简介：目的：构建40S核糖体蛋白S6的原核表达载体,表达并纯化S6蛋白,将其作为底物用于S6激酶（S6K）的体外活性测定。方法：采用RT-PCR方法从人胚肾细胞HEK293中获取S6cDNA,将扩增产物克隆至大肠杆菌表达载体中,进行酶切及测序鉴定;IPTG诱导GST-S6融合蛋白在大肠杆菌中表达,用谷胱甘肽亲和层析纯化GST-S6,免疫沉淀法检测该蛋白是否可作为底物用于S6K的体外激酶活性测定。结果：酶切及测序鉴定表明构建了S6原核表达载体,并表达及纯化出GST-S6融合蛋白,相对分子质量为55×103。该蛋白可用于S6K的体外激酶活性测定,特异性强。结论：S6蛋白的克隆、表达与纯化成功,可用于S6K的体外激酶活性测定,为研究S6K的功能奠定了基础。

简介：文中综述了核糖体基因在黏菌分子系统学研究中应用现状，并就目前黏菌分子系统中存在的问题及发展方向提出了看法。

简介：内部核糖体进入位点（IRES）是mRNA5端非编码区的一段特殊序列，允许核糖体直接在此序列结合mRNA并起始翻译。对IRES的发现、分类、特征，以及细胞中是否存在该元件进行了简要综述。

简介：【目的】谷斑皮蠹是一种重要的检疫性害虫,在新疆周边多个国家分布,口岸检疫人员多次从进境货物中截获谷斑皮蠹,该虫对新疆的农业生产极具威胁。【方法】以谷斑皮蠹的16SrDNA基因为靶序列,用昆虫通用引物对4种供试皮蠹进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,用生物软件设计检测谷斑皮蠹的特异性引物与探针。【结果】设计的特异性引物（TG-SNP-F/TG-SNP-R）及所建立的常规PCR方法能有效检测出谷斑皮蠹,其扩增产物的片段大小为250bp,灵敏度为3ng·μL^-1设计的特异性引物（TG-F/TG-R）和探针（TG-probe）,以及所建立的实时荧光PCR方法,对谷斑皮蠹的检测特异性强,灵敏度达0.8fg·μL^-1【结论】建立的常规PCR方法和实时荧光PCR检测方法能够对谷斑皮蠹进行准确鉴定,为口岸检疫人员检测进境货物中携带的谷斑皮蠹提供技术支持。

简介：

简介：用定序技术的16SrDNA基因，entomopatho遗传因子的线虫(杀虫剂的一种)的非共生的细菌的三不同的种(Steinernemasp。并且Heterorhabditissp)从感染的昆虫死尸被孤立并且识别{街郎mellonella幼虫)在48小时的柱子感染以后。顺序类似分析表明紧张SRK3，SRK4和SRK5分别地属于Ochrobactrumcytisi，Schineria幼虫和Ochrobactrumanthropi。isolatesO。anthropi和S。幼虫被发现分别地，而，与Heterorhabditisindica紧张BDU-17和Yer-136被联系O。cytisi与Steinernemasiamkayai紧张BDU-87被联系。Phenotypically，时间的杀虫剂的一种细菌是相当与共生杀虫剂的一种细菌(Photorhabdus和Xenorhabdus类)有关。紧张SRK3和SRK5phylogeographically类似于几非共生者并且污染了在德国(LMG3311T)和中国(X-14)孤立的杀虫剂的一种细菌，当紧张SRK4与S的isolates相同时。从在匈牙利的Wohlfahrtiamagnifica的幼虫(Ll/57，Ll/58，Ll/68和L2/11)。结果被RNA第二等的结构和排列序列的最小的精力计算进一步证实。这研究建议这些线虫的非共生者phylogeographically由于阶段变化在某程度被分叉。因此，这些紧张不是主人依赖者，但是环境特定孤立。

简介：【背景】米尔顿姬小蜂是一种入侵我国台湾地区的植食性小蜂,能够严重影响水果的产量和食用价值。目前在我国大陆没有分布,由于其个体微小,与近似种区别较小,通过传统的形态学分类方法难以鉴定,因此有必要研究其基因片段序列,探讨分子鉴定方法。【方法】利用PCR方法扩增并测定了米尔顿姬小蜂线粒体16SrRNA和COⅠ基因的部分序列,并对各序列的碱基组成进行了分析。然后根据COⅠ基因部分序列,利用DNAMAN的MaximumLikelihood方法构建了米尔顿姬小蜂与膜翅目其他科的系统发育树。【结果】16SrRNA基因的PCR扩增产物为426bp,COⅠ基因的PCR扩增产物为488bp。通过测序获得米尔顿姬小蜂16SrRNA和COⅠ基因部分序列,序列分析表明,16SrRNA和COⅠ基因的A+T含量均较高,存在较强的A+T偏向性。系统发育树显示,米尔顿姬小蜂与蚜小蜂科的Encarsiaberlesei亲缘关系最近,与姬小蜂科的Chrysocharisnautius、C.eurynota亲缘关系较远。【结论与意义】本研究为米尔顿姬小蜂的分子鉴定提供了依据。

