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  • 简介:InDel在基因分布密度仅次于SNP,可作为动植物群体遗传分析、分子辅助育种等研究领域有效分子标记。花生是世界范围内重要油料作物之一。目前,花生栽培种全基因已经公布,为准确挖掘花生基因信息提供了重要参考。本研究通过169份花生核心种质GBS(Genotyping-by-sequencing)测序和比对,共获得大小分布在1~14bp范围内10401个InDels。染色体Arahy.16上分布InDels最多,达741个;而在染色体Arahy.08上分布最少,有263个。参考基因注释信息,仅有1167个InDels分布在功能基因相关区域。经GO注释,InDel分子功能主要包括催化活性(catalyticactivity)和结合(binding);生物过程主要涉及代谢过程(metabolicprocess)、单组织过程(single-organismprocess)和细胞过程(cellularprocess)。经KEGG通路分析发现,InDels所在基因区域功能主要与代谢相关。本研究开发出全基因水平InDel标记,并做了相应功能分类和注释,为进一步分子验证和利用提供丰富基因资源。

  • 标签: InDels检测 InDels分布 功能分析
  • 简介:目的:筛选豚鼠基因多态性微卫星标记,为豚鼠遗传质量控制及基因定位等工作奠定基础。方法采用磁珠富集法和豚鼠基因数据库筛选法获取微卫星位点序列,通过分析和初步筛选,挑选部分候选位点,根据其序列设计引物,对5种不同来源豚鼠基因DNA标本进行PCR扩增,以期获得多态性分子标记。结果本实验采用磁珠富集法共获得微卫星序列304个,设计引物125对,最终获得多态性位点1个,暂未发现多态性特异性位点17个;用数据库筛选法共获得微卫星序列292个,设计并合成相应引物178对,最终发现多态性位点25个,暂未发现多态性特异性位点28个。结论本实验获得26个多态性微卫星标记,45个潜在候选标记,为微卫星标记在豚鼠遗传质量监测及突变基因定位等工作应用奠定了基础。

  • 标签: 豚鼠 微卫星 多态性标记 筛选
  • 简介:目的应用转录技术,对UVA照射后白念珠菌菌丝及生物膜进行基因表达分析.方法体外构建白念珠菌(ATCC90028)生物膜,采用UVA-LED抗菌设备(复旦大学光电所制,波长365nm,强度13mW/cm2,频率100Hz),照射白念珠菌生物膜5min、10min、15min,对照不光照.用转录技术分析UVA实验和对照之间差异表达基因,进行GO、KEGG遗传差异富集分析.结果UVA光照相对于对照有大量差异表达基因,核糖体合成RIO2基因、氨基糖和核苷糖代谢相关基因MCR1、CBR1、内质网蛋白加工途径相关基因SHP1显著上调;RNA降解途径相关基因MPP6和细胞内吞作用相关基因CHMP6显著下调.结论UVA直接或间接调节白念珠菌菌丝及生物膜相关生理代谢途径,参与诱发细胞凋亡过程.

  • 标签: 白念珠菌 UVA RNA-seq测序 差异表达基因
  • 简介:mirVanaqRT-PCRmiRNA检测试剂盒扩增特定小RNA,可以精确定量小RNA表达水平。这个测定系统还可以通过传统RT-PCR或实时RT-PCR使用SYBRGreen1描述小RNA表达特征。引物也几乎涵盖人、大鼠、小鼠微小RNA。另外,引物特别含有小RNA-U6snRNA和5srRNA,它们可以控制输入变异性和样本标准化。

  • 标签: 小RNA 检测试剂盒 测定系统 引物 RT-PCR SNRNA
  • 简介:本研究采用高通量测序技术对淀粉积累高峰期锥栗种仁进行转录测序分析,对得到Unigene进行功能注释、分类及代谢通路分析,并进一步通过实时定量PCR方法分析了7个与淀粉和蔗糖代谢相关酶基因在锥栗种仁发育过程中表达特征。结果显示:denovo组装后共获得53629条Unigene序列,序列平均长度为746bp;通过与其他核酸、蛋白质数据库Blast搜索比对,共26739条Unigene序列获得基因注释,占All-Unigene49.86%;与COG数据库比对后将其注释14413条Unigene序列划分成25类;GO功能注释33926条Unigene基因共分成细胞组分、分子功能和生物过程3大类58个分支;与KEGG数据库比对结果注释5277条Unigene序列划分为116条代谢通路;7个与淀粉和蔗糖代谢相关酶基因表达量变化趋势中,CH.29636(淀粉合成酶,SS),CH.11971(淀粉分支酶,SBE)两个基因随着种仁发育呈现逐渐上升趋势,而其余5个基因(CH.31302、CH.33690、CH.19238、CH.30128、CH.13088)表达量随着种仁发育呈先上升后下降趋势,该结果与锥栗种仁发育期淀粉和蔗糖变化规律一致。这些信息为锥栗果实品质形成相关功能基因研究提供了重要依据。

  • 标签: 锥栗 RNA-SEQ 种仁 实时荧光定量PCR 淀粉 蔗糖
  • 简介:本文主要探讨了基质种类、光照强度、空气湿度和炼苗时间对移栽成活率影响,旨在建立大花、重瓣型非洲紫罗兰培苗稳定移栽技术体系。结果表明:移栽基质最佳配比为泥炭土︰糠壳灰︰珍珠岩=1︰2︰1;适宜光照强度为移栽后选用2层遮阴网,移栽成活率最高;空气湿度控制在70%~90%,培苗生长旺盛;将培苗在室外炼苗处理7d再进行移栽,成活率最高,达95%。

