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55 个结果
  • 简介:为了确保反应体系的可行性,以便更好地开展大蒜野生近缘种的SRAP标记的遗传多样性分析,本研究以新疆大蒜野生近缘种为材料,采用L16(44)正交法,对其反应体系进行4因素4水平优化试验。结果表明:对大蒜野生近缘种PCR扩增影响最大的是dNTPs浓度,影响最小的是Taq酶浓度。筛选出15对引物,经过程序和温度筛选,最终确定SRAP的反应程序为:94℃条件下预变性1min,其次在94℃变性1min、35℃退火1min、72℃延伸1min的环境下进行5个循环的反应,再与前5个循环相同环境下,提高其退火温度至52℃进行35个循环,最后72℃延伸10min。2μL10×PCRBuffer,dNTPs浓度0.225mmol/L,引物浓度0.250μmol/L,Taq酶用量1.000U,模板DNA用量75.000ng,ddH2O补足20μL,为最佳SRAP-PCR反应体系。研究结果为进一步开展大蒜野生近缘种的遗传多样性分析、亲缘关系鉴定和分子标记辅助育种提供技术支持。

  • 标签: 大蒜野生近缘种 SRAP 正交试验 反应体系
  • 简介:秸秆生物反应堆技术,主要的技术手段是以微生物制剂为主要制剂,以当地的丰富的农作物秸秆——玉米秸秆和豆秸等为原料,在设施农业生产中,将生物技术并辅以配套的节水灌溉技术等进行设施园艺环境改良。此技术把生物制剂和农作物秸秆充分施人土壤后,可快速形成高效有益活体菌群,产生多种生物活性物质,刺激作物生长,改善作物的生长环境,提高作物的抗逆性及免疫力,有效预防和抑制土传病害的发生,提高化肥及有机肥的利用率,修复土壤,重建沃土。

  • 标签: 秸秆生物反应堆 节水灌溉技术 设施农业 农作物秸秆 微生物制剂 应用
  • 简介:为建立穿心莲甲基化敏感扩增多态性(methylationsensitivityamplificationpolymorphism,MSAP)反应体系,本研究以穿心莲叶片为材料,提取总基因组DNA,采用L25(55)正交试验对穿心莲MSAP的预扩增和选择性扩增的相关参数进行了优化,并对MSAP引物进行了筛选,以期建立穿心莲MSAP最佳反应体系。优化后的体系具有稳定的图谱,清晰丰富的条带。运用优化后的体系,在穿心莲MSAP的80对引物中筛选出8对有效引物。筛选出的引物组合特异性良好,能够用于后续穿心莲甲基化的相关研究。为其他药用植物MSAP分析提供参考。

  • 标签: 穿心莲 MSAP 预扩增 选择性扩增 引物筛选
  • 简介:印度尼西亚:印尼政府成立了一个由来自不同部门官员组成的班子来处理向美国出口的木材产品认证的有关问题。美国的USLaceyAct(雷斯法案)对进入美国市场的木材产品的认证作了新的规定。2009年6月起,所有进入美国市场的木材产品必须由美国政府批准的实体进行认证。在可持续森林经营(SFM)、合法来源证明(VLO)和监管链(CoC)三者中,出口到美国的产品需获一种认证方可放行。

  • 标签: 产品认证 美国市场 木材产品 印尼 可持续森林经营 反应
  • 简介:为测定长时间热应激和饲料摄入量减少对淋巴细胞增殖和抗体合成的影响,用结核分支杆菌免疫和未免疫的新西兰白公兔在控制的气候条件下单笼饲养24天。免疫和非免疫兔被分成两个试验组和一个对照组,热应激兔饲养在33.5℃室温下;日粮限制兔按TS组兔平均饲料摄入量配对饲喂,维持室温18℃;对照组维持18℃并无限量提供饲料。

  • 标签: 日料 温度 应激 免疫反应
  • 简介:为了建立杧果目标区域扩增多态性(TRAP)标记技术体系,对影响该反应体系的Mg2+、dNTPs、固定引物浓度、随机引物浓度以及TaqDNA聚合酶等5个因素进行优化。

