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  • 简介:目的通过显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(MO)阻抑视黄醛脱氢酶2(raldh2)基因表达,探讨raldh2基因阻抑对斑马胚胎心脏发育的影响及可能的分子机制。方法根据斑马raldh2基因起始密码区域序列设计合成吗啡啉修饰的反义寡核苷酸,采用显微注射方法阻抑斑马胚胎raldh2基因表达。构建raldh2-EG-FP重组质粒进一步验证MO的特异性和有效性。分析raldh2基因阻抑后对胚胎发育,尤其心脏表型和功能的影响。通过胚胎整体原位杂交,分析心脏相关nppa和tbx20基因表达模式以及raldh2阻抑后对其表达的影响。结果显微注射raldh2-MO能有效地特异地阻抑斑马胚胎raldh2基因表达,raldh2-MO对胚胎发育影响呈剂量依赖性。raldh2基因阻抑可导致胚胎心脏发育畸形,干扰正常的房室分化和向右环化,导致房室瓣血液反流。与野生型胚胎比较,raldh2基因阻抑组胚胎心率和心室收缩分数降低(P〈0.05),心功能受损。整体原位杂交结果显示raldh2基因阻抑后nppa基因表达改变,心室部位nppa表达清晰,而心房部位表达减弱。tbx20基因在心脏、运动神经元、顶盖及视网膜表达,raldh2基因阻抑后,tbx20表达下调,在心脏表达减弱,以心房和流出道部位更显著。结论raldh2基因在心脏早期发育的多个环节发挥重要作用,影响房室分化、心管环化和心肌收缩等。在心脏发育过程中nppa和tbx20基因表达受到raldh2基因调控,可能参与RA信号缺乏导致心脏畸形的潜在分子机制。

  • 标签: 视黄醛脱氢酶2 基因阻抑 斑马鱼 心脏发育
  • 简介:亲爱的斑马先生见字如面我昨晚梦见你了我们一起结伴去远方我和你以前说起过世界的尽头吗那列生了锈的绿火车那个圆形的废墟你还穿着那件条纹衣服这个冬天真冷我幻想过我们一起在雪地上堆一匹斑马

  • 标签: 你喜欢 直市
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  • 简介:斑马的样子很像马。斑马和马一样都吃草。它们都有长长的腿,能跑得很快。不同的是,斑马身上有黑白相间的条纹。

  • 标签: 《婴幼儿画刊》 教育 文学 阅读
  • 简介:斑马生活在非洲大陆,身上的条纹是同类之间相互识别的主要标记之一,也是为适应生存环境而衍化出来的保护色。它们性格谨慎,结成小群游荡,常遭狮子捕食。因人们追求其皮、肉曾大量捕杀,拟斑马已于19世纪70年代绝迹,山斑马也濒临灭绝。斑马现在3种——山斑马、普通斑马、细纹斑马,生活习性都差不多。

  • 标签: 生活习性 非洲大陆 70年代 19世纪 保护色 狮子
  • 简介:斑马栖居在干燥、开阔、灌木丛较多的草原上和沙漠地带。它们有很强的社会性,喜欢群居生活,一同觅食,一同喝水,甚至彼此梳理皮毛。因为具有适应力较强的消化系统,所以,斑马甚至可以在低营养条件下生存。

  • 标签: 群居生活 沙漠地带 营养条件
  • 简介:<正>转基因是借助生物技术手段,将外源基因导入受体内,通过外源基因的定点整合,使其优良性状在体上得以表达,并经过人工选育而培育出的一类性状优良、遗传稳定而且具有较高经济价值的鱼类。中国科学院院士朱作言等于1985年率先在世界上成功研制出了转基因,并建立了转基因模型,此后鱼类基因转移技术在世界范围内迅速发展,

  • 标签: 转基因鱼 胚胎发育 GH基因 黄河鲤 外源基因 中国科学院院士
  • 简介:摘要随着分子遗传学技术的进步尤其是高通量测序技术的广泛应用,遗传性肌肉疾病致病基因的检测得到了普及,但在变异位点致病性的判定以及疾病分子机制和干预药物的研究方面仍面临着许多问题和挑战。国内肌病领域利用斑马等模式生物开展的研究尚有限,而斑马肌肉发育相关的基因保守性高,遗传操作方法丰富,运动行为表型的评价也相对容易,可作为遗传性肌肉疾病研究的有力工具。本文就斑马作为遗传性肌病模式生物的优势、具体应用及局限性进行讨论,以期能够推动相关研究,并使遗传性肌肉疾病患者获益。

