简介：【目的】研究人锌指蛋白新基因ZNF580过表达对人脐静脉内皮细胞株EA.hy926血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）的表达及增殖能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】重组质粒pEGFP-ZNF580经LipofectamineTM2000脂质体转染法转染EA.hy926细胞,48h后荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在内皮细胞中的表达情况;应用半定量RT-PCR、Westernblotting及ELISE法检测转染前后内皮细胞ZNF580和VEGFmRNA、蛋白表达的变化;运用MTT实验检测转染前后内皮细胞增殖能力的改变。【结果】荧光显微镜下示融合蛋白ZNF580-EGFP在EA.hy926细胞核中表达;ZNF580基因过表达后,内皮细胞VEGFmRNA及蛋白的表达均上调（P〈0.05）,且其增殖能力显著升高（P〈0.01）。【结论】ZNF580可以调控EA.hy926细胞VEGF的表达,且ZNF580在内皮细胞增殖过程中具有重要的调节作用。

简介：摘要降钙素基因相关肽是调节心血管活动的重要神经递质之一，本文主要对降钙素基因相关肽的生理作用以及不同运动形式对它产生的影响进行归纳总结,为今后进一步研究提供研究依据。

简介：【摘要】目的：探讨COMTval158met基因多态性给产妇分娩镇痛带来的影响。方法：按照随机纳入的方式选择我院于2019.01-2020.01期间所收治的100例产妇作为研究对象，对100例产妇实施基因分型，按照基因分型分为A组（A/A型）和B组（G/G）。对比两组患者在分娩镇痛后10分钟（T1）、30分钟（T2）、胎儿娩出后（T3）、胎盘娩出后（T4）四个阶段VAS评分。结果：A组产妇疼痛评分在各个阶段均高于B组，P<0.05。结论：

简介：目的观察FOXO3a三倍突变体（FOXO3a-TM）基因体内局部转染对大鼠血管损伤后新生内膜增生的抑制作用。方法实验建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,在建立模型基础上,随机分成空白对照组、质粒对照组和FOXO3a-TM组。损伤术后,分别将PBS、脂质体Lipofectamine2000介导pECE（-）和pECE-HA-FOXO3a-TM体内转染至以上三组大鼠损伤血管壁。转染3d后培养并鉴定损伤局部平滑肌细胞,并以West-ernblotting法检测各组损伤及转染后血管平滑肌细胞中标记蛋白HA以及FOXO3a总蛋白的表达,以证实HA-FOXO3a-TM的有效表达,同时观察转染后不同时期新生内膜增生的影响。结果三组颈总动脉血管平滑肌细胞均有FOXO3a表达,其中FOXO3a-TM组表达HA,空白对照组、质粒对照组不表达,证实HA-FOXO3a-TM的有效表达。以上三组大鼠转染后1和3个月,FOXO3a-TM组内膜/中膜面积比值比空白对照组、质粒对照组显著降低（P〈0.01）。结论FOXO3a-TM基因体内转染损伤后血管可以增加活性转录因子FOXO3a表达,抑制血管新生内膜增生,减少再狭窄发生率。

简介：Puma为一种凋亡调控因子。本研究探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者p53上调pumamRNA的表达情况，并探索其在评估CLL预后中的意义。采用基于SYBRGreenI荧光染料法的实时定量逆转录PCR（qRT—PCR）方法检测100例CLL患者及11名健康对照者外周血标本中puma基因的表达，以β-actin为内参照，用2（-△Ct）方法计算puma的相对定量值，组间分析采用秩和检验。结果显示，qRT—PCR标准曲线的R^2均≥0．990，批内差及批间差变异系数（CV）均小于5％，灵敏度可达10^2copies／μgRNA。100例CLL患者puma基因表达水平中位数为1．038×10^-3（4．106×10^-4-2．806×10^-3）；11名健康对照者puma表达水平中位数为1．220×10^-3（7．233×10^-4-1．405×10^-3），二者无显著性差异（U=544．5，P=0．957）。临床分期较早（Binet分期A期）的患者puma表达水平明显高于临床分期较晚（Binet分期B期、C期）的患者（p〈0．001）；具有CD38表达阳性、ZAP-70蛋白表达阳性、血清乳酸脱氢酶水平增高、血清β2-微球蛋白水平增高的患者，其puma基因表达水平均明显低于无以上不良预后因素的患者，差异显著（P值分别为0．002，0．012，0．009和0．046）；FISH检测显示存在12号染色体三体和14q32易位的患者puma表达水平明显低于无以上分子遗传学异常者，其差异显著（P值分别为0．003和0．045）。结论：qRT-PCR方法检测puma表达灵敏可靠，puma表达水平与CLL多种预后因素存在相关性，在评估CLL预后中具有重要价值。