  • 标签: 反应体系 标记技术 引物筛选 TRAP 优化 杧果
  • 简介:该研究的目的是明确氧化反应对热处理固定杉木压缩木材的影响.首先,饱水状态的杉木试件在热压机中被径向压缩约50%,然后压缩试件被分别放在一个普通烘箱(有氧热处理,空气的压力为大气压)和一个真空干燥箱中(真空热处理,空气压力很低,约0.075MPa)进行热处理,两种热处理都设置了5种温度包括140,160,180,200,220℃以及不同的时间.同时进行热处理的还有一些绝干的对照试件,用来测定不同热处理过程中的重量损失率(WL)和抗收缩率(ASE).研究结果如下:(1)热处理过程中氧气的存在大大提高了热处理的效率,在220℃时有氧热处理约2.5h后,压缩木材的RS(回复率)达到0;但在真空热处理时,在220℃时加热约30h后,压缩木材的回复才能基本被固定.(2)氧化并不是压缩变定的固定、木材重量的损失或尺寸稳定性提高的必不可少的条件,氧气的存在几乎对RS和WL以及ASE和WL间的关系没有影响,但对RS和ASE间的关系有一些影响.(3)TT平面中的RS等值线,Δt一定回复率和温度下两种热处理所需时间的差值)和温度间的关系,以及由于氧化反应而引起的热处理效率增加的系数η清楚地反映了氧化反应对热处理固定杉木压缩木材的效率的影响

  • 标签: 杉木 压缩木材 氧化 热处理
  • 简介:以豫椒系列品种父母本和杂交种为材料,采用液氮-SDS法提取辣椒基因组DNA,使用Bio-RAD-Mycycler型PCR仪和Bio-RAD1000凝胶扫描仪,研究PCR反应的主要影响因子,建立适合辣椒RAPD分析的PCR反应体系,从40个10bp的随机引物中筛选出1个能鉴定豫椒968杂种纯度的引物S149.

  • 标签: 辣椒 杂交种 纯度鉴定 RAPD 杂种纯度 父母本
  • 简介:饲料原料掺假,一般是指有目的的、人为的向原料中加入一些非固有成分,增加其重量或某些组分,或改变原来外观,以降低成本,获取较高利润。我国尤以蛋白原料最为匮乏,价格较高,掺假情况最为常见,一些不法商贩为了牟取暴利想法设法进行掺假、造假,并且花样翻新,令人防不胜防,掺假的重点自然应该成为检验的重点。

  • 标签: 快速测定 蛋白质 双缩脲 反应 特性 饲料原料
  • 简介:为了提高抗病性分子标记检测的效率,为番茄病害检测及多抗品种选育提供技术依据,本研究通过改良CTAB法、96孔深孔板快速提取番茄微量叶片DNA;利用抗根结线虫病Mi标记,在L16(45)正交设计试验基础上,采用直观量化分析和方差分析两种方法,对番茄实用化PCR分子标记PCR反应的5个因素(引物,Mg2+,dNTPs,模板DNA和Taq酶)进行优化;随后分别筛选黄化曲叶病毒病、烟草花叶病毒病、根结线虫病、枯萎病、叶霉病和颈腐根腐病6种病害的8个实用化PCR分子标记PCR程序的退火温度;并对循环次数进行筛选;最后利用优化后的PCR体系与程序对供试的1442份番茄材料(包括番茄种质资源,群体材料,组合及品种)进行抗病性鉴定。结果表明番茄实用化PCR分子标记的PCR最佳反应体系(20μL)为引物0.5μmol/L、Mg2+1.5mmol/L、dNTPs0.3mmol/L、DNA480ngDNA、聚合酶1.0UTaq;PCR程序中8个分子标记共同最适退火温度为56℃,最佳循环次数为33次;筛选出585份多抗(含2种以上的抗病基因)番茄材料,可作为中间材料或亲本材料进行多抗品种选育。该实用化PCR分子标记的PCR体系的建立为番茄利用抗病基因分子标记检测与筛选多抗种质资源、品种或群体材料提供了标准化的程序。

  • 标签: 番茄 抗病基因 实用化PCR分子标记 正交设计 体系优化
  • 简介:为建立暴马丁香ISSR-PCR最佳反应体系,本研究以暴马丁香基因组DNA为模板,首先通过单因子试验设计筛选出各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验,对暴马丁香ISSR-PCR反应有影响的模板DNA、dNTPs、Mg2+、TaqDNA聚合酶和引物浓度等5种因素4个水平进行了优化试验。暴马丁香的ISSR-PCR最佳反应体系最终确定为:在25μL的反应体系中,DNA模板是40ng,Mg2+浓度为2.0mmol/L,引物浓度为0.4μmol/L,TaqDNA聚合酶用量为1.5U,dNTPs浓度为0.2mmol/L。利用该体系从60条ISSR引物中筛选出了扩增条带清晰、多态性好的10条引物。这一体系的建立及多态性引物的筛选为以后利用ISSR分子标记技术进行暴马丁香的有关研究提供了科学依据。

