAT1activation,inacell-specificmanner.Furtherexperimentalevidencesshowedthataglucocorticoidresponseelement(GRE)locatedwithinhumanACAT1geneP1promotertoresponsetotheelevationofhumanACAT1geneexpressionbyDexcouldbefunctionallyboundwithglucocorticoidreceptor(GR)proteins.ThesedatasupportedthehypothesisthattheclinicaltreatmentwithDex,whichincreasedtheincidenceofatherosclerosis,mayinpartduetoenhancingtheACAT1expressiontopromotetheaccumulationofcholesterylestersduringthemacrophage-derivedfoamcellformation,anearlystageofatherosclerosis.

  • 标签: 巨噬细胞 地塞米松 泡沫细胞 人类 基因 表达
  • 简介:目的:构建猪α-1,3-半乳糖转移酶(GGTA1)基因正负筛选打靶载体。方法:以原代猪胚胎成纤维细胞基因组DNA为模板,采用长程PCR方法扩增出GGTA1基因2条片段;以长约2kb包含部分第9外显子片段为同源短臂,在XbaI和ClaI位点插入pLoxP质粒正筛选标记neo基因3’端;以长约5.4kb包括部分第8外显子、全部第8内含子及部分第9外显子片段为同源长臂,于NotI位点插入该质粒中聊D基因5’端;2.7kb负筛选标记船基因位于载体中同源短臂3’端外侧。结果与结论:酶切、PCR及测序结果表明,同源臂被正确连接至质粒pLoxP,成功构建了猪GGTA1基因正负筛选打靶载体pSL/GT。

  • 标签: α-Gal表位 猪α-1 3-半乳糖转移酶 基因打靶 异种移植
  • 简介:缺氧诱导因子-1(hypoxia-induciblefactor-1,HIF-1)是细胞在低氧状态下起重要作用核转录因子。体内真菌感染部位常形成缺氧微环境,从而激活HIF-1并在抗真菌感染免疫中起到重要作用。该文就HIF-1结构、活性调控及相关信号通路,真菌感染与缺氧关系,HIF-1对宿主抗真菌免疫影响等方面进行了综述。

  • 标签: 缺氧诱导因子-1 抗真菌免疫 烟曲霉 组织胞浆菌 白念珠菌
  • 简介:为了探明CBF转录因子在扁桃中抗寒分子机理,以新疆栽培扁桃‘矮丰’叶片为材料,通过PCR技术从扁桃基因组DNA中获得CBF1转录因子,命名为AF-PdCBF1,GenBank登录号为KM245570。序列分析表明,该基因开放阅读框为729bp,编码242个氨基酸,推测蛋白质分子量为27.405kD,并且该蛋白没有信号肽。进化树分析表明,AF-PdCBF1与甜樱桃和中国梅亲缘关系最近。将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中,构建融合表达质粒pET-PdCBF1,转化到E.coliRosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE电泳检测结果表明,表达蛋白与预期大小一致,分子量大小约为47.8kD。对重组蛋白诱导条件进行优化后结果表明,重组蛋白pET-PdCBF1在IPTG浓度为0.2mmol/L、诱导4h时,其表达量最佳。试验结果可为进一步纯化和鉴定目的蛋白及研究其功能奠定基础。

  • 标签: 扁桃 CBF1转录因子 原核表达
  • 简介:报道以反复多发脓肿为表现播散型隐球菌病患者1例。患者男,68岁,因"全身反复多发性脓肿1a,伴低热2个月余"入院,该患者以背部脓肿起病,反复发作累及肺部、骨骼、皮肤等多部位,多次组织及血标本病原学检查、隐球菌乳胶凝集试验均阴性,给予多种抗菌药物治疗无效,后在右髂部脓肿切开组织物中培养到新生隐球菌。经脓肿切开引流及静脉滴注两性霉素B脂质体联合伊曲康唑治疗后,脓肿消退,症状消失,改用氟康唑联合氟胞嘧啶治疗4个月后停药,并已随访至今7个月,患者未有发热及新脓肿出现。

