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  • 简介:摘要目的尿集聚蛋白羧基(uCAF)酶促化学发光免疫检测方法性能评估并探讨其在早期2型糖尿病肾病进展监测中的价值。方法收集2018年10月至2020年3月就诊于温州医科大学附属第二医院的2型糖尿病患者251例进行回顾性分析,将2021年2月浙江大学医学院附属第二医院的健康体检者156例作为对照。记录患者临床基础信息、糖化血红蛋白和血清肌酐值等,收集尿液标本进行尿肌酐、尿α1微球蛋白(uα1M)、尿免疫球蛋白G(uIgG)、尿白蛋白、尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(uNAG)和uCAF检测。评估uCAF酶促化学发光免疫测定方法最佳反应条件、线性范围、检测限和批内批间变异系数。根据估算的肾小球滤过率(eGFR)将251例患者分为G1~G5期,分别为116、22、28、55和30例;再将166例早期糖尿病肾病(G1~G3期)患者按尿白蛋白/肌酐比值(UACR)分为A1亚组(79例)、A2亚组(48例)和A3亚组(39例),根据uα1M水平分为uα1M 亚组1(83例)、uα1M 亚组2(42例)、uα1M 亚组3(41例),根据uIgG水平分为uIgG 亚组1(83例)、uIgG 亚组2(42例)、uIgG 亚组3(41例)。采用Spearman法分析uCAF水平与eGFR、UACR、uα1M和uIgG水平的相关性。结果(1)uCAF酶促化学发光免疫测定方法的线性范围为3.97~2 000.00 ng/ml,检出限为2.28 ng/ml,批内变异系数为1.15%、1.57%,批间变异系数为1.63%、5.78%,生物参考区间<95.35 μg/g Cr;(2)G1~G3期uCAF水平和阳性率(UACR≥30 mg/g)随着eGFR下降而升高,uCAF水平与eGFR值呈负相关(r=-0.543,P<0.000 1),阳性率由24.14%(28/116)升高至85.71%(24/28)。G4~G5期uCAF水平和阳性率随着eGFR下降而下降,uCAF水平与eGFR值呈正相关(r=0.495,P<0.001),阳性率由30.91%(17/55)降至23.33%(7/30);(3)早期糖尿病肾病患者随着UACR的升高,uCAF水平和阳性率也逐渐升高,uCAF水平与UACR值呈正相关(r=0.602,P<0.001),A1亚组中uCAF阳性率达21.52%(17/79);(4)早期糖尿病肾病患者uCAF水平与uα1M、uIgG水平均呈正相关(r=0.757、0.596,P均<0.001)。结论酶促化学发光免疫分析用于检测CAF有良好的分析性能,是监测早期2型糖尿病肾病损伤和进展的生物标志物。

  • 标签: 糖尿病,2型 糖尿病肾病 化学发光免疫分析 集聚蛋白羧基片段
  • 简介:对人类201条转录假基因的2碱基片、3碱基片、4碱基片、5碱基片和6碱基片进行了统计。发现所统计的碱基片在相对频率小于2范围内的模式占总模式数的89%以上;长度较长的碱基片(5碱基片、6碱基片)同三核苷酸碱基片之间包含和被包含关系较明显;人类转录假基因序列里出现最多的碱基片大多是由AG核组成的,稀有模式主要是以CG核组成的3碱基片。这可能是因为转录假基因序列与其同源编码基因mRNA竞争去稳定蛋白所引起的:在人类转录假基因序列中每平均约26个碱基就有一个终止密码子模式(TAG、TAA和TGA),终止密码子的频繁出现可能是原功能基因编码区的一种容错机制。另外,进行了相对频率的统计分析,发现对于2碱基片、3碱基片、4碱基片、5碱基片和6碱基片的研究是具有其统计意义的。

