简介：目的探索碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和成软骨能力的影响,并确定适用于hBMSCs体外软骨构建的细胞代次。方法获取hBMSCs,分别用DMEM和DMEM+bFGF培养基进行培养。两组细胞均传代至第4代,比较两组各代次hBMSCs的形态变化、细胞得率;取第3代细胞,用pellet法体外成软骨诱导培养3周,观察两组pellet大体观并进行Ⅱ型胶原染色。在上述实验基础上,取hBMSCs用DMEM+bFGF培养基进行培养,1∶3传代培养至第8代,观察各代次细胞的形态变化;对各代次pellet体外成软骨诱导培养3周后,行大体观察并进行Ⅱ型胶原染色。结果DMEM+bFGF培养体系下的细胞形态、细胞得率及成软骨能力等方面均优于DMEM组。DMEM+bFGF培养体系下,按照1∶3传代的细胞传至第6代仍能维持较好的细胞形态;第1~4代细胞均表达软骨特异性细胞外基质Ⅱ型胶原,第5及后续代次的细胞成软骨能力较差。结论bFGF可明显促进hBMSCs增殖,并可更好地维持hBMSCs的成软骨能力,在该培养体系下的第1~4代细胞适用于体外软骨构建。

简介：“知识增殖”是借鉴生物学中细胞增殖的有关概念提出来的．主要是指由一个知识引发出若干个有价值的新知识：知识增殖的内涵是多元的，它可以是学习理念、学习状态，也可以是学习方法、学习结果。明晰其内涵，对促进知识增殖有重要的促进作用。

简介：目的：观察一种新型HLA衍生肽(RDP1258)的体内免疫抑制功能并探讨其机制。方法：人工固相合成一种衍生肽(RDP1258)，用^3H-TdR法观察其在体内对大鼠脾细胞增殖反应的影响：与HO-1酶活性激动剂HEMIN及拮抗剂ZnPP相对比，采用酶化学法及免疫组化方法观察其对体内脾细胞血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-1，HO-1)活性的影响。结果：RDP1258可显著抑制淋巴细胞转化及MLR的增殖反应：该肽能够明显提高体内HO-1活性，并增强HO-1的表达。结论：RDP1258体内应用能够显著抑制大鼠脾细胞由丝裂原或同种抗原引起的增殖反应，这种作用可能是通过影响HO-1活性而达到的。

简介：目的：体外观察黄芪对人喉癌细胞系Hep-2的抑制增殖和转移能力的作用并探讨其作用机制。方法：用20、100、200μg/ml的黄芪作用于Hep-2细胞24h,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,侵袭实验观察药物对Hep-2细胞侵袭转移能力影响,AO/EB染色观察细胞凋亡,Westernblot检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果：MTT结果显示黄芪对Hep-2细胞的增殖抑制作用具有明显的剂量依赖性;流式细胞仪检测发现随着黄芪浓度增高,细胞凋亡率逐渐升高,统计学分析,各实验组之间及其与对照组之间的差异均有统计学意义（P〈0.05）;AO/EB染色后可见典型细胞凋亡的形态变化;Hep-2细胞体外侵袭能力明显受抑制,存在剂量依赖性;Westernblot检测显示黄芪可剂量依赖性地抑制Bcl-2蛋白表达。结论：黄芪可通过抑制Bcl-2蛋白表达,上调Bax表达,引起喉癌细胞增殖抑制和凋亡,发挥抗癌作用。

简介：摘要：目的 研究黄芩苷对肺腺癌细胞增殖和自我更新能力的影响。方法 使用0、50、100 nM黄芩苷处理H1299细胞，采用CCK8法检测细胞增殖活性；集落形成实验检测细胞的自我更新能力。结果 黄芩苷使H1299细胞活性明显降低（P

