简介：目的应用反向点杂交技术(RDB)建立敏感、特异、简便的检测方法来同时检测17种不同的β-珠蛋白基因突变。方法应用反向点杂交技术对734例来我院做产前检查的高危患者进行检测，发生突变位点共68例，占92.6％。其中，654／N18例占2.45％，41-42／N31例占4．22％，22-28/N5例占0.6％，BE／N5例占0．41％，-28/N4例占0.54％，17／N4例占0.5％，14-15／N1例占0．14％，-29／41-421例占14％，71-72／N1例占0．14％。结论反向点杂交方法应用于进行β-地中海贫血的血液学筛查、基因诊断、携带者检出具有简便、快捷、准确的特点。

简介：目的应用反向线点杂交技术（reverselineblothybridization,RLB）快速鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌。方法收集我院真菌和真菌病研究中心保存的5种曲霉菌（烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、构巢曲霉）和7种毛霉目真菌（冻土毛霉菌、总状毛霉菌、卷枝毛霉菌、少根根霉、小孢根霉、微小根毛霉、伞状犁头霉）,共计98株菌株。利用真菌通用引物ITS1和ITS4对菌株进行PCR扩增,用12个真菌种特异性探针与扩增后产物进行反向线点杂交。将RLB结果与真菌传统形态学鉴定结果、ITS区DNA测序结果进行比较。结果RLB可以正确鉴定98株实验菌株,与形态学方法和ITS区测序方法鉴定结果100%一致,种特异性探针之间未见交叉杂交,显示出该方法的高度敏感性和特异性。8株阴性对照菌株（白念珠菌、茄病镰刀菌、尖端赛多孢、马尔尼菲青霉、疣状瓶霉、棒曲霉、日本曲霉以及雅致小克银汉霉）,使用RLB方法无法鉴定。通过烟曲霉基因组DNA浓度10倍倍比稀释法验证RLB的敏感性为1.8×10-3ng/μL。结论RLB技术为实验室早期快速诊断、鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌提供参考。

简介：

简介：摘要目的探究对结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB突变以PCR-反向点杂交法检测的效果。方法设计结核分歧杆菌rpoB基因引物，采用PCR-反向点杂交法对40例结核杆菌临床菌株耐药性进行检测，对照由DNA测序法检测的标准结核分歧杆菌（H37Rv）rpoB基因，确定rpoB基因的变异情况，对PCR-反向点杂交法的灵敏度和准确性作出评价。结果40株临床菌株中有11株利福平敏感株的基因序列与对照的H37Rv相同，剩下的29株耐药株中检测到变异基因27株，其特异性为100%，阳性率为93.1%。结论rpoB基因本身高度保守,但由于rpoB基因突变导致结核分枝杆菌对利福平耐药。本研究使用PCR-反向点杂交法针对rpoB基因高突变区设计引物，此方法快速、简便、准确,能有效监测临床标本中结核分枝杆菌,对临床早期诊治结核病有极大帮助。

简介：探讨霍夫变换（Houghtransform）在聚合酶链反应-反向点杂交（polymerasechainreaction-reversedotblotting,PCR-RDB）检测基因突变结果的自动化判读中的应用。以凯普HMM-2I医用核酸分子快速杂交仪检测基因突变为例,建立一种通过霍夫变换进行图像识别的方法,以快速判读PCR-RDB的检测结果,并提出一套基于移动终端的检测结果后处理方案。利用开发的软件,对113份地中海贫血常见突变以及86份人乳头瘤病毒分型的PCR-RDB检测结果进行了自动读取,并同人工判读结果进行了比较,二者的符合率均达100%。将霍夫变换应用于PCR-RDB检测图像的自动化判读符合实际需求,无需人工干预,可以降低肉眼判读的错误率并提高工作效率。

简介：目的：建立检测猪常见致病菌的反向斑点杂交方法。方法：将23SrRNA基因芯片用的针对12种细菌的25～30mer探针加长到30～38mer,2对通用引物序列不变。用地高辛标记下游引物,以尼龙膜为载体制备膜芯片,检验探针/膜杂交的特异性和敏感性;另外设计1条大肠杆菌K88基因探针、一段带K88探针的报告基因和1对报告基因的反向PCR引物,在PCR体系中增加封口的K88报告基因和反向引物对,被检样品扩增后进行膜杂交。结果：修改的13条探针与参考目标菌株在膜上成特异性杂交,对52个参考菌株和野外分离株的检测准确率为92%;膜杂交的敏感性与玻片芯片接近,最小检出量为100fgDNA;在尼龙膜上增加K88探针,与3重PCR产物杂交,可以检测到大肠杆菌K88毒力基因。结论：建立的反向斑点杂交方法简便快速,检测成本低,可用于仪器设备不足的实验室,同时可以加入检测如大肠杆菌K88等致病基因,提高基于保守基因的芯片的诊断能力。

