简介:目的:探讨脐血间充质干细胞对急性髓细胞白血病细胞株HL-60、急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat的增殖和凋亡的影响以及CXCL12/CXCR4信号轴的作用。方法:将HL-60细胞株、Jurkat细胞株分别与人脐血间充质干细胞(HUCMSC)建立共培养模型,并加用G-CSF、AMD3100单药或联合处理共培养模型。采用CCK-8法检测细胞活力,用Annexin-V/PI试剂盒检测细胞凋亡和细胞周期,流式细胞术和蛋白印迹法分别检测白血病细胞膜表面CXCR4蛋白及总CXCR4蛋白表达情况。结果:与HUCMSC共培养后HL-60细胞和Jurkat细胞增殖活力降低,凋亡减少,二者G_0/G_1期细胞增多;而加入G-CSF和AMD3100可进一步降低与HUCMSC共培养体系中的HL-60和Jurkat的细胞活力,破坏HUCMSC对HL-60和Jurkat细胞的抑凋亡作用,使2种细胞G_0/G_1期细胞比例减少,且2药联合时作用更明显。G-CSF可同时降低白血病细胞膜表面CXCR4蛋白和细胞质内总CXCR4蛋白的表达,而AMD3100只能降低白血病细胞膜表面CXCR4表达,对细胞质内总CXCR4蛋白表达无影响。结论:HUCMSC可抑制急性白血病细胞增殖及凋亡,使G_0/G_1期细胞增多;而AMD3100通过降低白血病细胞膜的CXCR4表达、G-CSF通过同时降低胞质总CXCR4蛋白和胞膜CXCR4蛋白表达来阻断CXCL12/CXCR4信号轴,减弱白血病细胞与微环境之间的联系,在HUCMSC抑制白血病细胞生长增殖、促进凋亡的基础上,进一步减弱其细胞活力,促进其凋亡,降低白血病细胞G_0/G_1期细胞比例,CXCL12/CXCR4信号轴在HUCMSC抑制白血病细胞凋亡中起重要作用。
简介:目的观察人骨髓间充质干细胞(Humanbonemarrowmesenchymalstromalcells,hBMSCs)与脐静脉内皮细胞(Humanumbilicalveinendothelialcells,hUVECs)体外共培养对hBMSCs成骨作用及hUVECs成血管功能的影响。方法分离鉴定hBMSCs和hUVECs,将hBMSCs及hUVECs按1∶1比例直接共培养,倒置相差显微镜观察细胞的生长特性和细胞相容性,Matrigel实验观察共培养对hUVECs体外血管形成能力的影响。将hBMSCs成骨诱导7d后,茜素红染色观察共培养对其成骨分化能力的影响。结果hBMSCs与hUVECs体外共培养细胞相容性良好,Matrigel实验显示共培养组形成的毛细血管状结构较单一细胞组多。成骨诱导的hBMSCs中,共培养组茜素红染色阳性,单一细胞组茜素红染色阴性。结论hBMSCs与hUVECs具有良好的细胞相容性,在共培养体系中,未诱导的hBMSCs能促进形成毛细血管状结构,已成骨诱导的hBMSCs成骨矿化能力增强。
简介:摘要目的研究分析急性牙髓炎一次性根充治疗的临床效果。方法选取我院2016年11月至2017年11月期间收治的急性牙髓炎患者80例,按照抽签的方法将其随机分成研究组和对照组,每组患者均40例。研究组患者予以一次性根充方法进行治疗,对照组患者予以传统根充方法进行治疗,观察两组患者的相关临床指标变化情况。结果对两组患者予以不同的方法进行治疗,研究组患者临床治疗成功率97.5%明显优于对照组患者临床治疗成功率70.0%,同时研究组患者术后反应痛发生率10.0%明显低于对照组患者术后反应痛发生率32.5%,数据比较,差异显著,具有统计学意义(P<0.05)结论对急性牙髓炎患者应用一次性根充方法进行治疗,能够提高患者的临床治疗总有效率,降低患者术后疼痛几率,具有较大的临床推广应用价值。
简介:【目的】通过transwell趋化实验,观察经慢病毒转染后过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(humanumbilicalcordmesenchymalstemcells,HUMSCs)是否具有更好的迁移作用。【方法】通过组织贴壁法,分离和培养来源于人脐带华通胶组织中的MSCs。经慢病毒转染,将CXCR4目的基因转染至第3代HUMSCs,并进行免疫荧光、westernblotting检测在HUMSCs中表达CXCR4基因的情况。通过transwell小室进行HUMSCs的趋化迁移试验检测,观察转染CXCR4基因后的HUMSCs迁移能力是否增强。【结果】自脐带分离培养的HUMSCs通过慢病毒转染后,可过表达CXCR4基因。Transwell试验发现,过表达CXCR4的HUMSCs较正常HUMSCs和未转染目的基因的HUMSCs,迁移的细胞数明显增加(P〈0.05)。【结论】通过慢病毒转染过表达CXCR4的HUMSCs,其趋化、迁移能力明显增强。