简介：对四个单位保种的S180细胞经KM小鼠腹腔传代，体外培养加秋水仙碱，涂片、染色后，显微镜下计数染色体数目：腹水传代的S180细胞．用70％乙醇固定，流式细胞仪测DNA含量。结果如下：本学部(本部)，中国医学科学院药物所(药物所)，武汉大学保种中心(武汉大学)和北京市肿瘤所(肿瘤所)保种的S180细胞株，其染色体均数分别为628±22．8，69．1±21．2，39．9±8．26，58．7±9.75条。四单位S180细胞株染色体数做方差分析表明，除肿瘤所与本部外，其它两单位比较均有显著统计学差异(P<0．01)。直方图分析显示主流染色体范围分别为56～60，61～65，41～45，61～65条。流式细胞术DNA含量分析表明肿瘤所S180DNA含量最多，武汉大学保种的S180细胞的DNA含量最少。这些结果均证明四个单位的S180细胞株在一些方面已出现显著差异。

简介：CleavageofchromosomalDNAintooligonucleosomalsizefragmentsisanintegralpartofapoptosis.ElegantbiochemicalworkidentifiedtheDNAfragmentationfactor(DFF)asamajorapoptoticendonucleaseforDNAfragmentationinvitroGeneticstudiesinmicesupporttheimportenceofDFFinDNAfragmentationandpossiblyinapoptosisinvivo.RecentworkalsosuggeststheexistenceofadditionalendonucleasesforDNAdegradation.Understandingtherolesofindividualendonucleasesinapoptosis,andhowtheymightcoordinatetodegradeDNAindifferenttissuesduringnormaldevelopmentandhomeostasis,aswellasinvariousdiseasedstates,willbeamajorresearchfocusinthenearfuture.

简介：核糖核酸（RNA）是一种遗传物质,参与细胞蛋白质合成和免疫调节等生理活动。RNA及其降解物在药物开发、保健品和食品添加剂等领域具有良好的应用前景。利用富含RNA的酵母发酵提取RNA是生产RNA的有效途径。概述了酵母发酵法制备RNA的进展及其应用。

简介：<正>Apoptosisisahighlyregulatedphysiologicalprocesscriticalindevelopmentandtissuehomeostasis.Abnormalapoptosiscanleadtodiseaseconditionsincludingneurodegeneration,autoimmunityandcancer.DNAfragmentationisanintegralpartofapoptosisandhaslongbeensuspectedtobeofcriticalimportanceincleaninguppotentiallyantigenicDNAandgeneticmaterialcapableofinducingneoplasmictransformationinneighboringcells.DirectevidenceforthisfunctionofDNAfragmentationhowever,isstilllacking.TheidentificationofaheterodimericDNAfragmentationfactor45and40(DFF45andDFF40,alsocalledICADforInhibitorofCaspaseActivatedDNaseandCADforCaspaseActivatedDNaserespectively)aswellas

简介：AsthetopologicalpropertiesofeachspotinDNAmicroarrayimagesmayvaryfromoneanother,weemployedgranulometriestounderstandtheshape-sizecontentcontributedduetoasignificantintensityvaluewithinaspot.Analysiswasperformedonthemicroarrayimagethatconsistedof240spotsbyusingconceptsfrommathematicalmorphology.Inordertofindoutindicesforeachspotandtofurtherclassifythem,weadoptedmorphologicalmultiscaleopenings,whichprovidedmicroarraysatmultiplescales.Successiveopenedmicroarraysweresubtractedtoidentifytheprotrusionsthatweresmallerthanthesizeofstructuringelement.Spot-wisedetails,intermsofprobabilityoftheseobservedprotrusions,werecomputedbyplacingaregularlyspacedgridonmicroarraysuchthateachspotwascenteredineachgrid.Basedontheprobabilityofsizedistributionfunctionsoftheseprotrusionsisolatedateachlevel,weestimatedthemeansizeandtextureindexforeachspot.Withthesecharacteristics,weclassifiedthespotsinamicroarrayimageintobrightanddullcategoriesthroughpatternspectrumandshape-sizecomplexitymeasures.Thesesegregatedspotscanbecomparedwiththoseofhybridizationlevels.

简介：Apoptosiscanbetriggeredbyavarietyofstimuliincludingdeathfactors,anti-cancerdrugsandfactor-deprivation.Theseapoptoticcellsareswiftlyphagocytosedbymacrophagestopreventthereleaseofnoxiousorinflammatorymaterialsfromdyingcells.ThemolecularanalysisofFasligand(adeathfactor)-inducedapoptosisindicatedthatacascadeofproteases(caspases)isactivatedduringthisprocess,whicheventuallyactivatesaspecificDNase(caspase-activatedDNase).CADexistsasacomplexwithitsinhibitor(ICAD)inproliferatingcells.Whenthecellsaretriggeredtoapoptosis,caspases,inparticularcaspase3,inthedownstreamofthecaspasecascadecleaveICAD,whichreleasesCADtocauseDNAdegradationinnuclei.

