简介：背景γδT细胞与免疫调节进程相关。然而，γδT细胞在胃癌病程中的特点目前尚无考据。本研究评价了胃癌患者外周血中γδT细胞和淋巴细胞亚群的产生情况。方法研究入组了48例患者，另设置49位健康受试者作为对照。采用流式细胞术分析γδT细胞和淋巴细胞亚群。

简介：表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）是一种上皮来源的在多种肿瘤内普遍表达的跨膜蛋白。近年来针对该受体研发的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR—TKI），如吉非替尼和厄洛替尼已经在部分非小细胞肺癌（non—smallcellcarcinoma，NSCLC）患者中显示出明显的疗效。许多回顾性研究已经证实EGFRTKI疗效与EGFR突变之间存在关联，存在敏感突变的患者经TKI治疗的客观缓解率（RR）在30％以上，而无突变者仅为10％。其中19外显子的缺失突变和21外显子L858R突变为主要的敏感突变，T790M为部分对TKI敏感的患者中常见的继发耐药突变。因此治疗前应进行EGFR突变（mEGFR）的检查，在治疗中仍应持续监测突变的发生，这对于靶向治疗的个体化及社会医疗成本的节约都有着重要的意义。

简介：目的探究外周血淋巴细胞亚群水平变化在鼻咽癌（NPC）中的意义.方法选取NPC患者60例为试验组,选取健康体检者30例为对照组.采用流式细胞仪检测试验组治疗前后和对照组的外周血中CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞亚群及自然杀伤细胞（NK）水平;采用免疫组化法和WesternBlot检测试验组治疗前后肿瘤组织中白细胞介素-21（IL-21）蛋白表达水平.结果治疗前,试验组外周血中CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋及NK细胞水平明显低于对照组（P﹤0.01）,CD8＋细胞水平明显高于对照组（P﹤0.01）;治疗后,试验组外周血中CD4＋、CD4＋/CD8＋和NK细胞水平均较本组治疗前明显上升（P﹤0.01）,CD8＋细胞水平较本组治疗前明显下降（P﹤0.01）;治疗后,早期NPC患者的总缓解率高于晚期NPC患者（P﹤0.05）;免疫组化法和WesternBlot检测结果显示,治疗前,NPC患者肿瘤组织中IL-21蛋白的阳性表达率及表达水平均高于治疗后（P﹤0.05）.结论NPC患者外周血中淋巴细胞亚群及NK细胞的检测对鼻咽癌的早期诊断及疗效评判具有重要意义.

简介：目的：分析食管癌患者外周血及肿瘤组织EGFR突变与临床特征关系，探讨外周血及肿瘤组织中EG-FR突变的一致性，进一步分析EGFR-TKI治疗外周血和肿瘤组织中EGFR突变与临床疾病控制率之间的关系，进一步探讨EGFR突变与吉非替尼或者厄洛替尼临床疗效监测中的应用价值。方法采用RT-PCR检测112例食管癌患者外周血和87例食管癌患者肿瘤组织中EGFR突变，其中47例外周血和肿瘤组织配对检测。分析外周血和肿瘤患者组织中EGFR突变与临床特征的关系及两者EGFR突变的一致性。采用EGFR-TKI治疗外周血和肿瘤组织中EGFR突变，评价EGFR突变与吉非替尼或者厄洛替尼临床疗效的关系。结果EGFR突变在鳞癌组明显高于非鳞癌组（P﹤0.05）；肿瘤组织和外周血同时EGFR突变的有11例，且突变位点一致，检测到的EGFR状态以肿瘤组织为标准，两者突变一致性达到73.33%；外周血和肿瘤组织中EGFR突变的患者接受TKI的疾病控制率明显高于EGFR野生型患者（P﹤0.01）。结论食管癌外周血和肿瘤组织EGFR突变与临床特征的关系与鳞癌密切相关；食管癌外周血和肿瘤组织EGFR突变的一致性较高；EGFR-TKI分子靶向治疗外周血和肿瘤组织中EGFR突变的疗效显著。

简介：目的分析自体外周血造血干细胞移植（APBSCT）治疗恶性淋巴瘤的临床疗效及安全性。方法自1995年12月至2005年12月，采用APBSCT联合大剂量化疗治疗恶性淋巴瘤31例。平均4周期常规诱导化疗后行APBSC动员及采集。动员方案：非霍奇金淋巴瘤（NHL）病人采用常规剂量CHOP方案，霍奇金淋巴瘤（HL）病人采用高剂量单药CTX4g／m^2。预处理方案：异环磷酰胺（IFO）12g／m^2CTX4g／m^2，阿糖胞苷（Ara—C）4．5g/m^2，足叶乙甙（Vp-16）0．75g／m^2。移植后对原发灶直径大于4cm或有肿瘤残留的病灶给予局部补量放疗。结果31例病人移植后缓解时间为1N108mo，中位缓解期43mo。其中1年无病生存26例（83．9％），2年23例（74．1％），3年21例（67．7％）。全组无移植相关死亡。结论APBSCT联合大剂量化疗治疗恶性淋巴瘤的疗效明显优于常规化疗且安全性高值得推广。