  • 标签: 转录假基因 碱基片段 相对频率
  • 简介:摘要目的探索羧基末端连接蛋白反应蛋白(CtIP)对脑内皮细胞氧化损伤功能的作用,并探讨其作用机制。方法通过添加三丁基过氧化氢(TBHP)刺激诱导脑内皮细胞氧化应激,采用过表达和干扰慢病毒技术制备CtIP基因表达和沉默表达细胞系,Caspase-3免疫荧光检测细胞的损伤程度,免疫印迹检测细胞CtIP、Caspase-3蛋白的表达,实时荧光定量PCR(Realtime RT-PCR)检测CtIP信号通路基因的表达。结果免疫荧光和免疫印迹检测结果显示,过表达CtIP后,Caspase-3的表达降低至正常细胞的1/3水平(相对表达量),表明血管内皮细胞损伤程度减轻。而干扰CtIP表达后,Caspase-3表达显著增加至正常细胞的4/5水平(相对表达量),提示血管内皮细胞损伤程度提高。Realtime RT-PCR结果显示,CtIP基因显著上调BRCA1和ZBRK1基因的表达,而抑制了p21基因的表达。结论证实CtIP基因对脑内皮细胞氧化损伤具有显著的抑制作用,并确定了CtIP基因与BRCA1、ZBRK1和p21基因在损伤过程中的调控关系。

  • 标签: CtIP基因 氧化损伤 脑血管内皮细胞 抑制
  • 简介:目的探讨结直肠癌患者中羧基张力(CTEN)蛋白的表达及其与结直肠癌患者临床病理因素和预后的关系。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2010年1月至2012年12月江苏大学附属医院收治153例结直肠癌患者的临床病理资料。采用免疫组织化学染色检测结直肠癌及其癌旁组织中CTEN蛋白的表达。观察指标:(1)免疫组织化学染色检测结直肠癌组织和癌旁组织中CTEN蛋白表达情况。(2)结直肠癌组织中CTEN蛋白表达与结直肠癌患者临床病理因素的关系。(3)结直肠癌组织中CTEN蛋白表达与患者预后的关系。术后采用电话方式进行随访,了解患者生存情况。随访时间截至2015年5月。计数资料采用双侧,检验。采用Kaplan—Meier法绘制生存曲线,Log—rank检验进行生存分析。单因素及多因素COX比例风险模型分析预后因素。结果(1)CTEN蛋白在结直肠癌组织和癌旁组织细胞中主要表达于细胞质,其阳性表达率分别为92.16%(141/153)和20.26%(31/153),两者比较,差异有统计学意义(x^2=160.647,P〈0.05)。35.95%(55/153)的结直肠癌组织和6.54%(10/153)的癌旁组织中CTEN蛋白高表达,两者比较,差异有统计学意义(x^2=39.561,P〈0.05)。(2)肿瘤最大直径〈5cm和≥5cm的结直肠癌组织中CTEN蛋白高表达率分别为16.30%和63.57%,在TNM分期中的Ⅰ~Ⅲ、Ⅳ期中分别为31.15%和54.84%,在无和有神经和(或)脉管侵犯中分别为26.23%和42.39%,上述指标比较,差异均有统计学意义(x^2=38.670,6.026,4.161,P〈0.05)。(3)153例结直肠癌患者中,109例术后接受化疗和(或)放疗和(或)生物靶向治疗。55例CTEN蛋白高表达患者中,接受术后化疗和(或)放疗和(或)生物靶向治疗41例;98例CTEN蛋白低表达者中为68例,两者比较,差异无统计�

  • 标签: 结直肠肿瘤 羧基张力蛋白 预后 免疫组织化学染色
  • 简介:从钙粘蛋白介导苏云金杆菌晶体(BtCry)毒素对害虫的毒杀过程、钙粘蛋白重复区和近膜区与BtCry毒素的分子间作用涉及的结合位点及可能的互作机制等方面,综述了钙粘蛋白片段与BtCry毒素协同作用的最新研究进展。昆虫钙粘蛋白某些片段在非折叠状态时,可与BtCry毒素形成寡聚体,从而增加BtCry毒素对靶标害虫的毒杀活性。相关研究成果有助于提高BtCry毒素毒杀害虫的能力,克服害虫抗药性,具有一定的应用前景。