简介：目的探讨乳腺癌组织中乳腺癌转移抑制基因（BRMSl）蛋白和尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）表达及其临床意义。方法采用免疫组化（Envision二步法）检测90例乳腺癌组织和30例癌旁组织中BRMSl、uPA的蛋白表达情况，并结合临床病理特征分析其临床意义。结果乳腺癌组织中BRMSl和uPA的阳性表达率分别为45．56％和60．00％，乳腺癌旁正常乳腺组织中BRMSl和uPA的阳性表达率分别为93．33％和20．00％，两组比较．差异均有统计学意义（X^2分别=21．02、14．40，P均〈0．05）；常规苏木精一伊红染色和免疫组化染色显示，BRMSl蛋白表达于细胞核和细胞质内，uPA蛋白阳性表达主要定位于肿瘤细胞胞质。阳性细胞染色呈棕黄色细颗粒状。BRMSl蛋白和uPA表达在TNM分期中I期和Ⅱ期乳腺癌中的表达阳性率明显高于Ⅲ期者，差异有统计学意义（X^2分别=5．64、6．13、9．46、36．75，P〈0．05）；BRMSl和uPA表达在乳腺癌淋巴结转移之间比较，差异均有统计学意义（X^2分别=9．64、36．75，P均〈0．05）；spearman相关性分析显示，在乳腺癌组织中，BRMSl蛋白表达与uPA＆明显负相关（r=一0．75，P〈0．05）。结论BRMSl与uPA的异常表达可能参与了乳腺癌的浸润转移，两者在转移的信号转导中可能有一定的相关性。

简介：目的探讨乳腺癌细胞ret基因转录水平的表达及其与PI3KAktmTOR信号通路相关因子的关系。方法以乳腺癌细胞为研究对象,采用荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测细胞中RET、PI3K、mTOR和AKTmRNA表达量,构建合成retshRNA慢病毒载体,转染乳腺癌细胞,再次采用RT-PCR检测细胞中RET、PI3K、mTOR和AKTmRNA表达量。比较转染前后细胞中RET、PI3K、mTOR和AKTmRNA表达量,并采用Pearson线性相关分析法分析其细胞中RETmRNA表达量与其PI3K、mTOR和AKTmRNA表达量的关系。结果转染前细胞中RET、PI3K、mTOR和AKTmRNA表达量分别为0.851±0.126、0.872±0.126、0.845±0.087和0.769±0.355,均分别高于转染后的0.108±0.023、0.113±0.022、0.098±0.022和0.072±0.013（P〈0.05）。Pearson线性相关分析结果显示,细胞中RETmRNA表达量与其PI3K、mTOR和AKTmRNA表达量均呈正相关（r=0.877、0.852、0.863,P〈0.05）。结论乳腺癌细胞ret基因转录水平较高且与PI3KAktmTOR信号通路相关因子密切相关,可能通过调控PI3KAktmTOR信号通路而影响乳腺癌的发生发展,可能作为乳腺癌治疗的靶基因之一。