简介：质粒载体在基因治疗中占据重要地位。传统质粒DNA在真核生物中可能会引起严重的炎症反应,未甲基化的CpG序列可能抑制基因的表达,最好的解决办法是在生产质粒载体过程中将细菌调控序列整体消除。微环DNA是一种新颖的小环超螺旋表达框,它是传统质粒在大肠杆菌体内通过位点特异性重组得到的。微环DNA缺乏抗性标记基因、复制原点等细菌序列,增强了在临床上的安全性。体内、外研究表明,微环DNA提高了转基因表达效率。我们就重组酶系统及微环DNA的生产、纯化和转染效率等方面的研究进行了综述

简介：The2004SoutheastAsiaTsunamikillednearly5,400peopleinSouthernThailand,includingforeigntouristsandlocalresidents.TorecoverDNAevidenceasmuchaspossiblefromtheseriouslydecomposedbodies,weexploredproceduresofsamplepreparationfrombothboneandtoothsamplesaswellasbothmitochondrialandnuclearmarkers.DespitehavingfailedtorecoverenoughDNAfornuclearmarkertyping,wesucceededinobtainingfullyinformativeresultsformitochondrialmarkers(HV1andHV2)from258toothsampleswithasuccessrateof51%(258/507).UsinganorganicDNAextractionmethodcoupledwithanultrafiltrationstep,weobtained16STR(including13CODISloci,onesexdiscriminationlocus,andtwoIdentifilerloci)profilesfor834sampleswithasuccessrateof79%(834/1,062).Inaddition,bycomparingtheallelicfrequenciesbetweenthetypedsamplesasagroupandotherindexpopulations,weconcludethattheThaitsunamivictimsareacombinedgroupofseveralpopulations.Ourresultsprovidevaluableevidenceandprotocolsforthefutureforensicpractice.

简介：蕈菌核糖核酸酶蛋白和肽是蕈菌中一类重要的功能性成分，其研究结果有助于人们进一步了解蕈菌的生物学功能。文中综述了不同种蕈菌核糖核酸酶蛋白和肽的分离、纯化学方面研究进展，并讨论了它们的生理生化性质、活性、对底物的特异性、作用机制及应用前景等。

简介：Eelfamilyisahugeone,inwhichmanykindsofeelsespeciallysomemigratoryeels,bearstrongresemblancetoeachother,andarethereforedifficulttobeidentified.Inthisstudy29randomprimerswereusedtomakeRAPDanalysisforJapaneseseel(Anguillajaponica),Europeaneel(Anguillaanguilla)andPikeeel(Muraenesoxcinereus).Andtotally299fragmentswerecounted.Sharedorspecificfragmentswerecountedandgeneticsimilarityorgeneticdistancewerecalculated.ThegeneticsimilaritybetweenJapaneseeelandPikeeelis0.68andthegeneticdistancebetweenthemis0.32;thosebetweenEuropeaneelandPikeeelare0.72and0.28respectively,andbetweenJapaneseeelandEuropeaneelare0.74and0.25respectively.Themethodhasbeenshowntobesuitabletomolecularidentificationofeels.Itprovidesanalternativeapproachtodeterminetherelationshipbetweenspecies.

简介：DNA聚合酶III是为DNA的复制负责的五eubacterialDNA聚合酶之一双。在DNA聚合酶III核心酶的十个子单元之中，高山哈子单元两个都为polymerizing催化反应DNA海滨。在这研究，我们提取了高山的genomic序列哈从159的子单元定序eubacterial染色体，并且执行了基于顺序的种系发生、结构的分析。我们发现所有eubacterial染色体有至少一座高山哈子单元，哪个形式homodimers或heterodimers。种系发生并且领域高山的结构的分析以及拷贝数字变化哈在每个细菌的子单元显示高山的分类哈子单元进四个基本的组：polC，dnaE1，dnaE2，和dnaE3。这个分类具有在染色体作文分析的本质。我们也巩固了命名惯例在基因注解避免进一步的混乱。

简介：在源于mitochondrial机能障碍的氧化phosphorylation的改变长被假设了涉及tumorigenesis。线粒体最近被显示了在调整规划房间死亡和房间增长起一个重要作用。而且，mitochondrialDNA(mtDNA)变化在各种各样的癌症房间被发现了。然而，在tumorigenesis的这些mtDNA变化的角色仍然保持大部分未知。这评论集中于基本mitochondrial遗传，mtDNA变化和与癌症联系的结果的mitochondrial机能障碍。潜在的分子的机制，调停从mtDNA变化的致病和到tumorigenesis的mitochondrial机能障碍也被讨论。

简介：