  • 标签: 苏云金杆菌 晶体毒素 钙粘蛋白 增效 综述
  • 简介:没有电脑,没有电视机,没有MP3的少年们有着怎样的生活呢?我想这是现代孩子无法触及,无法亲身体会的。前辈们在艰苦的环境下成长,凭着坚持不懈的努力,最终实现了自己的童年梦想!—读《我的少年时代》有感广州市海珠区北大附中广州实验学校初一级张紫殷

  • 标签: 广州市海珠区 少年时代 实验学校 电视机 MP3 孩子
  • 简介:应老师真是一位宽容大度、善于助人的好老师,明明知道学生为了讨口饭吃,欺骗了自己,不仅不责怪,反而更愿意去帮助这名学生。金敬迈爷爷真幸福,遇上这么一位好老师!——读《我的少年时代》有感

  • 标签: 少年时代 老师 学生
  • 简介:摘要:为了有效地提升蓝宝石基片的平潭化就必须要采取相应措施来对其进行单面研磨实验,为此,本文通过对磨料种类、研磨盘转速以及磨料粒径等相关参数的研究分析了影响蓝宝石基片的单面研磨质量的各类因素。

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  • 简介:目的构建含Sonichedgehog(SHH)蛋白N端基因片段的毕赤酵母表达载体。方法通过BamH1、Xho1双酶切、T4连接酶连接,将SHH-N基因片段插入pET22b原核表达载体,构建pET22b-SHH-N质粒;经PCR扩增,产物再与pTA2载体连接,构建pTA2-SHH-N重组质粒;经EcoR1及Not1双酶切、T4连接酶连接,将SHH—N端基因片段插入pPIC9K质粒,构建pPIC9K-SHH-N重组质粒;通过线性化、脱磷酸化,将线性化pPIC9K-SHH-NDNA转染毕赤酵母菌株GS115,最后经PCR扩增和测序鉴定。结果转染的毕赤酵母经PCR扩增和测序证实含有SHH-N基因片段,与原始的基因片段序列完全一致。结论成功地构建含SHH-N蛋白基因片段的毕赤酵母表达载体。

  • 标签: 质粒 DNA 重组 毕赤酵母 聚合酶链反应
  • 简介:采用活性溶胀种子无皂乳液聚合法制备了表面修饰有羧基的彩色且在特定激发下释放荧光的聚苯乙烯微球。采用乳液聚合首先制备尺寸均一的苯乙烯纳米小球作为可溶胀活性种子,采用丙烯酰化的染料分子作为共聚单体,从而制备得到有色苯乙烯微球。所得到的有色微球进一步作为种子,通过溶胀法负载稀土配合物进行荧光标记,并再次通过乳液聚合使其包裹在微球内。为了便于生物分子偶联,在聚合过程中引入甲基丙烯酸作为功能化共聚单体,从而使所得微球表面被羧基功能化。

  • 标签: 标记 无皂乳液聚合 彩色 荧光 羧基化
  • 简介:摘要目的观察羧基张力蛋白素(CTEN)对肝癌细胞上皮-间充质转化和侵袭的影响。方法选取2017年6月到2020年1月郑州大学附属南阳市中心医院收集的120例肝癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析肝癌组织和癌旁组织中CTEN蛋白表达水平。采用慢病毒介导对照短发卡RNA(shRNA)和CTEN shRNA在肝癌细胞株MHCC97中构建CTEN敲低细胞株(CTEN KD组)和对照细胞株(对照组)。采用Transwell分析两组细胞的侵袭能力。采用Western blot分析两组细胞EMT标记分子表达水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析两组基质金属蛋白酶(MMP)-9和MMP-2表达水平。计量数据比较采用t检验。结果与癌旁组织CTEN mRNA和蛋白表达水平(1.08±0.21、1.25±0.21)比较,肿瘤组织中CTEN mRNA和蛋白表达水平(3.14±0.37、2.74±0.19)显著增加,差异有统计学意义(t=3.447、2.149,P<0.05)。与对照组细胞CTEN mRNA和蛋白表达水平(1.00±0.17、1.12±0.16)比较,CTEN KD组细胞CTEN mRNA和蛋白表达水平(0.25±0.09、0.21±0.08)显著下降,差异有统计学意义(t=2.228、2.548,P<0.05)。与对照组细胞迁移数量[(125.29±21.05)个]比较,CTEN KD组细胞迁移数量[(51.28±5.39)个]显著下降,差异有统计学意义(t=3.849,P<0.05)。与对照组细胞上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)(0.19±0.07)和间质标志物[波形蛋白(Vimentin)和Snail]蛋白表达水平(1.22±0.19、0.87±0.15)比较,CTEN KD组细胞E-cadherin表达水平(1.19±0.18)显著增加(t=4.012,P<0.05),而Vimentin和Snail蛋白表达水平(0.71±0.16、0.20±0.08)显著下调,差异有统计学意义(t=2.147、3.017,P<0.05)。与对照组细胞MMP-9和MMP-2蛋白表达水平[(78.69±5.99)、(60.82±4.09) μg/L]比较,CTEN KD组细胞MMP-9和MMP-2蛋白表达水平[(28.18±4.80)、(31.49±4.96) μg/L]显著下降,差异有统计学意义(t=2.912、2.612,P<0.05)。结论CTEN在肝癌组织中表达上调,参与肝癌细胞的迁移和上皮-间充质转化。