简介:摘要目的观察脐带间充质干细胞联合骨髓干细胞治疗失代偿期肝硬化临床疗效。方法选取我院2012年3月~2015年3月收治的120例失代偿期肝硬化患者作为研究对象,随机分成对照组(60例)和观察组(60例)。予以对照组失代偿期肝硬化患者内科综合治疗,予以观察组失代偿期肝硬化患者“内科综合治疗+脐带间充质干细胞联合骨髓干细胞治疗”。结果观察组和对照组失代偿期肝硬化患者治疗后的各项肝功能指标、凝血酶原时间、Child评分、MELD评分及1年后生存率比较均无显著差异(p>0.05);均未发生与干细胞治疗相关的不良反应。结论脐带间充质干细胞联合骨髓干细胞治疗失代偿期肝硬化患者的临床疗效确切,无严重并发症,安全可靠。
简介:本研究探讨多药耐药(mdr1)基因体外转染人骨髓间充质干细胞(BMMSC)以应用于基因治疗的可行性、安全性。体外分离、培养、鉴定MSC;采用具有高效转染非分裂期细胞的慢病毒载体(1entiviralvector,LV)系统将mdr1基因导入BMMSC中;采用RT—PCR和GFP荧光技术检测目的基因的表达,台盼蓝染色及MTT法检测转染后细胞的增殖能力。结果表明:慢病毒感染MSC的感染复数(multiplicityofinfection,MOI)为10,最佳感染率可达80%;Msc表面低表达CD34、HLA—DR、CD31、CD45,高表达CD44、CDl05、CD90、CDl3;GFP荧光表达自72小时开始出现,以后逐渐增强;转染细胞中显示目的基因mRNA的表达;转染对MSC存活及增殖几乎无影响(P〉0.05)。结论:慢病毒载体可成功转染人骨髓间充质干细胞并使其mdrl表达增高,转染对MSC存活及增殖基本无影响。
简介:摘要:经过该技术扩增的间充质干细胞仍保留间充质干细胞表面标志物以及成脂、成骨和成软骨分化的多向分化潜能。移植人脐带间充质干细胞可以促进小鼠背部皮肤创面愈合。此项技术的建立为干细胞生物学和再生医学研究和应用提供了充足的具有可比性的种子细胞来源。本次对人脐带间充质干细胞来源的外泌体在皮肤老化方面的作用策略进行综述。
简介:摘要:膝关节骨性关节炎(KOA)是一种常见的退行性关节疾病,是以膝关节软骨退行性变为主要特征,可引起关节疼痛、肿胀、畸形和功能障碍,严重影响患者生活质量。目前针对 KOA的治疗方法主要包括药物治疗和手术治疗两大类。药物治疗包括非甾体类抗炎药(NSAIDs)、关节腔内注射透明质酸钠、氨糖等,手术治疗包括人工关节置换术、膝关节镜微创手术等。干细胞是一类具有自我更新、多向分化潜能的细胞,可通过分泌细胞因子促进受损组织的修复,因此干细胞被认为是一种有前景的新型细胞移植替代疗法。间充质干细胞(MSCs)具有来源广泛、无免疫排斥等特点,已被广泛应用于临床研究,并取得了良好的疗效。
简介:摘要目的探讨体位干预和胶体预充在腰硬联合阻滞下剖宫产术中预防仰卧位低血压的效果。方法选取2017年07月至2017年12月在我院行剖宫产手术的产妇152例,随机分为4组,即常规组(A组)、体位干预组(B组)、胶体预充组(C组)及体位干预联合胶体预充组(D组),每组38例。记录各组麻醉前(t0)、麻醉后即刻(t1)、麻醉后5min(t2)、麻醉后10min(t3)、麻醉后15min(t4)、胎儿娩出时(t5)的血流动力学(包括平均动脉压(MAP)、心率(HR)及血氧饱和度(SpO2))变化、新生儿Apgar评分、低血压发生率及手术过程中产妇恶心呕吐。结果A、B、C组MAP在t2时间点均下降(p<0.05),且明显低于D组;各组间新生儿Apgar评分无明显差异(p>0.05);手术过程中D组产妇恶心呕吐发生率(5.26%)与低血压发生率(7.89%)均低于A、B、C三组,其比较差异有统计学意义(p<0.05)。结论体位干预和胶体预充联合可显著降低剖宫产术中仰卧位低血压的发生率,是临床上值得推荐的一种方法。