  • 标签: 多发脓肿 播散型隐球菌病 新生隐球菌
  • 简介:甘薯(Ipomoeabatatas(L.)Lam.)作为世界上一种重要粮食、饲料、工业原料及新型能源作物,从有性生殖F1选择优良实生系进行选择育种一直是甘薯育种重要方式。为了优化甘薯杂交育种方法,合理选配杂交组合,提高育种效率,本试验利用SSR标记研究了甘薯杂交群体基于SSR标记及13个农艺性状遗传多样性,得到了群体内聚类图,并且筛选出了甘薯高产株系。群体SSR标记聚类分析结果显示,群体材料与各亲本遗传距离比较远,被聚为3类,而亲本单独聚在另外一类。13个农艺性状聚类将亲本与部分群体材料聚在了一起,且将群体材料和亲本材料作为一个整体时,其遗传距离变异高达30%以上,远远高于SSR标记所获得遗传变异系数。

  • 标签: 甘薯 群体材料 遗传多样性
  • 简介:目的:通过检测藏獒黑素皮质激素受体1(MClR)基因单链构象多态性(SSCP)在不同毛色群体中分布,探讨MClR基因多态性与毛色表型相关性。方法:采用DNA测序技术,选择不同毛色藏獒DNA为样本,根据GenBank发布荷斯坦牛MClR基因序列设计一对引物,采用PCR-SSCP技术分析MClR基因在藏獒中SSCP。结果:MClR基因在藏獒中具有PCR-SSCP多态性,分别检测到3种基因型(AA、AB和BB);对MClR基因多态性片段DNA克隆测序后发现,MClR基因在编码区第313位存在单碱基突变(G-,A),该突变导致第105位氨基酸发生由丙氨酸向苏氨酸改变(T105A)。结论:肘CJR基因多态性与毛色性状不存在显著相关性。

  • 标签: 藏獒 毛色 黑素皮质激素受体1基因 多态性 PCR-SSCP
  • 简介:目的:采用巢式PCR对甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体轻链和重链基因进行扩增,对获得基因进行序列分析,并找出克隆鼠Igκ轻链和重链可变区基因通用方法。方法:设计22对扩增鼠Igκ轻链可变区和重链可变区基因引物,对6株鼠抗人甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体轻链和重链可变区基因进行克隆并测序,与NCBI公布鼠免疫球蛋白序列比对分析。结果:巢式PCR方法可以有效避免单克隆抗体克隆过程假基因,并且得到单克隆抗体氨基酸序列均符合鼠免疫球蛋白可变区特征。结论:建立了克隆鼠免疫球蛋白轻链和重链可变区基因通用方法,为后期克隆鼠源性单克隆抗体可变区基因提供了基础,并为研究甲型H1N1流感病毒血凝素与抗体结合位点提供了实验数据。

  • 标签: 甲型H1N1流感病毒 单克隆抗体 可变区 巢式PCR 序列分析
  • 简介:门高血压(PHT)gastropathy是肝肝硬化经常复杂并发症,带之一从肝硬化死亡引起。Apoptosis广泛地被认为从坏死房间死亡是房间死亡和一个不同实体一个活跃精力依赖者模式。胃mucosalapoptosis是否涉及PHTgastropathy,是不清楚。通过cyclooxygenase(艇长)生产前列腺素(PG)被认为从损害和apoptosis在胃肠mucosa保护起一个关键作用。然而,在PHTgastropathy艇长角色仍然不清楚地被理解。这研究目的是调查(1)胃mucosalapoptosis是否涉及PHTgastropathy,(2)艇长downregulation贡献这apoptosis。在这研究,当mucosal增长在PHT老鼠被禁止时,我们证明胃mucosalapoptosis显著地被增加。胃mucosalCOX-1显著地在mRNA和蛋白质层次被压制,并且PGE2在PHT老鼠被减少。进一步,PGE2处理在PHT老鼠压制了胃mucosalapoptosis。然而,胃mucosalCOX-2层次没在假冒操作老鼠和PHT老鼠之间不同。肿瘤坏死因素mucosal层次--(TNF-)并且船边交货ligand,然而并非TNF相关导致apoptosisligand,被增加,并且激活caspase-8和caspase-3层次是在PHT老鼠upregulated。到cytosol从线粒体细胞色素c版本没在PHT老鼠被观察。我们数据显示COX-1downregulation经由死亡涉及胃mucosalapoptosis调停信号类型--我在PHT老鼠房间死亡。