  • 标签: 羧基张力蛋白素 肝癌 上皮-间充质转化 迁移
  • 简介:首先采用饱和硫酸氨分步沉淀和SephadexG-200凝胶层析的方法,获得了非免疫状态下中华鲟(AcipensersinensisGray)和达氏鳇(HusodauricusGeorgi)的血清免疫球蛋白(Ig),在此基础上使用木瓜蛋白酶水解对所获得的免疫球蛋白片段进行了酶解,并采用SDS-PAGE和Western-blot等方法分析了所获得的水解片段。结果显示,2种鲟鱼的免疫球蛋白均可被木瓜蛋白酶水解蛋白,通过SephadexG-100凝胶层析后均可得到两个完全分离的、均一的蛋白峰。SDS-PAGE检测两个水解片段的相对分子量分别为44KD和66KD,West-ern-blot检测结果显示,66KD的片段可以在硝酸纤维素杂交膜上被各自的兔抗鲟IgM多克隆抗体所识别,而44KD片段的检测结果为阴性。这表明,2种鲟科鱼类的木瓜蛋白酶水解特性相同,提示鲟科鱼类的免疫球蛋白在免疫学及生化方面具有较大的相似性。

  • 标签: 达氏鳇 中华鲟 免疫球蛋白 木瓜蛋白酶 水解片段
  • 简介:雪儿是坡娃从狼群中救回来的一匹小马驹,它和坡娃一家在野狐峪过着宁静的田园生活。战争爆发了,雪儿被日军强行征走,身上被烙了一枚日本军营的火印。日本军官河野看中了雪儿,想把它训练成自己的坐骑,但雪儿不肯接受河野的奴役。

  • 标签: 田园生活 日军 日本 村民 苦难
  • 简介:一只初生的小白兔被我用白色塑料袋兜着拎回了家。它那么小,只有我的手掌一般大,胖而柔软的身体披着一件雪白的衣服,像一个小绒球;一双红彤彤的眼睛晶莹剔透,像两颗红宝石闪闪发光。我把它叫作“小白”。它更像一个标准的“吃货”。

  • 标签: 塑料袋 红宝石 衣服
  • 简介:年轮揭开岁月的面纱,在雾霭中打发苦难与艰辛,在阳光下邂逅幸福与梦想。让痛,在咒语中死去。收起记忆与憧憬,审视一棵树的来世与今

  • 标签: 随想片段
  • 简介:独自面对横卧在沙漠中的三危山,其犹如男人的身躯一样,坚不可摧,在经历了风吹雨打、战火践踏的洗礼后,反而更呈现出从未有过的坚毅、凝重、深沉,给人一种强烈的震撼,其坚硬而又默默地立于此处,承受着一切一切……加之耳边由莫高窟传来的摇铃声,使人觉得这里的一切皆是那样的协调,自己仿佛与当下环境融为一体。

  • 标签: 莫高窟 古代人 造型 作品