简介:目的探讨超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)标记滑膜间充质干细胞(SMSC)的可行性及标记前后细胞生物学特性的变化。方法将体外分离培养、纯化及鉴定后的兔膝关节SMSC加入不同浓度的SPIO标记液在37℃二氧化碳培养箱孵育,24h后普鲁士蓝染色和透射电镜下观察标记情况,并比较标记前后SMSC的细胞活性及细胞增殖能力情况。结果SPIO标记后SMSC经普鲁士蓝染色细胞质内可见蓝染颗粒,细胞标记率均达95%以上,且随着标记浓度的增高,细胞质蓝染铁颗粒增多,颜色加深。透射电镜下观察,细胞质及吞饮小泡内可见大量高电子致密度颗粒,呈阳性。在标记液浓度为(12.5~50)μg/ml时,标记后的细胞增殖能力与细胞活力与标记前比较无明显差别;当标记液浓度为100μg/ml以上时,细胞增殖能力与细胞活力受到抑制。结论根据初步研究,一定浓度范围的SPIO标记兔SMSC是安全可行的,为解决SMSC在关节内的示踪问题具有重要意义。
简介:[摘要 ] 目的 总结 10kg以下简单先心病直视手术中体外循环 (ECC)预充的管理经验。方法 回顾自 2015年 1月至 2017年 6月 88例简单先心病患儿在体外循环下行心脏直视手术 ,术前均使用进口中空纤维膜式氧合器、宁波菲拉尔婴幼儿血液微栓过滤器、天津塑料研究所婴儿 B管道、意大利血液过滤器 HEMOFILTERS( BLS803),预充液:乳酸林格氏液、悬浮红细胞(库血)、 20%人血白蛋白、 20%甘露醇、 5%碳酸氢钠。常规洗涤库血。术中常规超滤。结果 ECC时间 20-126min,主动脉阻断时间 8-110min( 2例未阻断),心脏自动复跳 84例,电除颤心脏复跳 2例,未阻断 2例,术中转流平稳,均顺利停机,所有患儿均恢复良好顺利出院。结论 合理的预充及血液稀释和超滤技术的应用对婴幼儿 体外循环直视手术转流有着重要意义和保障。使转流早期平稳过度,提高了体外循环转流整体过程管理的效果。减少了体外循环转流给患者带来的并发症,增加了患儿术后顺利恢复。
简介:目的:研究悬浮培养的小鼠骨间充质干细胞(MSC)对T细胞的调节作用及其机制。方法:采用低吸附细胞培养皿培养小鼠骨悬浮MSC,采用贴附细胞培养板培养小鼠贴壁MSC。在光学显微镜下观察悬浮MSC的形态并进行成骨和成脂肪诱导分化。应用以流式细胞术检测悬浮MSC的免疫表型。收获悬浮MSC和贴壁MSC的培养上清,采用流式细胞术检测和CFSE法比较悬浮MSC抑制T细胞增殖的能力。采用定量PCR分析不同培养上清对T细胞表达的免疫因子的影响。采用定量PCR检测悬浮MSC表达的免疫调节因子。结果:悬浮培养的小鼠骨MSC呈现为悬浮球状,具有成骨和成脂肪分化能力。流式细胞术检测结果表明,悬浮MSC高表达CD29、CD44、Sca-1和CD105,低表达CD11b、CD45、CD31和Ia。CFSE法结果提示,悬浮MSC培养上清能够抑制T细胞增殖。定量PCR检测结果表明,悬浮MSC上清能够抑制T细胞表达干扰素γ和白介素17A的表达。进一步分析发现,相对于贴壁MSC,悬浮MSC表达的白介素6和转化生长因子β1的水平较高。结论:悬浮法培养获得的MSC能够抑制T细胞增殖,其对T细胞调节作用与贴壁MSC不同。
简介:背景:脐带间充质干细胞可分化成胰岛β细胞用于移植治疗1型糖尿病,但需要进一步提高疗效,并研究其免疫调节机制。目的:观察3D培养的脐带间充质干细胞移植对1型糖尿病小鼠的疗效及免疫调节机制。方法:组织贴壁法分离脐带间充质干细胞并进行3D培养,扫描电镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物;采用链脲佐菌素诱导1型糖尿病小鼠模型,2D干细胞移植组和3D干细胞移植组于造模7d后尾静脉注射脐带间充质干细胞(5×106/只),对照组和模型组小鼠注射等体积生理盐水。移植后每周检测各组小鼠空腹血糖,连续4周;移植后30d,制备小鼠单个脾细胞悬液,流式细胞术检测T细胞亚群变化;移植后30d,ELISA试剂盒检测各组小鼠血清中细胞因子白细胞介素4,白细胞介素10,白细胞介素2,γ-干扰素水平。