  • 标签: 肌肉疾病 斑马鱼 基因突变 模式生物 药物筛选
  • 作者: 陈维 赵峰 张樱腊 刘东 杨莉
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2020-09-26
  • 出处:《中华精神科杂志》 2020年第05期
  • 机构:北京大学第六医院 北京大学精神卫生研究所 国家精神心理疾病临床医学研究中心(北京大学第六医院) 卫生部精神卫生学重点实验室(北京大学) 100191,南方科技大学生物系,深圳 518055,北京大学生命科学学院 100871
  • 简介:摘要目的通过降低斑马接触蛋白相关蛋白基因2(contact protein-related protein gene 2, cntnap2)表达,建立注意缺陷多动障碍(attention-deficit/hyperactivity disorder,ADHD)遗传模型。方法以注射剪接抑制型吗啉代寡聚核糖核酸降低cntnap2表达的斑马作为实验组(n=48),注射随机寡核苷酸片段的斑马作为对照组(n=48),通过原位杂交观察斑马神经递质系统相关基因th、dbh、gad1b、glyt2、vglut2表达的变化,使用实时荧光定量PCR检测神经递质系统及神经元发育相关基因表达量变化。使用斑马行为轨迹跟踪系统记录(Noldus行为仪)检测cntnap2表达降低后多动/冲动行为及托莫西汀对多动/冲动行为的改善作用。结果原位杂交实验结果显示实验组较对照组神经递质系统相关基因dbh表达减少,gad1b表达增加;th、glyt2、vglut2表达未见明显差异。实时荧光定量PCR显示实验组较对照组神经递质系统相关基因dbh表达降低(t=5.772,P=0.005),snap25、dat、gad1b表达增高(t=14.310、22.210、22.090,均P<0.01);神经元发育相关基因shha、epha4b、netrin1b、noi及神经递质系统相关基因drd4、th、vglut2、glyt2表达差异均无统计学意义。6 dpf时药物未处理实验组较药物未处理对照组幼鱼游动总距离长 [143.12(98.56, 212.22) cm 与99.03(80.54, 133.96) cm,Z=-3.547,P<0.01],平均游动速度快[0.050(0.041, 0.067) cm/s与0.033(0.025, 0.042) cm/s, Z=-5.495,P<0.01];经托莫西汀处理后,实验组药物处理较药物未处理幼鱼游动总距离减少[106.59(95.28, 120.10) cm与143.12(98.56, 212.22) cm, Z=-3.591,P<0.01],平均游动速度减慢[0.031(0.028, 0.037) cm/s与0.050(0.041, 0.067) cm/s,Z=-7.035,P<0.01]。结论cntnap2表达降低斑马可通过改变dbh、snap25、dat、gad1b表达量而产生多动/冲动表型,托莫西汀可有效缓解多动/冲动表型,cntnap2表达降低斑马可作为ADHD遗传模型。

