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  • 简介:摘要本文通过荧光定量RT-PCR常规RT-PCR,分别对191例临床粪便样本进行GⅠ、GⅡ型诺如病毒的快速检测,优化反应条件,筛选出最优反应体系,对两种方法的特异性、灵敏性进行检测分析。发现两种方法均可较好的检测出GⅠ、GⅡ型诺如病毒。其中常规RT-PCR阳性样本数为142,检出率为74.34%,最低检出限为103copies/μl,标准曲线均呈现出良好的线性关系,扩增效率分别为101.336%、103.558%;荧光定量RT-PCR的阳性样本为163,检出率为85.34%,最低检出限为102copies/μl,批内、批间重复试验的标准差范围为0.10~0.59,变异系数范围为0.43%~2.84%,重复性良好。两种方法检出率有显著差异(P<0.05),且对星状病毒、腺病毒以及肠道病毒等均无交叉反应,GⅠ、GⅡ型诺如病毒之间也无交叉反应。荧光定量RT-PCR在灵敏度方面占优,建议在临床检测中应用。

  • 标签: RT-PCR 荧光定量RT-PCR GⅠ GⅡ型诺如病毒
  • 简介:在人教版高中《生物·选修3·现代生物科技专题》关于PCR的教学中,有几个问题会经常困扰教师和学生。下面就列举这些问题并作以解答。

  • 标签: PCR 生物科技 人教版
  • 作者: 叶圆
  • 学科:
  • 创建时间:2023-09-15
  • 出处:《中国医学人文》2022年32期
  • 机构:四川省第五人民医院  检验科   四川成都  610000
  • 简介:【摘要】目的:比较评价PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片对结核菌检出效果。方法:选取2021年3月-2022年3月间我院收治的110例肺结核病人作为研究对象,对其进行痰液标本采集,分别施以常规痰涂片检测以及PCR结核分枝杆菌DNA检测,对比两种检测方式对结核菌的确诊率。结果:PCR结核分枝杆菌DNA检测的确诊率高于常规痰涂片检测(P<0.05)。结论:PCR结核分枝杆菌DNA检测对于结核病的临床诊断精准度更高于的常规痰涂片检测,检测效果更好,能够较好的展现出病人的结核菌感染情况,更适用于结核病的早期诊断,具有较高的临床推广意义。

  • 标签: PCR 结核分枝杆菌DNA检测 常规痰涂片 结核菌
  • 简介:摘要:目的 观察在进行结核菌检测过程中开展PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片检测的效果。方法 选入2021年2月至2022年5月本院进行结核菌检测病例256例为对象,对其痰液样本采集,均进行PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片检测。分析检查结果。结果 结合临床最终诊断,本组病例中46例确诊,在检查阳性率上,PCR结核分枝杆菌DNA检测明显高于常规痰涂片检验,P

  • 标签: PCR结核分枝杆菌DNA检测 常规痰涂片 结核菌
  • 简介:

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  • 简介:【摘要】目的:研究对比结核菌检测中PCR结核分枝杆菌DNA检验结果与常规痰涂片检验结果对比。方法:纳入1246例,2021年1月-2021年12月期间,于我院进行结核菌检测的患者,采集患者的痰液样本,分别采用PCR结核分枝杆菌DNA检验与常规痰涂片法进行结核菌检验,对比检验结果,分析PCR结核分枝杆菌DNA检验与常规痰涂片用于结核病早期诊断灵敏度、特异度以及准确度。结果:PCR结核分枝杆菌DNA的阳性检出率15.08%与常规痰涂片的9.68%相比明显更高,P<0.05(x2=19.168);PCR用于早期结核诊断的灵敏度98.62%、特异度99.08%以及准确度99.01%与常规痰涂片的63.30%、93.12%以及88.56%相比均明显更高,P<0.05(x2=88.229,x2=57.381,x2=133.728)。结论:对于结核患者而言,进行结核菌检验时,采用PCR结核分枝杆菌DNA检验灵敏度、特异度以及准确度与常规痰涂片检验相比均更高,可以更加简便、快速的检出患者的结核菌感染情况,在结核病的早期诊断中效能更优,可以为患者的临床治疗提供可靠依据,临床应用价值更高。

  • 标签: 结核菌检测 PCR 结核分枝杆菌DNA 常规痰涂片 微生物检验
  • 简介:【摘要】目的:研究对比结核菌检测中PCR结核分枝杆菌DNA检验结果与常规痰涂片检验结果对比。方法:纳入1246例,2021年1月-2021年12月期间,于我院进行结核菌检测的患者,采集患者的痰液样本,分别采用PCR结核分枝杆菌DNA检验与常规痰涂片法进行结核菌检验,对比检验结果,分析PCR结核分枝杆菌DNA检验与常规痰涂片用于结核病早期诊断灵敏度、特异度以及准确度。结果:PCR结核分枝杆菌DNA的阳性检出率15.08%与常规痰涂片的9.68%相比明显更高,P<0.05(x2=19.168);PCR用于早期结核诊断的灵敏度98.62%、特异度99.08%以及准确度99.01%与常规痰涂片的63.30%、93.12%以及88.56%相比均明显更高,P<0.05(x2=88.229,x2=57.381,x2=133.728)。结论:对于结核患者而言,进行结核菌检验时,采用PCR结核分枝杆菌DNA检验灵敏度、特异度以及准确度与常规痰涂片检验相比均更高,可以更加简便、快速的检出患者的结核菌感染情况,在结核病的早期诊断中效能更优,可以为患者的临床治疗提供可靠依据,临床应用价值更高。