简介：目的　观察深Ⅱ度烧伤创面愈合前及愈合后增生性瘢痕组织中微管失稳剂oncoprotein18stathmin(Op18)基因的表达。　方法　提取临床深Ⅱ度烧伤愈合前与愈合后不同时期增生性瘢痕中的总RNA,以GADPH基因表达为内参照,采用逆转录酶多聚酶链式反应(RTPCR)方法,半定量检测上述基因表达水平。　结果　与正常组织比较,伤口愈合前Op18基因表达显著降低(P<0.05),愈合后表达迅速增高(P<0.05),在4～32个月增生性瘢痕中Op18基因稳定高表达。　结论　在伤后早期Op18基因的表达水平降低与细胞增殖、组织修复的需要相适应,在增生性瘢痕组织中通过Op18基因高表达来抑制瘢痕增生

简介：本研究旨在检测RHBDD1（Rhomboiddomaincontaining1）基因在慢性髓系白血病（CML）患者骨髓细胞中的表达水平并初步探讨其临床意义。采用实时定量PCR的方法检测RHBDD1在正常人和CML患者骨髓单个核细胞中的相对表达水平。结果表明，CML患者RHBDD1的表达水平明显高于正常人；BCR／ABLp210表达阴性的患者RHBDD1的表达水平显著高于BCR／ABLp210阳性的患者；≥50岁的患者RHBDD1表达水平低于〈50岁的患者；RHBDD1的表达水平与患者的性别无明显相关性。结论：RHBDD1基因可能参与了CML的发生与发展，尤其在BCR／ABLp210阴性患者的发病中可能发挥重要作用。

简介：目的观察Nbn基因神经特异性敲除小鼠海马齿状回发育的形态学变化，探讨Nbn基因在小鼠海马齿状回发育中的作用。方法采用成熟神经元标记物NeuN，应用免疫组织化学技术结合体视学方法对生后（P）7、14、21天的神经特畀性敲除小鼠海马齿状回的发育进行系统观察，并对齿状回各层截面积等参数进行测量，以非基因敲除小鼠为对照组。结果与对照组相比，P7—21天基因敲除小鼠海马齿状回发育明显延缓，分子层、颗粒细胞层及多形层的截面积均减小（P〈0．05）；颗粒细胞层阳性细胞面数密度也均明显减少（P〈0．05）；多形层阳性细胞面数密度P21天仍较高（P〈0．05）。结论Nbn基因神经特异性敲除小鼠海马齿状回发育明显延缓，提示Nbn基因可能是海马齿状回发育中的重要基因。

简介：目的构建RhoA—siRNA表达载体，研究其对肝癌HepG2细胞肿瘤生物学行为的影响。方法利用pGenesil-1质粒构建RhoA—siRNA表达载体，以脂质体法转染至肝癌HepG2细胞中建立稳定细胞系，并分为3组。转染pGenesil-1-RhoA—siRNA载体者为HepG2／RhoA—siRNA组，转染随机对照载体者为HepG2／control组，未转染的肝癌HepG2细胞作为HepG2组。Westernblot检测RhoA—siRNA对其蛋白表达的抑制情况。分别采用MTT法、细胞划痕损伤和平板克隆形成实验检测转染细胞的增殖、迁移和生长潜能，流式细胞仪检测细胞周期变化。采用单因素方差分析、）f2检验比较各组差异。结果3组细胞蛋白表达水平比较，HepG2／RhoA—siRNA组RhoA蛋白的表达明显下凋（F=178．19，P〈0．05）。HepG2／control组和HepG2组细胞划痕损伤在48h内愈合，而HepG2／RhoA—siRNA组则不能愈合。HepG2／RhoA—siRNA组克隆形成率低于HepG2组和HepG2／control组，分别为39％±3％、67％±5％、70％±6％，其差异有统计学意义（x^2=33．34，38．69，P〈0．05）。RhoA基因沉默显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖，细胞周期中G0／G1期细胞数量增多而S期细胞数量减少（F=70．46，76．57，P〈0．05）。结论RhoA—siRNA表达载体能抑制肝癌HepG2细胞的增殖和迁移，可为肝癌的基因治疗提供新的方法。