简介：【摘要】目的：研究分析美登木素对甲状腺肿瘤细胞增殖迁移能力的影响。方法：取甲状腺鳞癌bcpap细胞株在5-20umol/L美登木素中浸泡48h，使用MTT法测定细胞增殖能力，流失细胞仪检测细胞周期，RT-PCR方法检测细胞的p21mRNA表达。结果：随着美登木素浓度提升，bcpap细胞生长为抑制状态，并且与剂量和时间具有依赖性，肿瘤细胞生长滞留在G1期p21mRNA表达水平显著上调，呈现上调情况。结论：美登木素能够有效抑制甲状腺癌细胞增殖，并且调节肿瘤细胞的迁移。

简介：

简介：空冰箱吕瑶露盘腿坐在房间的地板上，用一百三十七部电话打了一百七十九通电话，仍旧觉得无聊透顶。当她放下最后一个听筒时，墙上的挂钟已经指向中午十二点整。

简介：背景：增殖型天疱疮是寻常型天疱疮的一种变异型，较为少见，常累及口腔。本病分为2个亚型，损害最初表现为松弛型水疱和糜烂（Neumann型）或脓疱（Hallopeau型）。之后两亚型均发展为伴脓疱的色素沉着性增殖性斑块，边缘有肥大的肉芽组织增生。方法：作者报道3例仅有口腔损害的增殖型天疱疮患者。其中2例分别为30岁和45岁男性，另1例为51岁女性。结论：3例患者的口腔损害均为覆白色膜的糜烂及增殖性斑块。组织病理学特征一致：棘层特征性肥厚，基底层与棘层间水疱形成。水疱内可见渗出，主要为嗜酸粒细胞。黏膜固有层上部可见严重的炎性反应。链霉素-生物素免疫过氧化物酶法显示所有病例表皮细胞间均有IgG和C3沉积。

简介：摘要目的探讨增殖修复能力是否受糖尿病皮肤组织及创面中增殖细胞核抗原、蛋白质P53表达的影响。方法在我院随机抽取27例糖尿病足部溃疡患者及27例非糖尿病足部需手术治疗患者，将其分为实验组与对照组。在治疗过程中分别取患者足部皮肤组织及创面进行免疫组化方法检测，比较两组患者的增殖细胞核抗原、蛋白质P53表达情况。结果糖尿病患者皮肤中的增殖细胞核抗原表达明显多于非糖尿病患者，但其创面中的增殖细胞核抗原表达明显低于非糖尿病患者；两组患者皮肤中的蛋白质P53表达情况无明显差异，但糖尿病患者创面中蛋白质P53表达明显低于非糖尿病患者。结论糖尿病患者创面中的增殖细胞核抗原、蛋白质P53表达少，因此非糖尿病患者创面的增殖修复能力强于糖尿病创面。

简介：目的：初步比较人牙周膜干细胞（humanperiodontalligamentstemcell,PDLSC）在牙根不同发育阶段时的增殖能力和成牙/成骨能力的差异,为组织工程化牙齿的种子细胞来源提供一定的实验基础。方法：分别分离培养来自人根尖孔未闭合及根尖孔完全闭合牙齿的PDLSC,通过MTT法检测其增殖能力,碱性磷酸酶（alkalinephosphatase,ALP）试剂盒法检测其ALP活性,茜素红染色法检测两者的体外矿化能力,Westernblot检测其牙本质基质蛋白1（dentinmatrixprotein1,DMP1）、牙本质涎蛋白（dentinsialoprotein,DSP）、核心结合因子（runt-relatedtranscriptionfactor2,RUNX2）和骨细胞特异性转录因子（osterix,OSX）的蛋白表达情况。结果：来自人根尖孔未闭合牙的PDLSC的增殖活性、ALP活性和矿化能力、DMP1、RUNX2、DSP和OSX蛋白的表达量均高于根尖孔完全闭合牙的PDLSC,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：PDLSC的增殖和成牙/成骨能力随着牙根发育阶段的不同而变化,随着牙根发育的完全,PDLSC的增殖能力和成牙/成骨能力均下降,这种影响可能是由于牙根不同发育阶段牙根周围微环境的变化而导致的。

