学科分类
/ 24
471 个结果
  • 简介:将甘蔗花叶病毒CP基因克隆到表达载体pET22b(+),并在大肠杆菌BL21(DE3)得到高效表达,表达蛋白约占总蛋白15%.用此蛋白制备了效价高专化性强抗体.此方法可以解决制备马铃薯Y病毒属病毒血清时遇到病毒提纯产量低和寄主蛋白影响等问题.

  • 标签: 甘蔗花叶病毒 CP基因 表达 抗血清 表达载体
  • 简介:本实验将含有人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因cDNA重组真核表达质粒直接注射小鼠骨骼肌,观察了hGM-CSF基因在小鼠体内分泌表达情况。ELISA结果显示注射重组质粒DNA后,第15天左右小鼠血液hGM-CSF表达量最高,约有97ng/ml,第20天次之,第25天和第10天表达量相近,约有49ng/ml。生物学活性检测结果表明,实验组小鼠血液有维持TF-1依赖株细胞生长作用。表明重组质粒DNA直接注射骨骼肌不仅能表达hGM-CSF,而且表达产物有生物学恬性。

  • 标签: 基因治疗 HGM-CSF DNA注射 骨骼肌
  • 简介:哺乳动物从受精卵发育到胚胎过程中头位置是怎样决定?日本学者近日通过老鼠实验查明了其中原理,这对利用受精卵等培育器官、组织用于再生医疗很有帮助。

  • 标签: 日本 老鼠实验 动物 头部位置 LEFTrYl基因 CERL基因
  • 简介:目的探讨不同剂量大肠埃希菌内毒素(LPS),实验室温湿度、动物固定方法和动物生理机能状态对兔发热反应影响.方法实验在能控制温湿度实验室内进行,静脉注射不同剂量(0.5?ng/kg\,2?ng/kg\,20?ng/kg\,100?ng/kg\,200?ng/kg\,2000?ng/kg)大肠埃希菌内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)诱发兔发热反应.结果随LPS注射剂量增加兔发热反应增强.表现在发热潜伏期逐渐缩短;发热高峰值逐渐增加;发热时程逐渐延长;体温反应指数逐渐加大.另外LPS注射剂量不同,动物发热曲线峰型亦不相同,小剂量LPS(0.5?ng/kg及2?ng/kg)可诱发单峰型发热反应;用量增加到20?ng/kg以上时,呈双峰型发热反应.静脉注射剂量为100~200?ng/kg时兔发热反应呈典型双峰热,且发热反应均一,是造模适宜剂量.实验结果证明实验室温度为25℃左右动物以颈部固定方法为宜.

  • 标签: 发热反应 LPS 内毒素 不同剂量 大肠埃希菌 诱发
  • 简介:拟除虫菊酯类农药是一类高效、广谱农药,且具有低毒性和能被生物降解之特性,但其残留却给人们健康带来了巨大威胁,如何有效地去除其残留成为摆在环境工作者面前一项重大课题。以生物修复为理论基础农药残留降解菌技术为解决这一难题带来了新思路,该方法操作简便、经济实用,在国内外均成为环境工作者研究热点。

  • 标签: 生物修复 拟除虫菊酯 微生物 生物降解
  • 简介:以悬钧子皮下盘菌等总基因组DNA为皮下盘菌属(HypodermadeNot.)及其近似类群RAPD体系优化模板,对模板DNA浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度等反应体系以及退火温度和时间、延伸时间、循环次数等扩增程序条件进行优化,寻找出适合此类菌物RAPD-PCR反应最佳反应体系和最佳扩增程序.

  • 标签: 皮下盘菌属 齿裂菌属 散斑壳属 RAPD-PCR反应条件 优化
  • 简介:目的通过剑尾鱼属内鱼类杂交,观察黑色素瘤在其杂交后代形成情况.方法白体剑尾鱼(♀)与黑体剑尾鱼(♂)杂交,子一代(F1)和子二代(F2)分别自交,观察其后代外部特征变化和黑色素瘤形成情况;对黑色素瘤进行组织病理观察.结果剑尾鱼杂交种F2代开始出现性状分离,F3有较高黑色素瘤发生率,为20.5%.HE染色和Lillie黑色素染色证实增生组织为黑色素瘤.结论通过不同剑尾鱼杂交和自交,后代有黑色素瘤形成,可望进行黑色素瘤模型构建.

