简介:神经细胞原代培养是研究神经细胞形态及功能的重要手段之一.传统方法是将神经细胞与神经胶质细胞混合培养,无法满足在单一神经细胞培养基础上进行实验研究的需要.本实验在传统培养方法的基础上加以改良,对原混合培养方法在胎龄、取材、温度、消化、换液、抑制剂、机械操作等方面进行了控制和改进.本培养方法具体改进如下:1.运动神经细胞取自E14大鼠胚胎的脊髓.因为胚胎运动神经元形态分化和化学分化程度较低,体外存活能力强,E14胎鼠脊髓易剥离.而传统方法是取E12~E16.E12胎鼠组织太嫩,不易分离;E16胎鼠脊柱已部分骨化,血液太多,挑离脊髓时易形成撕裂损伤.2.取材时将脊髓沿冠状面切开,取脊髓腹侧半,改变传统的整个脊髓培养,以达到培养单一运动神经元的目的.3.整个取材过程在冰袋上进行,更好的保持细胞活力.4.严格控制胰酶的浓度和消化时间.胰酶浓度是0.125%,37℃二氧化碳孵育箱内消化0.5hr较好,采用4℃含血清的DMEM液适时终止反应.为避免组织丢失,改吸弃胰酶为吸组织于另一试管中,且迅速终止消化反应.5.减少传统方法中的吹打次数,用弯头吸管代替直头吸管吹打;取消离心或细胞筛过目等步骤,降低细胞损害程度.6.细胞种植后改传统换全液为换半液,改传统培养2d换液为定时观察,按需换液.这样不仅保证了细胞在已适应了的环境中生长,并且减少了污染的机率.7.本方法不使用抑制剂,减少药物对运动神经元的损伤,使神经细胞在更接近于体内自然环境中生长.种植细胞1~2hr即可观察到细胞贴壁,胞体呈圆形,饱满、透亮,有短的突起出现.因此,本方法的优点是:不仅能够大大缩短从取材到种植的时间,提高运动神经元的活性,而且成功的获得了相对单一的运动神经元培养物(纯度达90%以上),为进一步开展神经生物学研究提供了相对稳定的体
简介:摘要:目的 对临床小儿睾丸内胚窦瘤具体进行诊断时,使用超声诊断方法的情况进行归纳总结,了解其相关方法的临床应用效果等方面的就具体情况。方法 在本院所有所收治小儿睾丸内胚窦瘤的患者群体中,抽取24例患儿开展回顾性分析研究,对其超声检查结果和临床随访等方面情况进行收集和汇总,评价此类诊断方法的临床应用特征等情况。结果 分析后发现,患儿肿块大小为(3.22±1.05)cm,超声下可见其形状为类圆形,并且边界清晰不存在包膜的现象,有14例患儿超声下病灶可见均匀回声,和周围残留的正常睾丸组织的内部回声十分类似,而10例患儿在诊断的过程中发现,其睾丸内可见单发、散在多发的大小不等无回声暗区,局部不存在包膜,透声性良好。肿瘤内部、周围可见丰富血流信号,3例患儿伴有淋巴结肿大,1例伴有腹膜、肝转移。其他特征和随访方面,伴有明显的血清AFP提高,接受睾丸根治性切除之后,则血清AFP明显下降。结论 对于小儿睾丸内胚窦瘤患儿开展检查诊断的过程中,超声方法的临床应用具备一定自身优势,能够观察到病变组织和正常生理组织的明显不同之处,有助于配合其他的检查方法进一步辅助进行临床诊断。
简介:由于电视教材的真实性、直观性和可重复性,受到形态学教学的青睐。我们自己制作了名为“组织学系列电视教材”的电视教学片,并将其作为教学媒体引入组胚的实习教学,通过三年的教学实践,我们观察到使用本电视教材提高了教学质量,优化了组胚教学。具体做法是:首先通过显微摄像录制为素材带,然后由电教中心进行编辑,制作了名为《组织学系列电视教材,实习教材》的电视片。约380分钟,共17集,每集约20~25分钟。上课开始15分钟内先播放实习内容与示教,课时结束前播放小结与检测。由于我们用于制作电视教材的切片标本与学生观察的标本完全相同,真实而直观地反映了学生观察的镜下所见,利于学生在镜下寻找和判断,提高了学生独立观察切片的能力。电视教材上的示教,减轻了教员的重复工作量。与其它电视教材相比具有以下优点:①增加了超微结构部分;②增加了小结部分;③增加了检测部分;①利用电视技术的负效果加了立体感。本电视教材在我校三个年级和其它学校应用以来,受到学员好评,问卷调查显示:73.3%的学员认为电视教材能最真实地反映镜下结构383.3%的学员认为电视教材对指导他们看片的帮助最大;65.5%的学员认为如实习时教员完全不讲解,他们最依赖的教学媒体是电视教材。
简介:随着成人教育事业的不断开展,越来越多的只受过中等教育或高中毕业后就从事医务工作的人员再走进医药院校进行提高。如何针对他们的具体情况搞好教学,是一个值得摸索和重视的问题。与本科生比,这一群体普遍具有年龄偏大、基础参差不齐和记忆力差的特点。但由于他们都有一定的工作经历,以实际工作和提高的需要出发再来学习,因此他们格外珍惜学习机会,勤奋好学,且他们的理解力较强。据此,我们在教学中除了讲清基本概念和重点问题外,还格外注意指导他们的学习方法,教会他们如何记忆。如:1.归类记忆法:将具有共性和规律的结构归为一类,可达以点代面、举一反三的效果。如所有分泌蛋白质的细胞、分泌类固醇激素的细胞、具有吞噬消化功能的细胞等。2.对比记忆法:一些容易混淆的概念,如微绒毛和纤毛、胶原纤维、肌纤维和神经纤维,通过比较它们的相同和不同点,使概念清晰、印象深刻。3.推理记忆法:根据一些细胞或组织的功能,分析推断其结构特点。如浆细胞的功能是分泌抗体,因此它肯定具有丰富的粗面内质网和发达的高尔基复合体,H.E染色时,其胞质就嗜碱性呈紫兰色。这样避免了死记硬背,使死板的形态课变活了,容易记住。4.排除记法;在实验课中适当运用排除法辨认一些不易分清的结构?
简介:摘要目的对比鲜胚移植与冻胚移植在卵巢过度刺激综合征(OHSS)高危患者中的临床应用效果。方法选取2016年3月至2017年3月期间我院收入进行体外受精的OHSS高危患者143例作为研究对象。其中进行鲜胚移植的患者共计69例为鲜胚移植组,进行冻胚移植的共计74例患者为冻胚移植组,对比两组患者其临床治疗效果。结果两组患者临床妊娠率不存在显著性差异,P>0.05。结论在中、重度OHSS患者的临床体外受精中选用鲜胚移植与冻胚移植,妊娠率不存在显著差异性,两者妊娠率基本一致,在鲜胚移植过程中如患者存在OHSS高风险,可选用冻胚移植其安全性较高,具有临床应用价值。