简介：目的探讨脂质体介导pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染骨髓血管内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)对EPCs增殖的影响。方法体外分离、培养EPCs、免疫组织化学及细胞流式仪鉴定EPCs,转染VEGF165后,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内皮祖细胞中VEGF165mRNA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测EPCs培养上清液中VEGF蛋白水平,噻唑蓝(MTT)检测VEGF165质粒转染后对EPCs的影响。结果EPCs表达CD34、CD133及KDR细胞表面标志,PCR后凝胶电泳显示pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染组在576bp处可见有明显条带,pcDNA3.1(+)空质粒转染组和未转染组可见微弱的电泳带。ELISA检测结果表明pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染组VEGF165水平较其他两组高,MTT显示VEGF165质粒转染可促进EPCs增殖。结论EPCs可成功转染VEGF165基因,并促进EPCs增殖,为治疗勃起功能障碍提供实验依据。

简介：目的构建RhoA—siRNA表达载体，研究其对肝癌HepG2细胞肿瘤生物学行为的影响。方法利用pGenesil-1质粒构建RhoA—siRNA表达载体，以脂质体法转染至肝癌HepG2细胞中建立稳定细胞系，并分为3组。转染pGenesil-1-RhoA—siRNA载体者为HepG2／RhoA—siRNA组，转染随机对照载体者为HepG2／control组，未转染的肝癌HepG2细胞作为HepG2组。Westernblot检测RhoA—siRNA对其蛋白表达的抑制情况。分别采用MTT法、细胞划痕损伤和平板克隆形成实验检测转染细胞的增殖、迁移和生长潜能，流式细胞仪检测细胞周期变化。采用单因素方差分析、）f2检验比较各组差异。结果3组细胞蛋白表达水平比较，HepG2／RhoA—siRNA组RhoA蛋白的表达明显下凋（F=178．19，P〈0．05）。HepG2／control组和HepG2组细胞划痕损伤在48h内愈合，而HepG2／RhoA—siRNA组则不能愈合。HepG2／RhoA—siRNA组克隆形成率低于HepG2组和HepG2／control组，分别为39％±3％、67％±5％、70％±6％，其差异有统计学意义（x^2=33．34，38．69，P〈0．05）。RhoA基因沉默显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖，细胞周期中G0／G1期细胞数量增多而S期细胞数量减少（F=70．46，76．57，P〈0．05）。结论RhoA—siRNA表达载体能抑制肝癌HepG2细胞的增殖和迁移，可为肝癌的基因治疗提供新的方法。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-599在卵巢癌中的表达及其对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响及机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-599在36例卵巢癌及癌旁组织、卵巢癌细胞株及正常卵巢上皮细胞中的表达。将miR-599抑制物(实验组)和阴性对照miR-NC(对照组)分别转染至卵巢癌细胞株A2780，qPCR检测转染效率。利用生物信息学技术预测筛选miR-599的候选靶基因，建立双荧光素酶报告基因分析系统，验证miR-599对候选靶基因的直接靶定作用。qPCR和Western blot检测靶基因的mRNA和相关蛋白表达变化。细胞计数法(CCK-8)和Transwell侵袭实验分别检测miR-599对A2780细胞增殖和侵袭能力的影响。结果qPCR结果显示，卵巢癌组织miR-599表达水平高于癌旁组织(P<0.01)。卵巢癌细胞株miR-599表达水平高于正常卵巢上皮细胞(P<0.05)。阿片样物质结合蛋白(OPCML)是miR-599的候选靶基因，双荧光素酶报告基因实验证实miR-599可直接靶定OPCML基因的3′-非翻译区(3′-UTR)(P<0.01)。下调miR-599表达后，A2780细胞OPCML的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01)，细胞周期调控蛋白如CDK4和Cyclin D2的表达降低；细胞侵袭负向调控蛋白E-cadherin蛋白表达升高，正向调控蛋白N-cadherin表达降低，A2780细胞增殖及侵袭能力均降低(P<0.05)。结论miR-599在卵巢癌组织和细胞株中高表达，下调卵巢癌细胞A2780中的miR-599表达可通过升高OPCML基因表达抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭能力。

