简介:摘要目的探讨低糖联合棕榈酸的代谢环境对人结直肠癌细胞SW480的抑制作用及其促进放射增敏的机制研究。方法在低糖、棕榈酸、低糖联合棕榈酸的处理下CCK-8筛选明显抑制SW480细胞增殖的处理条件。通过流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位及凋亡变化;免疫荧光γ-H2AX染色及克隆形成实验检测放射敏感性变化;蛋白印迹法检测蛋白质水平变化。结果与对照组相比,低糖联合120μmol/L棕榈酸处理显著抑制SW480细胞增殖(P<0.01);CPT1a、PFKFB3、PKM表达增加,NDUFV1、NDUFV2、NDUFS1表达减少;ROS水平增加(P<0.01);ATP水平降低(P<0.01)。射线处理后低糖联合120μmol/L棕榈酸处理组γ-H2AX焦点数量增多(P<0.05);D0值降低(P<0.01);ROS水平增加(P<0.001);细胞凋亡增加(P<0.001);γ-H2AX蛋白表达增加(P<0.01)。NAC预处理能够逆转ROS、凋亡和γ-H2AX蛋白表达的变化。结论低糖联合棕榈酸诱导SW480细胞代谢应激,抑制肿瘤增殖,在联合射线照射时通过诱导ROS产生和DNA损伤促进SW480细胞放射增敏。
简介:目的利用国产多功能荧光分析仪,开发建立氧自由基吸收能力(oxygenradicalabsorbancecapacity,ORAC)分析测定方法。方法分别考察了荧光剂FL、过氧自由基启动剂AAPH、抗氧化剂标准品Trolox的测定浓度以及浓度与荧光衰减曲线下积分面积(AUC)的线性关系;仪器稳定性方面做了批内和批间稳定性试验。结果FL、AAPH、Trolox测定浓度范围分别为0.00063~0.0063μmol·L-1、3.50~5.25μmol.L-1和0.002~0.005μmol·L-1。其中Trolox的浓度与AUC呈很好的线性关系。批间稳定性试验的变异系数为7.7%。符合美国农业部许可的ORAC分析结果误差的变异系数≤15%要求。结论建立了以国产多功能荧光测定仪进行ORAC分析测定的方法,测定结果符合ORAC分析要求,可信度较高。