简介：目的检测组织相容性白细胞抗原G（HLA-G）在结肠癌外周血单个核细胞（PBMC）中的表达并探讨其临床应用价值.方法采用实时荧光定量PCR相对定量检测结肠癌患者、结肠良性病变患者和健康对照外周血单个核细胞HLA-GmRNA的表达.结果外周血单个核细胞HLA-GmRNA在结肠癌、结肠良性病变和健康对照中的相对表达量95%可信区间（CI）分别为[1.15,2.68]、[0.56,1.51]和[0.66,1.41].结肠癌患者外周血单个核细胞HLA-GmRNA的表达高于结肠良性病变（P=0.02）和健康对照（P=0.03）.结论结肠癌患者外周血单个核细胞HLA-G与结肠癌发生密切相关,在结肠癌早期诊断中具有重要作用.

简介：目的应用免疫磁珠阴性富集技术结合荧光细胞化学染色方法，检测肺癌患者外周静脉血中循环肿瘤细胞（CTC）的敏感性及特异性；分析肺癌患者CTC水平与临床疗效的相关性。方法2007年7月～2008年4月在北京协和医院呼吸内科肺癌中心诊断的144例肺癌患者作为研究对象，并设健康对照组35例、良性肺疾病组28例。采集上述各组静脉血标本，应用免疫磁珠阴性富集分离及免疫荧光细胞化学染色方法检测静脉血中CK18＋／CD45-／CTC计数，凡≥1判定为阳性。随访上述52例入院化疗患者治疗后CTC，与其临床疗效、生存进行相关性分析。结果健康和良性肺疾病组CTC检测阳性分别为2例（5．71％）及1例（3．57％），肺癌组未接受抗肿瘤治疗前CTC的阳性率64．5％（93／144）。其中ⅢA、ⅢB及Ⅳ期分别为32．0％、56．8％及78．0％。腺癌、鳞癌、小细胞癌CTC阳性率分别为66．7％、70％及62％。52例肺癌患者进行每周期化疗后CTC检测，疗前CTC阳性率69．2％（36／52），3个周期化疗后下降至6．5％（3／46），显示CTC与疗效相关。结论本检测方法简便，敏感性为93．1％，特异性为72．8％；CTC阳性率与疾病分期、吸烟、疗效及转移相关，CTC水平越高可能提示预后不良。

简介：目的探讨恶性淋巴瘤患者T淋巴细胞亚群的变化特点。方法采用流式细胞术检测24例各型恶性淋巴瘤患者及20例正常人的外周血中T淋巴细胞（CD3＋细胞）、辅助性T细胞（CD4＋）、抑制性细胞毒T细胞（CD3＋／CD8＋）、NK细胞（CD3-／CD16＋56）和NKT细胞（CD3＋／CD16＋56），对两者百分比进行比较分析。结果患者组中辅助性T细胞（CD3＋／CIM＋／CD8-）的百分比和绝对值明显低于正常对照组（P〈0．01），而患者组中CIM／CD8细胞亦明显低于正常对照组（P〈0．01）。结论在恶性淋巴瘤发生发展的过程中了解淋巴细胞亚群的变化，可为后期病情判断及可能采取的相关治疗提供依据。

简介：目的对比研究肝癌患者和正常人外周血树突状细胞（Dc）的诱导及其功能异同，探讨能否从肝癌患者外周血诱导出功能正常、具有抗肿瘤作用的DC疫苗。方法取肝癌患者和正常人外周血分离DC前体细胞，应用rhGM—CSF、rhIL-4及肝癌细胞抗原诱导DC。观察DC生长过程的形态学变化，以流式细胞术检测DC表面分子；EUSA法检测DC培养上清中IL-12水平；3H—TdR掺入法检测肝癌细胞抗原致敏DC刺激T细胞增殖的能力；乳酸脱氢酶4小时释放法检测肝癌细胞抗原致敏DC诱导的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的杀瘤活性。结果从肝癌患者和正常人外周血DC前体细胞诱导的DC具有相似的生长过程和细胞形态及功能，其表面分子HLA—DR、CD1a、CD83、CD80、CD86、ICAM-1的表达水平、DC培养上清中IL-12水平、DC刺激T细胞增殖的能力以及所诱生的CTL杀瘤活性等方面比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论可从肝癌患者外周血诱导出功能正常并具有抗肿瘤作用的DC瘤苗，为以DC基础的肝癌的免疫治疗提供实验依据。