结果与结论:①3D培养体系下脐带间充质干细胞生长良好,高表达细胞表面标志物CD44,CD73、CD90和CD105;②细胞移植2-4周后,小鼠血糖水平显著下降,与模型组相比差异有显著性意义(P<0.05);3D干细胞移植组血糖水平低于2D干细胞移植组,第4周差异有显著性意义(P<0.05);③与模型组相比,干细胞移植组Th1细胞百分比下降,Th2细胞与Treg细胞百分比显著升高(P<0.01);与2D干细胞移植组相比,3D干细胞移植组Th1细胞亚群百分比降低,Th2细胞亚群和Treg细胞百分比升高(P<0.05);④与模型组相比,干细胞移植组白细胞介素2和γ-干扰素水平降低,而白细胞介素4和白细胞介素10水平明显升高;与2D干细胞移植组相比,3D干细胞移植组白细胞介素2水平降低,白细胞介素4和白细胞介素10水平升高(P<0.05);⑤结果表明,3D培养的脐带间充质干细胞移植治疗1型糖尿病小鼠效果优于2D培养的脐带间充质干细胞,其机制可能与上调调节性T细胞,维护体内Th1/T
简介:目的:研究骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSC)成脂分化过程中转录因子SREBP-1对SIRT1的调控作用。方法:通过油红O染色鉴定BMMSC成脂分化;RT-PCR检测AP2、LPL、SREBF-1和SIRT1的mRNA转录水平;Western-blot检测SREBP-1表达水平;染色质免疫沉淀技术验证SREBP-1与SIRT1启动子之间的结合情况。结果:成脂诱导培养液中的BMMSC14d后被诱导成为成熟的脂肪细胞;RT-PCR显示AP2、LPL和SREBF-1、SIRT1在BMMSC成脂分化过程中表达上调;SREBP-1的蛋白水平也明显高表达;SREBP-1抗体免疫沉淀的基因组DNA成功扩增出SIRT1基因条带。结论:在BMMSC成脂分化过程中,SREBP-1能与SIRT1启动子区域特异性结合,可能参与SIRT1表达的调控。
简介:【摘要】目的 本文研究 两种根充糊剂在慢性牙髓炎治疗中的临床疗效。 方法 研究时间选择: 2018 年 7 月到 2020 年 6 月 之间。研究 对象 纳入 我院 诊治 的 74 例 慢性牙髓炎患者。根据患者使用 根充糊剂的不同进行分组。 每组 患者数量均 为 37 例。 对照组 采用 氧化锌碘仿糊剂 。研究组患者使用 Cortisomol 糊剂 。 最后 在治疗前后采集 两组患者的 疼痛情况 以及治疗效果等 数据 。 结果 在治疗前所有患者的疼痛感评分无统计学差异,在治疗后研究组患者的疼痛感评分明显低于对照组,数据 差异存在 统计学意义 ( P<0.05) 。 研究组患者治疗有效率: 36 例( 97.30% )。对照组患者治疗有效率: 33 例( 89.19% )。可以看出研究组患者治疗效果高于对照组,但 数据 差异不存在 统计学意义 (P> 0.05) 。 结论 在为慢性牙髓炎患者进行治疗的过程中, Cortisomol 糊剂与 氧化锌碘仿糊剂都具有良好的治疗效果,而 通过使用 Cortisomol 糊剂可以有效降低患者的疼痛感,应当在实际的临床治疗中进行推广。
简介:目的观察骨关节炎(OA)患者膝关节滑膜来源的间充质干细胞(SMSCs)多向分化能力以及免疫抑制能力。方法无菌环境下通过关节镜取出中山大学孙逸仙纪念医院10例OA患者膝关节滑膜组织,分离培养出SMSCs,采用CCK-8法检测细胞增殖能力,通过成骨、成软骨和成脂肪诱导分化培养基对SMSCs诱导分化,于诱导第21天分别行茜素红、甲苯胺蓝和油红O染色。将SMSCs和CD3、CD28抗体刺激后的人外周血单核细胞(PBMC)进行共培养,通过流式细胞术对PBMC的增殖率进行检测,组间比较通过方差分析总体差异后再通过Bonferroni法进行组间两两比较。结果OA患者SMSCs第3天开始进入对数增长期,第7天细胞增殖进入平台期。SMSCs经过成骨、成软骨和成脂肪诱导分化后,茜素红、甲苯胺蓝和油红O染色均为阳性。SMSCs和CD3、CD28抗体刺激后的PBMC进行共培养5d后,阴性对照组PBMC增殖率为(3.8±0.4)%,几乎不增殖,阳性对照组PBMC增殖率为(80.9±8.1)%,实验组PBMC的增殖率为(52.3±5.1)%,实验组与阳性对照组的差异具有统计学意义(t=8.97,P〈0.01)。结论OA患者SMSCs同样具有多向分化能力和免疫抑制能力,可作为组织工程理想的种子细胞来源。