  • 标签: 注意力缺陷障碍伴多动 斑马鱼 模型 动物 接触蛋白相关蛋白基因2
  • 简介:摘要目的探讨nicastrin(nct)基因对斑马黑素细胞生物学功能的影响。方法利用吗啉代寡核苷酸(MO)技术针对斑马nct基因mRNA设计nct-MO序列,同时设计对照MO序列(ctrl-MO),并构建5′端为MO靶序列的增强绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA,通过显微注射的方式将nct-MO或ctrl-MO与EGFP mRNA共注射入斑马胚胎中,验证nct-MO的沉默效率,观察其表型变化。以野生型斑马作为空白对照组,实时荧光定量PCR检测黑素合成notch信号通路相关基因mitfa、tyr、tyrp1a、tyrp1b、dct、pmela、notch1a、notch1b、hey1 mRNA表达水平的变化。多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果斑马受精后8 h,ctrl-MO+EGFP mRNA组斑马胚胎中均有绿色荧光表达,而nct-MO+EGFP mRNA组及空白对照组胚胎均未见绿色荧光。受精后48 h,nct-MO组幼鱼尾部色素沉着区面积占比(0.169 ± 0.083)低于ctrl-MO组(0.258 ± 0.042,t=3.202,P=0.005),且nct-MO组色素分布紊乱。实时荧光定量PCR显示,nct-MO组、ctrl-MO组、空白对照组间pmela、tyrp1a、hey1基因mRNA相对表达量差异有统计学意义(均P < 0.05),mitfa、tyr、tyrp1b、dct、notch1a、notch1b mRNA相对表达差异无统计学意义(均P > 0.05);nct-MO组pmela、tyrp1a相对表达水平(0.708 ± 0.028、0.558 ± 0.136)低于ctrl-MO组(1.023 ± 0.142、1.016 ± 0.134,均P < 0.05)。结论nct基因可能通过调控斑马黑素合成影响黑素细胞生物学功能。

  • 标签: 色素沉着异常 化脓性汗腺炎 Nicastrin基因 γ分泌酶 斑马鱼模型
  • 简介:目的:研究Raplb与斑马颅面部发育的关系。方法:利用模式动物斑马,取由神经嵴发育而来的颅面部组织做实时定量RT-PCR,观察不同时期Raplb的mRNA表达情况。再通过Raplb整体原位杂交观察其在斑马发育过程中时间和空间的表达情况,并与神经嵴特异性标志基因Crestin原位杂交表达情况在时间和空间上对比。结果:实时定量RT—PCR结果显示,Raplb在神经嵴形成、迁移、分化过程中在颅面部均有表达。原位杂交结果显示,Raplb与Crestin在斑马中的表达在时间和空间上有重叠。结论:Raplb可能通过调节神经嵴发育参与颅面部发育。

  • 标签: 神经嵴 斑马鱼 Rap1b
  • 简介:2016年4月1日—4月19日,在水温12~14℃下采用催产、人工授精和室内孵化方式获得暂养的野生新疆裸重唇Gymnodiptychusdybowskii受精卵和仔鱼,观察其胚胎发育和早期仔鱼的形态特征。结果显示:新疆裸重唇成熟鱼卵为亮黄色或橙色,卵径(2.2±0.28)mm,受精约35min后卵周隙达到最大,卵径2.90~3.40mm,卵黄约占卵体积的3/5。整个发育过程可分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期和器官形成期6个阶段。在水温(16±2)℃下,胚胎发育积温为2359h·℃,187h仔鱼上浮。研究结果表明,新疆裸重唇胚胎发育特征与新疆地区其他几种裂腹鱼类存在一定差异。

  • 标签: 新疆裸重唇鱼 胚胎发育 仔鱼 裂腹鱼
  • 简介:摘要目的研究elavl1/HuR对斑马肠神经系统早期发育的影响。方法应用免疫组化方法检测elavl1、HuC/HuD在野生型斑马肠道的表达。挑选25个斑马胚胎,应用Western Blot法检测elavl1在受精后24~96 h野生型斑马中的蛋白表达水平。在野生型斑马胚胎处于1细胞期时分别显微注射4 ng、8 ng elavl1a morpholino和8 ng control morpholino,挑选25个受精后24 h的胚胎采用Western Blot法检测elavl1的蛋白表达,免疫组化检测受精后72 h、96 h的胚胎斑马肠道神经元的分布情况。结果elavl1在斑马全身都有表达,而HuC/HuD在第四天斑马肠道部位出现表达;在受精后24~96 h时期,elavl1在斑马中的蛋白表达量随斑马鱼生长而增加,且受精后96 h时elavl1蛋白量明显高于受精后24 h、48 h、72 h,差异有统计学意义(P<0.05);分别注射4 ng、8 ng elavl1a Mo和8 ng Con Mo后,发现注射8 ng Con Mo组elavl1蛋白含量高于其他两组,且差异有统计学意义(P<0.05);敲降elavl1a后免疫组化显示在受精后72 h时三组都不能在肠道末端明显观察到神经元,受精后96 h时可以观察到elavl1a Mo 8 ng组和elavl1a Mo 4 ng组较Con Mo 8 ng组斑马肠神经元数量有所减少,每组随机抽取5条斑马统计肠道末端到前面四个体节长度的肠道神经元数量,发现elavl1a Mo 8 ng组和elavl1a Mo 4 ng组较Con Mo 8 ng组斑马肠神经元数量差异有统计学意义(P<0.05)。结论elavl1a是斑马肠神经发育过程中重要基因,敲降elavl1a会减少肠神经元细胞数量。