简介：目的：观察肝病患者PBMC中CD3+、CD4+、CD8+、CDl6+56+细胞亚群变化研究其在肝脏损伤中的意义。方法：流式细胞仪检测肝病患者PBMC中CD3+、CD4+、CD8+、CDl6+56广卜细胞亚群变化。结果：肝病患者除重型肝炎CD3+下降外，其他急慢性肝病组CD3+稍有上升。重型肝炎、慢乙肝活动期和急性肝炎CD4+下降而慢乙肝静止期、失代偿期肝硬化、恶性肿瘤CD4+下降不明显，而代偿期肝硬化CD4+反而上升。除肝硬化CD8+下降外，其他肝病组则上升。肝病CD4+／CD8+变化与CD4+相类似。除重型肝炎和慢乙肝CDl6+56+变化不明显，失代偿期肝硬化、急性肝炎、代偿期肝硬化和恶性肿瘤CDl6广卜56+下降。相关分析发现，肝病患者CDl6+56+与CD3+和CD4+／CD8+负相关，仅CD8+与急、慢性肝损伤指标有关。结论：PBMC中CD3+、CD4+、CD8+、CDl6+56+细胞亚群的检测在肝病的诊治应用意义有限，不宜仅单凭CD4+、CDl6+56+和CD4+／CD8+上升与否和CD8+下降与否来评判疾病和治疗效果，进一步结合其他亚群标志物可能更有利于疾病机制研制了解和疾病的诊断及治疗效果的评定。

简介：结直肠癌（Colorectalcancer,CRC）是结直肠黏膜上皮在多种致癌因素作用下发生的恶性肿瘤,发病率位居常见恶性肿瘤第3位,预后差,病死率较高。早期CRC的五年生存率可达90%,而晚期CRC则降为5%。因此,早诊断、早治疗是防治CRC的关键,可显著降低其死亡率~（[1-3]）。理想的CRC筛查方法应具备精确、方便、无创、便宜、快速等特点。

简介：目的检测肺癌患者外周血液树突状细胞和淋巴细胞亚群的数量并分析其临床意义。方法流式细胞术检测34例肺癌患者外周血CD123＋、CD11c＋的树突状细胞（dendriticcell,DC）和淋巴细胞亚群的数量及所占比例,并与28名健康志愿者作对照。结果与健康对照组比较,肺癌患者CD123＋DC的绝对数和比值下降,但差异无统计学意义（P〉0.05）,而CD11c＋DC的绝对数和比值均显著下降（P均〈0.05）。两组的B淋巴细胞绝对数比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但肺癌患者外周血T、Th、Ts、NK细胞的绝对数均较健康对照组低,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论肺癌患者外周血液树突状细胞和淋巴细胞亚群普遍发生改变,肺癌患者外周血T、Th、Ts、NK细胞数值下降的同时CD11c＋DC数值也下降,对其进行检测可为肺癌治疗方案的制定及预后判断提供一定参考。

简介：目的探讨乳腺癌骨转移与外周血循环肿瘤细胞(CTC)上皮-间充质转化(EMT)表型的关系。方法回顾性分析270例乳腺癌患者的临床资料。随访2年,根据随访期间是否发生骨转移将患者分为骨转移组(n=30)和无骨转移组(n=240)。于术前采集两组患者的外周血样本,采用免疫磁珠阴性富集法捕获外周血CTC,采用流式细胞仪对CTC和CTCEMT表型进行鉴定;比较两组患者的CTC检出情况,分析乳腺癌患者发生骨转移的影响因素及CTCEMT表型分子标志物TWIST和vimentin蛋白表达的相关性。结果骨转移组中CTC的检出率明显高于无骨转移组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。单因素分析结果显示,骨转移组与无骨转移组患者的年龄、分化程度、淋巴结转移情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);骨转移组与无骨转移组患者的肿瘤部位、组织学类型、TNM分期比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示,TWIST阳性表达、vimentin阳性表达和淋巴结转移是乳腺癌患者发生骨转移的独立危险因素(P﹤0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,骨转移组中TWIST和vimentin蛋白的表达呈正相关(r=0.715,P﹤0.05)。结论术前乳腺癌外周血CTCEMT表型分子标志物TWIST和vimentin的阳性表达与乳腺癌患者术后发生骨转移有关,对乳腺癌骨转移的早期预测具有一定的临床意义。

简介：目的探讨丝裂霉素联合吉西他滨对原发性肝癌患者外周血淋巴细胞亚群及NK细胞水平的影响.方法选择原发性肝癌患者96例,按照分层随机分组法分为对照组（n=48）和试验组（n=48）,对照组予以吉西他滨治疗,试验组予以丝裂霉素联合吉西他滨治疗,比较治疗后两组的淋巴细胞亚群及NK细胞水平、临床疗效、不良反应.结果治疗后,两组患者的淋巴细胞亚群（CD4＋、CD4＋/CD8＋）及NK细胞水平均升高,试验组高于对照组（P﹤0.05）;试验组治疗有效率高于对照组（P﹤0.05）;两组总不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P﹥0.05）.结论对原发性肝癌患者行丝裂霉素联合吉西他滨治疗能够有效调节外周血淋巴细胞亚群及NK细胞水平,缓解免疫抑制状态.