  • 标签: 剑尾鱼 杂交种 黑色素瘤 组织病理学 形成 动物模型
  • 简介:通过茶树品种、叶片龄期及叶片化学成份对茶树内生真菌分布影响研究,发现:(1)在供试4个荼树品种,黄旦内生真菌分离频率达100%,而福云六号只有7.5%,表明茶树品种不同或遗传背景不同,其叶片中内生真菌发生存在明显差异。(2)随着茶树叶片成熟,叶片中内生真菌种类与数量逐渐增多,与叶片龄期呈正相关,叶片龄期影响茶树内生真菌种群结构。(3)不同龄期叶片水浸提液对Colletotrichum、Pestalotiopsis、Guignardia三种茶树上主要内生真菌生长产生不同影响;在PDA培养基添加15%茶多酚,对此3种内生真菌均有一定抑制作用,但抑制程度有所不同,表明茶树叶片化学成份是影响内生真菌分布重要因素之一。

  • 标签: 茶树 内生真菌 品种 叶片龄期 化学成份
  • 简介:一步法体外扩增结合Southem杂交检测M53鼠肺支原体标准株,设计一对特异寡核苷酸引物及探针,合成、纯化、建立了特异、敏感、快速检测手段。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定,结果显示鼠肺支原体M53株基因组DNA710bp特异谱带。对50只SD大鼠进行检测,结果PCR方法检出率高于分离培养法,扩增产物行Southemblot杂交验证,采用碱性磷酸酶标记寡核苷酸探针,可与膜上特异靶DNA序列杂交,而阴性对照无杂交信号。特异性实验检出10pgDNA。充分说明一步法PEN,具有高度、特异、灵敏、快速等优势,适应与大、小鼠监测应用。

  • 标签: 支原体 鼠肺 SD大鼠 检出率 体外扩增 分离培养法
  • 简介:目的对东莨菪碱慢性给药大鼠能否作为老龄相关记忆损害模型进行探索.方法14只1月龄SD大鼠随机分为对照组和东莨菪碱模型组.东莨菪碱模型组大鼠皮下注射东莨菪碱2mg/kg,2次/日,正常对照组予等量生理盐水,连续21d.然后利用Morris水迷宫(MWM)参照记忆试验进行行为学测试;神经元特殊染色及电子显微镜技术,观察大鼠海马CA1、CA3区锥体细胞数、超微结构改变以及突触可塑性变化.结果东莨菪碱组大鼠隐匿平台搜索实验成绩有-定损害;两组大鼠空间探索次数差异无显著性(P>0.05).两组间海马CA1、CA3区锥体细胞数差异无显著性(P>0.05).两组大鼠锥体细胞胞体超微结构无差异,但两组大鼠CA1区神经元突触超微结构有轻微变化.结论东莨菪碱慢性给药对大鼠学习记忆能力有一定损害,但对长时记忆无明显影响;对海马神经元结构无明显损害,对神经元突触可塑性有轻微影响.此种动物模型可能不是理想老年性痴呆或老年相关记忆损害模型.

  • 标签: 东莨菪碱 损害 相关 给药 慢性 老龄
  • 简介:人类改造自然想象力和创造力是无与伦比。1985年,Lovell-Badge首次提出利用转基因动物乳腺生产重组蛋白质,数年间这一几近天方夜谭神话已梦想成真。在研究小鼠模型基础上,1990年春,5只生产人α-抗胰蛋白酶转基因羊在英国诞生,乳中蛋白质表达水平已达30g/L,迄今已稳定遗传三代,现已进入临床实验。同年荷兰诞生了第一头生产人乳铁蛋白转基因牛,现已繁殖20多头。对于这些产奶量

  • 标签: 转基因鼠 重组蛋白质 转基因动物 动物乳腺 定位表达 质的研究
  • 简介:近年来教育部提出了双语教学要求,在加强大学本科教学12项措施要求各高校在三年内开设5%-10%双语课程,目的是想通过双语教学新模式,将专业英语教学贯穿于整个本科生物学教育全过程,做到不断复习、反复强化和学以致用,真正起到促进我国教育发展,加快生物学人才与世界接轨目的。

  • 标签: 双语教学 生理学 生物学教育 极性 学生 本科教学
  • 简介:生殖细胞缺陷症(gcd)小鼠突变体是上世纪90年代初发现一种不育突变小鼠,FancL(也叫Pog)缺失是产生gcd突变小鼠原因.FANCL是一种含有PHD结构域泛素E3连接酶,是Fanconi贫血复合物组分之一.在生殖细胞,FANCL与GGN1和GGN3相互作用,而GGN1和GGN3蛋白功能还不清楚.为了研究GGN3功能,揭示更多参与该过程蛋白质,运用Clontech公司新开发第三套酵母双杂交系统以GGN3为诱饵从成年小鼠睾丸cDNA文库筛选与其相互作用蛋白分子.发现了一个精子生成期间在睾丸特异性高表达基因Ggnbp2,免疫共沉淀分析表明,Ggnbp2编码蛋白质产物GGNBP2在哺乳动物细胞与GGN3特异相互作用.通过构建突变体,确定了GGNBP2蛋白与GGN3相互作用区域.以上结果为揭示GGN3和GGNBP2在生殖发育功能、丰富生殖细胞发育蛋白调控网络及其调控规律奠定了一定基础.