简介：

简介：目的：建立一种能同时快速检测奈瑟淋球菌、沙眼衣原体、生殖支原体、单纯疱疹病毒1型和2型的杂交检测方法。方法：选取靶基因16SrRNA基因和gD糖蛋白基因，设计2对通用引物和特异性探针，建立双重PCR结合反向斑点杂交技术检测以上4种病原体，并对其检测能力进行评估。结果：建立的杂交检测方法检测奈瑟淋球菌、沙眼衣原体、生殖支原体、单纯疱疹病毒1型和2型的敏感性分别为1CFU、3IFU、6．7pg／μL、1CFU、1CFU；各特异性探针只与相应病原体扩增产物杂交，未见交叉反应；与临床常规检测方法比较，一致率达96．8％，并显示能检出沙眼衣原体和生殖支原体双重感染。结论：该方法敏感性高、特异性好，并能同时检测多种病原体，在性病的快速诊断和病因学筛查等方面具有重要意义。

简介：摘要用PCR-LiPA可简便、快速、灵敏、特异地检测出一部分结核分支杆菌耐药株的rpoB、katG、rpsL、rrs、embB基因突变，可作为临床结核分支杆菌耐药性的辅助诊断手段。

简介：目的评价PCR结合反向斑点杂交法检测福尔马林固定、石蜡包埋组织中曲霉感染的可行性。方法选取39例病理证实曲霉感染的患者活检标本（21例为鼻窦感染标本、18例为尸检标本），以1对真菌特有的28SrRNA保守序列结构作为真菌通用引物，以临床常见的4个曲霉菌种：烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉的种特异性序列为种特异性探针，与扩增产物进行反向斑点杂交。结果尸检标本阳性率为55．6％（10／18），鼻窦标本阳性率为76．2％（16／21），特异性均为100％。在这些曲霉所致的系统性感染中，烟曲霉是主要的致病真菌。结论该方法能对临床无法培养的石蜡组织块进行回顾性病原学研究，并可以鉴定常见的曲霉菌种，有良好的特异性和敏感性，适用于临床曲霉感染的检测。

简介：论述了龙眼有性杂交的各个技术环节，包括花粉采集及处理、母本花穗的选择及处理、授粉、保果以及存在问题等，为开展龙眼杂交育种提供参考。

简介：摘要：甜瓜是一种经济作物，适合大规模的种植。提升甜瓜的口感和产量的方法是进行杂交，将不通性状的植株基因进行重组，挑选出香甜可口和产量高的植株，经过培育制成种子。本文研究了甜瓜杂交制种技术的具体方法和注意事项。

简介：所谓反向思考,就是从事物相反的方面来思考,从而发掘出新的甚至是更深层更有价值的东西。例如打仗,由于敌人火力太猛,正面进攻受阻,伤亡不小,怎么办?有

简介：打破常规。学会逆向思维，可以让我们的生活变得更加精彩有趣。由日本设计师发明的反向伞，既另类又实用，它将整个雨伞的结构与折叠方式完全颠倒过来：把雨伞的骨架移到了伞外，可以防止被大风吹翻；收起雨伞后，打湿的那面将在伞里，不用担心弄湿衣服，还可稳稳地直接放在地上。

简介：摘要随着我国农业的飞速发展，玉米单产的不断提高，我国玉米制种面积不断扩大的同时，因自然灾害、环境条件及技术等造成的种子质量不合格、减产减收甚至绝收现象时有发生，给制种单位和制种农户带来严重的经济损失，大量劣质种子也给农业生产带来严重后果。

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简介：牛肉是营养丰富的高蛋白，低脂肪肉食品，深受广大消费者喜爱，发展肉牛生产前景十分广阔。

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简介：反向物流包括回收物流和废弃物物流等．它是现代物流活动的一个重要组成部分在反向物流的实施过程中，最困难的是制造商和零售商的目标不一致。导致反向物流的管理非常艰巨。因此，企业必须从供应链一体化的高度去认识和解决反向物流管理问题．

简介：目的评估运用切除疝囊、组织分离、结合腹腔镜的杂交技术治疗巨大腹壁切口疝可行性及临床价值。方法回顾性分析2008年1月至2013年5月,首都医科大学附属北京朝阳医院西区采用单纯开放手术及杂交技术治疗的巨大腹壁切口疝195例患者的临床资料（主动减容患者除外）。对比二种手术方法手术难度、安全性、并发症、术后恢复及术后复发等情况。结果二种手术方法的时间接近。杂交组切口长度（8±4）cm明显小于开放组（15±5）cm。开放组和杂交组住院时间相当。术后随访6～48个月。二组并发症比较,开放组的浆液肿10例高于杂交组4例,均无术后死亡。开放组术后复发1例,杂交组无复发;复发患者均于术后2年内再次接受杂交技术治疗并治愈。结论应用杂交技术治疗巨大腹壁切口疝较开放手术具有一定的优势。