简介：目的探讨微小RNA-1253(miR-1253)在肺腺癌细胞株中的表达及其对肺腺癌细胞增殖、迁移侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测肺腺癌A549、NCI-H1299、NCI-H157、A973及GLC-82细胞株中的miR-1253表达水平,将miR-1253mimics和miR-1253inhibitor分别转染至A973和NCI-H157细胞,以转染阴性对照质粒NC的细胞为阴性对照(NC)组。MTS实验、克隆形成实验及Transwell迁移侵袭实验检测不同miR-1253表达对A973和NCI-H157细胞增殖、克隆形成及侵袭转移能力的影响。结果QPCR检测结果显示,A549、NCI-H1299、NCI-H157、A973及GLC-82细胞中miR-1253相对表达量分别为0.92±0.06、0.06±0.03、1.10±0.26、0.03±0.01、0.45±0.08。A973细胞转染miR-1253mimics后miR-1253相对表达量显著升高(P<0.05),NCI-H157细胞转染miR-1253inhibitor后miR-1253相对表达量显著下降(P<0.05)。与NC组比较,转染miR-1253mimics能够显著抑制肺腺癌细胞A973的增殖活性、平板克隆形成能力(166.0±29.3vs.371.0±31.4,P=0.001)、迁移(91.1±32.1vs.166.7±33.9,P=0.008)以及侵袭能力(74.4±20.5vs.145.6±28.8,P=0.001);而miR-1253inhibitor能够上调NCI-H157的增殖、平板克隆形成细胞数目(545.0±61.9vs.337.0±39.7,P=0.008)、迁移(246.7±36.7vs.151.1±32.9,P<0.001)以及侵袭能力(231.1±38.8vs.137.8±27.3,P=0.001)。

简介：背景与目的：δ-catenin是连环蛋白家族中的新成员，其表达与星形细胞瘤的病理分级、细胞增殖与侵袭能力的关系尚不清楚。本研究通过检测δ-catenin在星形细胞瘤中的表达和模式与病理分级的关系．并应用胶质瘤细胞系探讨δ-catenin对其生物学行为的影响。方法：应用免疫组织化学方法对156例Ⅰ-Ⅳ级星形细胞瘤进行了δ-catenin表达检测．并分别采用转染和siRNA干扰的方法调控U251和U87胶质瘤细胞系中δ-catenin的表达，通过Westernblotting、MTF、TransWell和克隆形成实验等对δ-catenin的功能进行研究。结果：δ-catenin表达于正常脑组织的神经元中．但正常胶质细胞和I级毛细胞型星形细胞瘤中无表达（0％，0／11）；在Ⅱ级星形细胞瘤中的表达阳性率仅为18％（11／61），明显低于Ⅲ～Ⅳ级的35％（29／84），差异显著（P〈0．01）。转染δ-catenin可明显上调Racl的活性，促进U251细胞的增殖和克隆形成数量，明显增强细胞的侵袭能力，使用Racl抑制剂则明显抑制U251细胞的侵袭力：使用siRNA沉默U87细胞中δ-catenin的表达后则显著降低细胞侵袭力。结论：δcatenin的表达与星形细胞瘤的组织学分级正相关。δcatenin可能通过上调Racl的活性促进胶质瘤细胞的增殖与侵袭。δ-catenin可作为星形细胞瘤生物学行为的标志物．并有望成为治疗该肿瘤的新靶点。