  • 标签: GGN3 GGNBP2 酵母双杂交 免疫共沉淀 相互作用 作用区域
  • 简介:目的对北京市肿瘤研究所及本实验动物学部保存$180进行了克隆培养,根据克隆细胞腹水生长特性,从中选出8株克隆,对不同克隆$180细胞特性进行研究。方法免疫组化法测不同克隆细胞蛋白质分布,流式细胞仪测定不同克隆细胞DNA含量,扫描电镜观察克隆细胞表面结构,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测克隆细胞电泳图谱。结果其中3株克隆从uJ见腹水之日起,腹水即为血性;1株微显血性;4株在接种腹腔7日内腹水无血性。扫描电镜观察6株克隆细胞表面结构,各具特点,有所不同。流式细胞仪测定6株不同S180克隆细胞DNA含量,分别为8.5,9.3,7.9,8.5,8.6,8.3pg。免疫组化染色显示不同克隆与11种抗体反应有所不同,一旦与某抗体反应阳性,则阳性细胞比率均在97%以上。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定克隆细胞s1H10及S2D9电泳图谱,S1HIO克隆细胞有33条带,S2D9克隆细胞有30条带。结论8株克隆细胞各具特点。

  • 标签: 克隆细胞 腹水 血性 S180 流式细胞仪 DNA含量
  • 简介:目的建立两种激光光凝恒河猴慢性高眼压性青光眼模型,评价模型眼相关生物学特性.方法成年恒河猴15只,分别采用半导体倍频532激光和氩激光,在房角镜下对功能小梁网区行360℃光凝.对其中7只恒河猴分别采用A超、视网膜断层成像仪和视网膜血流仪进行模型眼和另侧对照眼眼球及视盘形态、血流参数检测.结果两种光凝模式相比,眼压升高后第4周,倍频532激光组平均眼压为48.4±10.3mmHg,氩激光组平均眼压为44.2±7.0mmHg,倍频532激光组与氩激光组三次光凝成功率差异无显著性意义.除视盘面积外,恒河猴模型眼视杯形态指数、杯/盘面积比、盘沿面积、视网膜神经纤维层平均厚度,与对照眼相比差异有极显著性意义.跟轴和前房深度与对照跟相比差异有显著性意义.筛板血流量、血流速度和红细胞移动速率与对照眼相比差异无显著性意义.结论两种激光光凝恒河猴小梁网均可用以建立慢性高眼压性青光眼模型,模型眼出现青光眼眼底特征性形态学改变.

  • 标签: 生物学特性 恒河猴 青光眼 慢性 相关 显著性
  • 简介:以疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyceslanuginosus)为供试菌株,研究了菌龄、酶种类及浓度、酶解时间、酶解温度和稳渗剂对原生质体制备影响及稳渗剂对原生质体再生影响。结果表明,制备嗜热丝孢菌原生质体比较适宜条件为:PDB液体培养基培养28h,以0.7mol/LNaCl为稳渗剂,0.15mol/L溶壁酶,30℃酶解4h。原生质体再生以0.7mol/L蔗糖作稳渗剂为最佳。

  • 标签: 嗜热真菌 疏绵状嗜热丝孢菌 原生质体 制备 再生
  • 简介:慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种重要慢性呼吸系统疾病,主要包括慢性支气管炎和肺气肿,患病人数多,病死率高,由于其缓慢进行性发展,严重影响患者劳动能力和生活质量.为此,国内外许多学者近年来对COPD发病机制进行了大量研究工作,但是到目前为止,COPD研究进展仍然十分缓慢,其主要原因是COPD病因太多,发病机制复杂.本文旨在将国内外有关COPD实验动物模型进行一次总结,并对各种模型优缺点给予客观评价.

  • 标签: 慢性阻塞性肺疾病 动物模型 呼吸系统疾病 慢性支气管炎 肺气肿
  • 简介:目的检测巨噬细胞对新生隐球菌活力影响。方法新生隐球菌标准株B3501与小鼠巨噬细胞系J774细胞共孵育后,检测其出芽率,并通过电镜观察B3501在J774细胞内超微结构。结果被吞噬B3501超微结构完好,J774细胞对B3501菌株吞噬指数在5.67%±1.29%-8.76%±3.09%,而B3501菌在J774细胞内出芽率较高,可达46.85%±6.63%,出芽率随共孵育时间延长而下降,但4hrs组和8hrs组无明显差别(P〉0.05)。超微结构观察显示细胞内新生隐球菌细胞壁完整。结论虽然巨噬细胞存在着胞内和胞外抗隐球菌活性,但新生隐球菌仍可在其细胞内外存活并繁殖。

  • 标签: 新生隐球菌 巨噬细胞 毒性因子 凋亡