简介：目的：研究Wip1对肝癌细胞生物学活性的影响。方法：设计并合成能沉默Wip1基因的siRNA质粒,通过脂质体介导转染肝癌HepG2细胞,并分为实验组和空白对照组。用Westernblot和qRT-PCR检测转染后细胞内Wip1基因的表达水平,CCK-8检测HepG2细胞增殖,用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力的改变。结果：将沉默Wip1基因的质粒导入肝癌HepG2细胞后,与空白对照组相比,Wip1的蛋白和mRNA表达水平明显降低（P〈0.05）;CCK-8检测结果显示转染后第4天细胞增殖能力较空白对照组降低（P〈0.05）,转染后第5天细胞增殖能力较空白对照组明显降低（P〈0.01）;实验组迁移及侵袭细胞数均少于空白对照组（P〈0.05）。结论：靶向设计的siRNA能有效降低Wip1蛋白和mRNA的表达水平,抑制HepG2细胞的增殖并降低细胞的迁移及侵袭力。

简介：摘要：目的探究 LＲ P1基因对食管癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过已构建的 amiＲ NA载体靶向沉默 LＲ P1基因，用脂质体 2000转染人食管癌细胞系 EC－ 109，实验分为 3组 (转染空载体 CtrlLＲ P1组、 LＲ P1amiＲ NA－ 3组、转染 LＲ P1amiＲ NA－ 3干扰载体组 )。应用Ｒ eal－ TimePCＲ和免疫组化实验分别检测 LＲ P1mＲ NA和蛋白的相对表达量，应用流式细胞技术检测人食管癌 EC－ 109细胞的凋亡率。结果人食管癌 EC－ 109细胞转染 LＲ P1amiＲ NA－ 3干扰载体后， mＲ NA和蛋白水平均被有效抑制， LＲ P1mＲ NA和蛋白表达水平均下降 ;LＲ P1amiＲ NA－ 3组细胞增殖水平低于转染空载体 CtrlLＲ P1组 (P＜ 0.05)。转染 LＲ P1amiＲ NA－ 3干扰载体对食管癌细胞产生了凋亡效应，且 48h左右凋亡作用达高峰。结论靶向抑制 EC－ 109人食管癌细胞中 LＲ P1基因的表达可显著抑制细胞的增殖，促进细胞的凋亡，进而影响细胞的生物学行为。

简介：有研究证实,白细胞介素12（IL-12）可以增强自然杀伤细胞的细胞毒性,还可以促进细胞毒T细胞对原代白血病细胞及白血病细胞株的细胞毒反应.此外,Wilms癌基因WT1mRNA作为微小残留病变的标志已被广泛用于监测急性白血病（AL）和骨髓增生异常综合征（MDS）的疗效.为了研究IL-12能否降低AL和MDS患者外周血单个核细胞WT1基因的表达,分别收集了30例恶性血液病患者和5例健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMNC）进行体外培养,在培养体系中加入IL-12.培养前和培养后第3天,用竞争性RT-PCR方法分别测定各标本中WT1mRNA的表达量.结果显示,在6例慢性粒细胞性白血病患者,WT1mRNA由104.8降至104.2拷贝/微克总RNA;在12例MDS患者,WT1mRNA由105.4降至104.8拷贝/微克总RNA;在5例完全缓解期AL患者,WT1mRNA由105.0降至104.2拷贝/微克总RNA;但在7例未缓解的AL患者,WT1mRNA的表达无变化.结论：IL-12可以显著降低大部分恶性血液病患者WT1mRNA的表达水平,IL-12有望用于去除恶性血液病患者体内的微小残留病变.