简介：目的：探讨过表达多能相关转录因子Nanog对人牙髓细胞增殖及多向分化能力的影响。方法构建过表达Nanog的慢病毒载体质粒pSIN-EF2-Nanog-IRES-GFP-puro，采用psPAX和pMD2.G慢病毒包装系统转入293T细胞进行病毒液的生产和收取，转染生长良好的第3代人牙髓细胞，构建稳定过表达Nanog的人牙髓细胞株，以空载体转染的细胞为对照组，对细胞进行成脂及成牙本质诱导。采用BrdU法检测细胞的增殖情况，检测多能性转录因子Oct4和Sox2的表达，以及细胞成脂、成牙本质分化能力。采用单因素方差分析数据。结果成功构建Nanog过表达的人牙髓细胞株；BrdU法检测结果显示，Nanog过表达组比对照组细胞增殖能力强（F=90.421，P=0.000）。过表达组Oct4、Sox2mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组（FOct4mRNA=71.649，POct4mRNA=0.000；FSox2mRNA=106.278，PSox2mRNA=0.000；FOct4蛋白=41.632，POct4蛋白=0.002；FSox2蛋白=38.962，PSox2蛋白=0.002）。在矿化诱导条件下，Nanog过表达组DSPP、DMP1和OCN表达量、矿化结节产生量高于对照组（FDSPP=15.261，PDSPP＜0.05；FDMP1=16.235，PDMP1＜0.05；FOCN=17.019，POCN＜0.05）；成脂诱导21d后，Nanog过表达组LPL和PPARγ2表达量及脂质产生高于对照组（FLPL=15.542，PLPL＜0.05；FPPARγ2=10.437，PPPARγ2＜0.05）。结论过表达Nanog能提高人牙髓细胞增殖能力，促进多能性转录因子Oct4、Sox2的表达，增强细胞多向分化能力。

简介：摘要目的检测3种结肠癌细胞株SW480、SW620和COLO205培养液中前梯度蛋白2(AGR2)的表达情况，并探讨不同浓度外源性AGR2对SW620细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用蛋白质印迹法检测结肠癌细胞SW480、SW620和COLO205培养液中AGR2蛋白表达水平。将SW620细胞分为空白对照组、前梯度蛋白2同源人重组蛋白(rAGR2)低浓度组(100 μg/ml)和rAGR2高浓度组(200 μg/ml)，采用CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验检测不同浓度rAGR2对SW620细胞生物学行为的影响。结果蛋白质印迹法检测结果显示，SW480、SW620、COLO205细胞AGR2蛋白表达水平分别为0.545±0.097、0.662±0.040、0.882±0.156，差异有统计学意义(F＝7.46，P＝0.024)，COLO205细胞株AGR2蛋白水平明显高于SW480、SW620细胞株(P＝0.009；P＝0.047)。CCK-8实验结果显示，空白对照组、rAGR2低浓度组、rAGR2高浓度组SW620细胞增殖活性分别为0.422±0.031、0.542±0.040、0.574±0.033，差异有统计学意义(F＝26.35，P<0.001)，rAGR2低浓度组、rAGR2高浓度组明显高于空白对照组(均P<0.001)。细胞划痕实验结果显示，3组细胞36 h细胞划痕面积百分比分别为(28.029±2.107)%、(20.642±0.983)%、(16.951±1.608)%，差异有统计学意义(F＝35.85，P<0.001)，rAGR2低浓度组高于空白对照组(P＝0.001)，rAGR2高浓度组高于rAGR2低浓度组(P＝0.032)。细胞迁移实验结果显示，3组细胞迁移数分别为(447.1±32.3)个、(513.1±55.8)个、(632.4±50.3)个，差异有统计学意义(F＝35.62，P<0.001)，rAGR2低浓度组多于空白对照组(P＝0.007)，rAGR2高浓度组多于rAGR2低浓度组(P<0.001)。侵袭实验结果显示，3组细胞侵袭数分别为(369.1±56.1)个、(505.1±34.4)个、(579.0±71.5)个，差异有统计学意义(F＝32.40，P<0.001)，rAGR2低浓度组多于空白对照组(P<0.001)，rAGR2高浓度组多于rAGR2低浓度组(P＝0.010)。结论不同侵袭性结肠癌细胞的细胞外液中AGR2蛋白表达量不同，随着侵袭能力的增高，AGR2蛋白的表达也增高。AGR2蛋白可提高结肠癌细胞SW620增殖、迁移和侵袭能力。