  • 标签: 暴马丁香 ISSR-PCR 单因子试验 正交设计 引物筛选
  • 简介:本研究利用Me2Em4正反向引物组合对影响梾木属SRAP-PCR反应体系的Mg2+、Taq聚合酶、dNTP和引物浓度4个因素进行L9(34)正交试验,采用正交设计直观分析及方差分析对影响SRAP反应的4个因素进行分析,并对模板DNA浓度进行了单因素试验分析。结果表明,梾木属SRAP-PCR20μL反应体系的最佳组合为:Taq聚合酶2.0U、Mg2+浓度1.5mmol/L、dNTP浓度0.15mmol/L、Primer浓度0.30mmol/L、模板DNA浓度5.5mg/L以及含有2μL不含Mg2+的10倍稀释缓冲液。各因素对梾木SRAP-PCR反应的影响大小依次为:dNTP、Taq聚合酶、Mg2+和Primer。最后运用优化体系从100对SRAP引物组合中筛选出26个多态性SRAP标记,可用于梾木属不同种间亲缘关系、系统进化和遗传多样性等方面的研究。

  • 标签: 梾木属 SRAP 正交设计 反应体系 引物筛选
  • 简介:一、发生过敏反应的原因动物免疫系统是动物自我保护的基础,其作用是抵抗外界有害物质的入侵,保证动物机体的各项功能正常,这也是动物为适应环境而做出的必然选择。随着环境变化,动物免疫系统也在发生变化,所以世界上没有完美的免疫系统,只有相对比较适应环境而更容易让动物活下去的"免疫系统"。

  • 标签: 过敏反应 疫苗免疫 原因 动物机体 免疫系统 兽用
  • 简介:采用改良CTAB法提取了降香黄檀(DalbergiaodoriferaT.Chen)新鲜叶片和硅胶干燥后放置3个月的叶片基因组DNA,并对影响RAPD反应的各因素进行了优化。结果显示新鲜的降香黄檀叶可以得到质量较高的DNA,硅胶保存后部分叶片所提的DNA有降解。优化后反应体系为:25μL反应体系中包括,模板的DNA20ng,TaqDNAPolymerase2.5U,Mg^2+5mmol·L^-1,dNTP0.3mmol·L^-1,引物(S37)0.4μmol·L^-1。反应条件为94℃预变性4min;94℃,30s,36℃1min,72℃2min,40个循环;72℃延伸10min.

  • 标签: 降香黄檀 DNA提取 RAPD
  • 简介:为有效利用SSR-PCR技术分析国家一级重点保护植物银缕梅的遗传多样性,采用正交试验设计L16(43),即3因素4水平,对影响SSR-PCR扩增结果的因素(引物,模板DNA浓度和循环数)进行优化筛选,并在此基础上对聚丙烯酰胺凝胶上样量进行优化,建立了适合银缕梅的最佳SSR-PCR反应体系:10μL2×PCRMix、40ng模板DNA、10μmol/L引物,其余用ddH_2O补齐至20μL。PCR扩增程序为:95℃预变性15min,95℃变性30s,57.5℃退火1.5min,72℃延伸1min,30个循环,循环结束后,60℃延伸30min,扩增产物4℃保存。聚丙烯酰胺凝胶电泳上样量以1.5~2.0μL为最佳。利用优化后体系进行引物筛选,从18对引物中筛选出11对具有多态性引物,说明该反应体系具有良好的稳定性。该体系的建立可以为今后利用SSR标记对银缕梅遗传多样性分析、系统发育研究、遗传图谱构建、基因定位和分子标记辅助育种等研究提供基础。

  • 标签: 银缕梅 正交设计 SSR-PCR 最佳上样量 引物筛选
  • 简介:以宁夏枸杞为原料,在65、70、80℃、相对湿度65%条件下,研究了枸杞干制过程中非酶促褐变反应。结果表明,还原糖和氨基酸态氮是美拉德反应的两种反应物,根据非酶褐变的特点,在不同温度下两种物质的含量均呈下降趋势,确定枸杞热风干制后期有美拉德反应存在,且温度越高,越有利于美拉德反应的发生;通过人为条件诱导枸杞发生美拉德反应,以枸杞色差值和5-羟甲基糠醛含量的变化验证了美拉德反应的发生。

  • 标签: 枸杞 非酶促褐变 美拉德反应
  • 简介:测定10种生物源类农药对家蚕的急性毒性,并系统地观察家蚕中毒反应症状。对其毒性分级:抗生素类杀虫剂中,阿维菌素和多杀霉素属于剧毒级;昆虫生长调节剂类杀虫剂中,虫酰肼属于剧毒级,氟铃脲、吡丙醚属于低毒级;沙蚕毒素类杀虫剂中,杀虫单属于高毒级;植物杀虫剂中,印楝素和苦参碱属于低毒级;微生物杀虫剂中,苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒属于剧毒级,苏云金杆菌属于低毒级。同时,虽然同属于生物源农药大类,不同作用机理的药剂,甚至是相同作用机理的药剂,处理家蚕后中毒表征也存在明显差异;而出现相同的中毒反应症状的家蚕,所对应药剂的作用毒理并不一定相同。

  • 标签: 生物源类农药 家蚕 毒性评价