简介：【目的】通过研究牛磺酸对急性重型颅脑创伤（traumaticbraininjury,TBI）小鼠海马胶质纤维酸性蛋白（glialfibrillaryacidicprotein,GFAP）和牛磺酸转运体（taurinetransporter,TauT）表达的影响探讨牛磺酸对颅脑机械损伤的治疗作用。【方法】选择BALB/C小鼠18只,随机分为假手术组（Sham组）、脑创伤组（TBI组）、牛磺酸治疗组（Tau组）,每组6只。采用液压打击法在小鼠左侧大脑半球制作TBI模型,Sham组只在相同位置开骨窗,不予打击。Sham组、Tau组造模后立刻尾静脉注射牛磺酸（10mg/kg）,TBI组给予相同剂量的无菌生理盐水。脑创伤后24、48h分别进行免疫组化染色检测伤侧海马TauT和GFAP蛋白表达。【结果】（1）TBI组在脑损伤后24h较Sham组伤侧海马TauT表达明显下降（P〈0.01）,与TBI组相比,Tau组小鼠TauT表达明显增加（P〈0.01）。伤后48h,TBI组较Sham组伤侧海马TauT表达下降更加明显（P〈0.01）,Tau组较TBI组表达上升趋势显著（P〈0.01）。（2）伤后24h,与Sham组相比,TBI组小鼠GFAP表达明显增加（P〈0.01）;与TBI组相比,Tau组小鼠GFAP表达无显著差异（P=0.198）。伤后48h,TBI组较Sham组小鼠伤侧GFAP增加趋势更加明显（P〈0.01）;与TBI组相比,Tau组小鼠GFAP表达明显下降（P〈0.01）。【结论】牛磺酸通过上调急性重型脑损伤小鼠脑部海马区牛磺酸转运体、抑制胶质纤维酸性蛋白表达,发挥其对神经组织创伤的治疗作用。

简介：摘要肾素-血管紧张素系统(RAS)由一系列酶、激素及其受体组成，在动脉粥样硬化（AS）发生发展过程中起重要作用。肾素（Renin）可特异性催化血管紧张素原转化为血管紧张素I，后者再转化为血管紧张素II（AII），从而激活RAS。RAS的激活可导致血管内皮功能减退，炎症反应加剧，AS斑块不稳定，促进AS病变的演进发展。Renin作为AII上游的RAS成员，在心脑血管遗传学研究中越来越受到重视，因此本实验在前期构建了人Renin基因腺相关病毒表达载体的基础上，通过体外细胞实验，进一步探究Renin基因高表达对AS中RAS系统及相关炎症因子表达的影响，为AS的治疗提供新的靶标和思路。

简介：[摘要] 目的：在基因建档中检出DYS449基因座多带型。方法：提取送检样本DNA，经两种扩增试剂盒检测及DNA测序分析。结果：送检样本在DYS449基因座检测出双等位、三等位基因分型，阴阳性对照分型结果准确。结论:多拷贝RM Y-STR基因座异常分型发生率较高，在法医学的实际应用中应予以注意。

简介：<正>目的:染色质交互蛋白乙酰化对基因表达调控十分重要。异常的基因表观遗传修饰可引起多种肿瘤抑制基因失活。人们试图通过调节染色质结构使失活的抑癌基因重新激活来促进抗癌药物的发展。研究表明组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以

简介：

简介：摘要目的实时荧光定量PCR检测多发性骨髓瘤患者WT1和MDR1基因的表达水平，并探讨其临床意义。方法构建实时荧光定量PCR检测WT1和MDR1基因表达水平技术，检测30例不同分期多发性骨髓瘤患者血清WT1和MDR1表达水平，并对其表达量进行统计学分析。结果多发性骨髓瘤患者WT1和MDR1表达显著高于对照组（P<0.05），且两者与患者分期显著相关，其中，WT1基因在Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅱ期比较中具有显著性差异（P<0.05），MDR1基因在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期两两比较中均具有显著性差异（P<0.05）。另外，WT1和MDR1基因表达水平呈现相关性（P=0.008），且两者均与β2-微球蛋白水平呈正相关，P值分别为0.006和0.034。结论WT1和MDR1基因表达水平可以作为多发性骨髓瘤患者疾病进程的检测指标。