  • 标签: 细胞凋亡 胃粘膜 环氧 信号 死亡 大鼠
  • 简介:WereportedinthismanuscriptthatTGF-β1inducesapoptosisinAML12murinehepatocytes,whichisassociatedwiththeactivationofp38MAPKsignalingpathway.SB202190,aspecificinhibitorofp38MAPK,stronglyinhibitedtheTGF-β1-inducedapoptosisandPAI-1promoteractivity.TreatmentofcellswithTGF-β1activatesp38.Furthermore,over-expressionofdominantnegativemutantp38alsoreducedtheTGF-β1-inducedapoptosis.Thedataindicatethattheactivationofp38isinvolvedinTGF-β1-mediatedgeneexpressionandapoptosis.

  • 标签: 转化生长因子Β 细胞凋亡 P38 肝细胞 信号传导
  • 简介:皮肤隐球菌感染在近年逐渐受到重视,占隐球菌感染10%~15%。长期使用糖皮质激素是皮肤隐球菌主要病因之一[1]。但同时合并鼻疽奴卡菌感染少见。现报道1例新型隐球菌合并鼻疽奴卡菌皮肤感染病例。经过氟康唑联合复方磺胺甲噁唑抗感染治疗,病情好转,出院后继续按医嘱巩固治疗。

  • 标签: 鼻疽奴卡菌 新型隐球菌 皮肤感染
  • 简介:脑胶质瘤是颅内常见原发恶性肿瘤之一,约占颅内肿瘤发病40.49%.风药是一个法象药理名称,其本义为具有风木属性一类药物.风药,也称风燥升阳药,是一类具有升发、疏散特性药物.这类药物大多性温或平,味辛、苦或甘,归属于足阳明胃经、足太阳膀胱经、手太阴肺经和足厥阴肝经,发挥祛风、解热、升散、止痛等功效.

  • 标签: 刘培民 脑胶质瘤 风药
  • 简介:Asystematicphylogeneticfootprintingapproachwasperformedtoidentifycon-servedtranscriptionfactorbindingsites(TFBSs)inmammalianpromoterregionsusinghuman,mouseandratsequencealignments.Wefoundthatthescoredis-tributionsofmostbindingsitemodelsdidnotfollowtheGaussiandistributionrequiredbymanystatisticalmethods.Therefore,weperformedanempiricaltesttoestablishtheoptimalthresholdforeachmodel.WegaugedourcomputationalpredictionsbycomparingwithpreviouslyknownTFBSsinthePCK1genepro-moterofthecytosolicisoformofphosphoenolpyruvatecarboxykinase,andachievedasensitivityof75%andaspecificityofapproximately32%.Almostallknownsitesoverlappedwithpredictedsites,andseveralnewputativeTFBSswerealsoidentified.WevalidatedapredictedSP1bindingsiteinthecontrolofPCK1tran-scriptionusinggelshiftandreporterassays.Finally,weappliedourcomputationalapproachtothepredictionofputativeTFBSswithinthepromoterregionsofallavailableRefSeqgenes.OurfullsetofTFBSpredictionsisfreelyavailableathttp://bfgl.anri.barc.usda.gov/tfbsConsSites.

  • 标签: 哺乳动物 子区域 转录因子结合位点 调控元件 基因启动子 守恒
  • 简介:报道1例由棕黑腐质霉属(Humicolafuscoatra)导致真菌性腹膜炎。此菌分离自1名长期腹膜透析患者腹水。腐质霉属在自然界广泛存在,棕黑腐质霉导致的人类感染罕见。现对棕黑腐质霉真菌学特点进行研究,并进行分子测序。体外药物敏感性试验结果对伊曲康唑MIC为0.008μg/mL,伏立康唑MIC为0.016μg/mL,两性霉素BMIC为1.5μg/mL。患者拔除腹透管,改行血液透析。口服伊曲康唑0.1g/12h,28d后病情明显改善,出院。

  • 标签: 棕黑腐质霉 真菌性腹膜炎 真菌感染