  • 标签: RNA结合蛋白 肠神经系统 斑马鱼
  • 简介:精子的灭活是雌核发育过程中的一个关键步骤,为了研究不同介质中斑马精子的灭活效果,将斑马的精子分别置于纯水(A)、Cortland用生理盐水(B)、M199培养基(C)、Hank’s液(D)以及Ringer氏溶液(E)中进行紫外线照射,然后与正常卵子进行人工受精,统计受精率、孵化率以及畸形率。结果显示,各种介质中均得到畸形鱼苗,并有明显的单倍体综合症现象;五种介质中在Cortland用生理盐水中平均受精率最高;综合受精率和畸形苗的比例,35s辐射比较适于斑马精子灭活与激活卵的发育。畸形鱼苗的染色体检测结果显示,其染色体众数为25,为斑马染色体数目的一半,少数分裂相的数目介于25和50之间。

  • 标签: 雌核发育 灭活 人工受精 染色体 单倍体
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:为评价双酚AF(BPAF)的甲状腺毒性,以雄性斑马成鱼为受试模式生物,采用半静态染毒的方式对雄性斑马成鱼染毒14d(0、5、50和500μg·L^-1),分别设置7d、14d2个时间节点,通过酶联免疫法(ELISA)分别检测斑马血浆中总三碘甲腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)的含量水平,并对14d暴露后斑马甲状腺进行组织学检测分析。结果显示随着暴露浓度的提高,出现甲状腺滤泡上皮细胞增生,滤泡组织变形明显,细胞胶质缺失等病理学变化。雄性斑马在BPAF暴露情况下,血浆中TT3、TT4、FT3、FT4含量随着暴露浓度的提升和时间的延长出现显著上升,呈现出甲状腺功能亢奋的干扰效应。

  • 标签: 双酚AF 斑马鱼 甲状腺组织 甲状腺激素水平
  • 简介:研究了不同浓度下(0(对照)、0.1、1、10、100μg·L-1)壬基酚(NP)长期暴露对斑马(Brachydaniorerio)雄鱼第二性征、精子活力的影响.结果表明,NP暴露对斑马第二性征的影响显著,可导致雄性个体出现泄殖乳突、腹部膨大等典型雌性化特征.100μg·L-1NP暴露导致76.9%的雄鱼出现泄殖乳突.NP暴露对斑马精子激活率的影响显著,随NP暴露浓度升高精子激活率下降,呈现负相关的剂量-效应关系.NP暴露对斑马精子寿命和精子剧烈运动时间均有显著影响.低剂量(0.1μg·L-1)和高剂量(100μg·L-1)NP暴露下精子寿命及其剧烈运动时间显著缩短,而中等剂量(10μg·L-1)NP对上述指标影响不显著(p〉0.05).斑马第二性征、精子活力可作为指示水体环境雌激素毒理学效应的敏感指标.

  • 标签: 壬基酚 第二性征 精子活力 斑马鱼
  • 简介:用DSPE—PEG2000-NH2超声处理碳纳米管,制备了PEG功能化的碳纳米管水溶液,并采用斑马及其胚胎为实验对象,检测了功能化多壁碳纳米管对斑马的毒性,结果表明,功能化后的碳纳米管导致斑马成鱼存活率下降,作用48h的成鱼30d成活率下降至最低;功能化碳纳米管曝露使得虎马胚胎发育异常,出现卵凝结和胚胎细胞自溶;其幼鱼延迟发育,存活率下降,甚至造成斑马心包囊水肿和畸形的发生。

  • 标签: 碳纳米管 功能化 斑马鱼 毒性