简介：目的：本研究应用流式细胞术检测恶性黑色素瘤患者外周血CD8~＋T细胞中T细胞免疫球蛋白及黏蛋白-3（Tim-3）的表达情况,探讨Tim-3在恶性黑色素瘤进展中的作用。方法：应用流式细胞仪检测42例恶性黑色素瘤患者及38例健康体检者外周血CD8~＋T细胞上Tim-3的表达,同时分析其与恶性黑色素瘤患者临床病理特征的关系。结果：Tim-3在恶性黑色素瘤患者及健康体检者外周血CD8＋T细胞中均有不同程度的表达,恶性黑色素瘤组Tim-3表达量为（15.89±6.49）%,健康对照组的表达量为（3.27±2.16）%,差异具有统计学意义（P〈0.01）。Tim-3在CD8~＋T细胞中的表达水平与恶性黑色素瘤患者有无溃疡、淋巴结转移、临床分期、远处转移有关（P〈0.01）,而与性别、年龄、Breslow分度无关（P〉0.05）。结论：Tim-3在恶性黑色素瘤患者外周血CD8~＋T细胞上高水平表达,其表达水平与临床分期呈正相关,并有望成为恶性黑色素瘤早期预测及治疗的重要靶标。

简介：目的建立联合应用免疫磁化分选技术和实时荧光定量RT-PCR检测循环肿瘤细胞的方法,并探讨定量检测结直肠癌患者外周血肿瘤细胞的临床意义.方法体外培养结肠癌HCT-116细胞,与5ml健康人外周静脉血混合,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞.分离后的标本分为免疫磁珠富集组(A组)和非富集组(B组),比较实时荧光定量RT-PCR方法检测其中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达水平.抽取22例初治的结直肠癌患者和22例健康人外周静脉血,标本分为免疫磁珠富集组(C组)和非富集组(D组),健康者标本设为E组,比较三组hTERT-mRNA的表达水平,并探究与临床病理参数的关系.结果A组hTERT-mRNA表达水平显著高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).22例结直肠癌患者中,C组hTERT-mRNA表达水平显著高于D组(P＜0.05).结直肠癌患者C组hTERT-mRNA表达水平显著高于健康对照E组(P＜0.05).结直肠癌患者hTERT-mRNA表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、部位和肿瘤浸润深度无显著相关(P＞0.05),与患者淋巴结有无转移和TNM分期呈显著相关(P＜0.05).结论联合应用免疫磁化分选技术和RT-PCR的检测方法,通过测定hTERT-mRNA表达水平可定量检测外周血肿瘤细胞,检测灵敏度优于单纯RT-PCR检测方法.结直肠癌患者外周血hTERT-mRNA的表达水平与淋巴结转移和TNM分期显著相关.

简介：目的研究三维适形放疗(3D-CRT)与调强放疗对局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者疗效及血清血管内皮生长因子(VEGF)、外周血免疫因子的影响。方法回顾性分析88例局部晚期NSCLC患者的病历资料,根据放疗方法不同将患者分为A组(n=44)与B组(n=44)。A组患者行3D-CRT(3~5野),总照射剂量为66Gy;B组患者行静态调强放疗(5野),总照射剂量为60Gy。两组患者均于放疗前行紫杉醇联合卡铂方案化疗。观察并比较两组患者的临床疗效及治疗期间不良反应发生情况,并对两组患者治疗前后血清VEGF亚型水平及外周血免疫因子水平进行比较。结果两组患者的疾病控制率和客观有效率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。治疗后180天,两组患者的血清VEGFA、VEGFB、VEGFC水平和外周血CD3^+CD8^+T细胞水平均较本组治疗前降低,外周血CD3^+CD4^+T细胞、CD4^+/CD8^+T细胞水平均较本组治疗前升高(P﹤0.05)。治疗后180天,两组患者的血清VEGF亚型(VEGFA、VEGFB、VEGFC)水平和外周血免疫因子(CD3^+CD4^+T细胞、CD3^+CD8^+T细胞、CD4^+/CD8^+T细胞)水平比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。治疗期间,A组患者放射性食管炎和放射性肺炎的发生率均高于B组(P﹤0.05)。结论3D-CRT(66Gy)与调强放疗(60Gy)均可有效改善局部晚期NSCLC患者的免疫功能,降低血清VEGF水平,且疗效显著,但调强放疗放射总剂量少,不良反应小,更具有临床应用价值。