简介：摘要目的采用细胞功能实验探讨Rab27B对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞系表型的影响。方法收集100例福建医科大学附属协和医院胸外科行手术切除且经过严格病理诊断的食管鳞癌患者的肿瘤组织及癌旁正常食管上皮组织进行免疫组织化学染色；通过蛋白质印迹法(Western blot)实验对比不同ESCC细胞系与正常食管上皮中Rab27B的表达量，筛选适合实验的细胞系；通过慢病毒包装转染构建稳定的Rab27B过表达细胞株，进行细胞计数试剂盒(CCK-8)实验，Transwell实验及划痕实验等细胞功能实验，观察Rab27B在体外对ESCC细胞增殖及迁移的影响；通过裸鼠体表种瘤，观察Rab27B在体内对ESCC细胞增殖的影响。组间比较采用t检验。结果免疫组织化学染色结果显示，Rab27B在食管鳞癌组织中的表达与N分期(χ2＝8.726，P<0.05)、TNM(χ2＝8.036，P<0.01)分期及肿瘤分化程度(χ2＝8.707，P<0.05)密切相关；Western blot实验结果显示，Rab27B在食管鳞癌细胞系中表达均上调；通过对过表达稳转细胞株进行实验结果显示，在Rab27B过表达的情况下，体外细胞增殖能力增强，过表达组伤口愈合比例高于阴性对照组[KYSE140组(85±2)%比(81±1)%，t＝3.098，P<0.05；KYSE9706组(68±2)%比(44±2)%，t＝14.697，P<0.05]，差异有统计学意义；过表达组细胞增殖数高于阴性对照组[KYSE140组0.701±0.031比0.620±0.044，t＝3.607；1.311±0.045比1.180±0.066，t＝2.840；1.826±0.063比1.556±0.052，t＝6.900，P<0.05；KYSE9706组0.511±0.062比0.451±0.046，t＝1.346；0.992±0.055比0.800±0.066，t＝3.871；1.522±0.032比1.250±0.067，t＝6.345，P值均<0.05]，差异有统计学意义。过表达组迁移能力增强，细胞迁移实验中过表达组迁移数高于阴性对照组[KYSE140组1 534±205比665±85，t＝6.782，P<0.05；KYSE 9706组517±45比432±33，t＝3.244，P<0.05]差异有统计学意义；裸鼠肿瘤实验结果显示过表达组裸鼠肿瘤重量高于阴性对照组裸鼠[(0.082±0.025) g比(0.142±0.037) g，t＝2.845，P<0.05]差异有统计学意义。结论Rab27B在食管鳞癌组织中的表达与N分期、TNM分期及肿瘤分化程度密切相关；Rab27B在食管鳞癌细胞系中表达均上调；Rab27B对ESCC细胞的增殖及迁移起促进作用。

简介：的:探讨高血糖大鼠牙髓干细胞(DPSCs)增殖及成牙/成骨分化能力。方法:选取3个月龄糖尿病模型动物GK大鼠及正常对照Wistar大鼠,测定尾静脉血糖值,待血糖稳定1周后,通过酶消化法分离培养两组大鼠DPSCs,通过MTT法测定两组大鼠DPSCs生长曲线,实时定量RT-PCR及Westernblot检测两组大鼠DPSCs牙本质基质蛋白1(DMP1)、Osterix(Osx)、骨钙素(OCN)等成牙/成骨向分化指标的表达。结果:GK大鼠餐后2小时尾静脉血糖值稳定在20.1~22.3mmol/L,Wistar大鼠为5.8~6.3mmol/L。MTT结果显示,GK大鼠DPSCs增殖能力从培养第3天到第7天均较Wistar大鼠DPSCs低(P<0.05)。实时定量RT-PCR及Westernblot检测结果显示GK大鼠DPSCs成牙/成骨向分化指标的表达明显较正常对照Wistar大鼠低。结论:高血糖大鼠DPSCs增殖能力及成牙/成骨向分化能力均较正常大鼠低。