  • 标签: 结核菌检测 PCR 结核分枝杆菌DNA 常规痰涂片 微生物检验
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  • 简介:目的探讨生殖支原体在非淋菌性尿道炎(NGU)/粘液脓性宫颈炎(MPC)中的发病情况。方法应用聚合酶链反应对236例STD门诊的非淋菌性尿道炎(NGU)/粘液脓性宫颈炎(MPC)患者泌尿生殖道标本进行了生殖支原体的检测。结果生殖支原体的阳性检出率为17.8%。结论生殖支原体在性病高危人群中有一定发病率,可引起非淋菌性尿道炎(NGU)/粘液脓性寓颈炎(MPC)。

  • 标签: 生殖支原体 PCR检测 NGU 粘液脓性宫颈炎 MPC
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  • 简介:1985年Cetus公司的Mullis发明的聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是现代分子生物学研究中的一项非常重要的技术,它可在短时间内在试管中获得数百万特异DNA序列的拷贝,从而很容易地对目的基因进行分析、鉴定以及其它操作。这一技术现已广泛应用于生物学的各研究领域。PCR的定量实质是核酸的体外扩增,当人们利用技术扩增出大量的特异DNA序列后,还必须对这些PCR产物进行定性或定量检测,特别是临床检验中,定量分析PCR产物可以为临床诊断、疗效观察等提供更为准确的信息。另外,在研究基因的表达调控研究中,经常利用RT-PCR定量检测某一特定的转录mRNA,因此,建立灵敏、准确、重复性好的PCR产物定量检测法是目前PCR及其相关技术研究的特点,电是定量PCR技术的基础。本文将对这一技术近年来的研究进展状况作一简要综述。

  • 标签: RT-PCR定量检测 PCR产物 技术进展 分子生物学研究 定量PCR技术 DNA序列
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  • 简介:免疫PCR基本原理与ELISA相似,即用一段可扩增的DNA分子代替ELISA中酶放大检出信号,建立了直接免疫PCR的检测蓖麻毒素技术,实验结果表明,其灵敏度达1pg/ml,比ELISA方法灵敏度高10^3倍.

  • 标签: 蓖麻毒素 免疫PCR 戊二醛 生物素 亲和素
  • 简介:目的:用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法准确地定是检验血清中乙型肝炎病毒(HBV)的数量和免疫指标,以指导临床。方法:采用HBV-DVAFQ-PCR诊断试剂盒,以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术组合所产生的实时检验定量PCR方法,检测了58例临床血清标本。结果:经FQ-PCR检测,9例HBV的HBsAg、HBeAg、HBcAg、HBcAb都阳性标本,其HBV-DNA的阳性率为100%,平均HBV-DNA拷贝数为2.0×10^8/ml;16例HBsAg、HBeAb、HBcAb都阳性的标本,其阳性率为62.5%(10例),平均拷贝数为5.2×10^5/ml,而常规PCR只有33%的阳性率;7例HBsAb、HBeAb、HBcAb都阳性的标本,其阳性率为14.3%(1例),平均拷贝数为4.7×10^3ml。结论:HBV-DNA的FQ-PCR检测较常规PCR更具有较高的灵敏度和特异性,且定量准确,结果可靠,能够避免PCR后处理导致物假阳性污染,可以真实反映HBV的感染和低复制状态,对于乙型肝炎的临床诊断,治病方案的选择和疗效观察有较大的指导意义。

  • 标签: 乙型肝炎病毒 荧光定量 聚合酶链反应 DNA HBV 假阳性污染
  • 简介:

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  • 简介:摘要:本文介绍了PCR实验室设计的基本要求及不同布局设计,并着重强调设计过程中需要关注的重点。

  • 标签: PCR检测 工艺布局
  • 简介:结果电泳检测及纯化后DNA产物测序分析均显示TDPCR扩增产物条带特异性、效率较普通PCR扩增产物高,因此我们在VHL基因突变筛查中使用了普通PCR和TDPCR两种方法,在许多普通PCR无产物的基因扩增

  • 标签: 中应用 临床医学科研 价值比较
  • 简介:本实验通过合成与原有下游引物(B)相似的一条新引物(B’),经聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)扩增出比原BCR-ABLcDNA序列减少了4个碱基的参照物,达到定点诱变的目的。经酶切分析证明,两型BCR-ABLmRNA均可通过此方法得到相应的cDNA参照物。参照物和特测模板的共扩增产物可通过毛细管电泳达到基线分离,证明了其可行性。该参数物可用于慢性粒细胞白血

  • 标签: 白血病 PCR定点诱变 BCR-ABL基因 竞争性PCR
  • 简介:

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  • 简介:目的建立检测常见丝状真菌感染病原菌的PCR-RFLP和多重PCR方法。方法建立以PCR技术为基础的限制片段长度多态性(RFLP)方法,首先用真菌通用引物扩增丝状真菌的ITS区,然后用限制性核酸内切酶对PCR产物进行酶切。用4种丝状真菌的特异性引物建立多重PCR体系,用该体系检测单模板、双模板和三模板的扩增情况,并测定该体系的特异性和敏感性。结果用PCR-RFLP技术能够鉴别5种常见丝状真菌,多重PCR能够根据扩增片段的不同鉴别菌种,在合适的反应条件下,对单模板、双模板和三模板均能扩增出目的片段。结论PCR-RFLP和多重PCR技术能够快速鉴定丝状真菌感染病原菌,有临床应用的良好前景。

  • 标签: 丝状真菌 PCR-RFLP 多重PCR 分子鉴定