  • 标签: 大花、重瓣型非洲紫罗兰 组培苗 移栽
  • 简介:基因芯片又称DNA微阵列,分为cDNA微阵列和寡聚核苷酸微阵列.DNA微阵列技术是探索基两功能一种强有力工具.扼要介绍基因芯片、表达谱芯片技术和原理,以及基因芯片技术在肿瘤基因学中应用。

  • 标签: 基因芯片 DNA微阵列 表达谱芯片 肿瘤基因组学
  • 简介:就DNA序列信息本身讲,它几乎不能给我们提供特定基因功能的确定信息.基因功能研究包括一个给定基因在什么地方、什么时候表达以及基因实际上是做什么.因为这不可避免地涉及到许多基因产物同时相互作用和影响,所以功能研究是很复杂.

  • 标签: 人类基因组计划 基因治疗 基因型 治疗方法 遗传变异力 等位基因
  • 简介:目的从DNA水平分析比较两个地区东方田鼠分子遗传特征,探讨以RAPD标记鉴别两个地区东方田鼠。方法筛选6条10bp随机引物对洞庭湖和青铜峡地区东方田鼠基因进行了随机扩增多态DNA(RAPD)分析,并对这两个地区东方田鼠基因DNA进行了比较。结果①两个地区东方田鼠所有受试个体中共有的片段数为20条,这是两个地区东方田鼠共性所在;②两个地区东方田鼠各有其特异性扩增片段;③引物S17和S80可作为鉴别两个地区东方田鼠特异性引物;④不同地区东方田鼠其不同个体之间共享度较低,且存在较大差异;两个地区东方田鼠遗传背景均呈非均一性。结论运用RAPD方法可以作为鉴别不同地区东方田鼠基因多态性标记。

  • 标签: 东方田鼠 鉴别 地区 基因多态性 基因组 特异性引物
  • 简介:以我国14种重要十字花科蔬菜为材料,利用流式细胞术测定基因含量。其中青苤蓝、乌塌菜、雪里蕻、芥蓝基因含量属首次报道。本试验数据与国外文献提供相关数据对比,发现青萝卜、结球甘蓝、青花菜和根用芥菜基因含量与已报道数值基本吻合,而大白菜、花椰菜基因含量值与报道数据存在差异。造成同一物种基因含量值差异原因可能是品种不同,也可能与生长环境或测定时参考标准选用等因素不同有关。

  • 标签: 十字花科蔬菜 流式细胞术 基因组含量 遗传变异
  • 简介:T-DNA插入突变在植物功能基因学研究中发挥着重要作用,广泛应用于大规模植物基因功能分析,是分离新基因、研究基因功能有效工具。我们简单介绍了T-DNA插入突变原理,详细论述了3种T-DNA插入突变载体应用,并综述了利用T-DNA插入突变克隆新基因方法,同时指出了T-DNA插入突变存在问题及其发展方向。

  • 标签: T-DNA 插入突变 植物 功能基因组学
  • 简介:目的:以转坛£抗虫基因白桦不同月份叶片为实验材料,揭示基因DNA甲基化水平与植物叶片发育及外源基因表达水平之间相关性。方法:应用DNA-MSAP方法检测叶片基因DNACCGG位点甲基化状态,利用Northern杂交技术分析其外源基因表达水平。结果:转基因白桦叶片基因DNA同年5~9月总甲基化水平分别为21.95%、29.62%、25.41%、41.39%和47.24%,除7月份稍有波动外,整体呈现随着叶片成熟和衰老渐升高趋势;全部扩增位点中,半、全甲基化位点比例分别为17.99%和15.19%,在各月份叶片中变化较大,其中半甲基化位点比例分别为10.37%、19.14%、14.92%、17.2%和28.83%,全甲基化位点比例依次为11.58%、10.49%、10.50%、24.11%和18.40%。同一无性系外源基因在当年5~7月表达量最高,8~9月呈下降趋势,与基因甲基化状态呈负相关趋势。结论:转基因白桦叶片成熟和衰老及外源基因表达量降低均可能与基因DNA甲基化水平升高相关。

  • 标签: 转基因白桦 基因组 甲基化 甲基化敏感扩增多态性
  • 简介:目的:利用液相色谱串联质谱和非标定量技术,研究里氏木霉中磷酸化蛋白在不同培养条件下表达差异,以期获得与纤维素酶表达调控相关磷酸化蛋白。方法:分别在阻遏条件、诱导条件和中性条件下培养里氏木霉,提取胞内总蛋白,进行酶切和非标记定量分析。结果:对比诱导条件与阻遏条件、诱导条件与中性条件、阻遏条件与中性条件下培养里氏木霉胞内蛋白表达量差异,分别发现差异蛋白90、61和90个。根据其功能,可将这些差异蛋白归为四类,即锌指蛋白、ATP结合蛋白、具有N-乙酰化转移酶活性蛋白以及具有氧化还原酶活性蛋白。它们主要参与糖酵解、蛋白质合成、DNA修复以及转录调节过程。结论:发现这些差异蛋白为研究调控纤维素酶表达调控提供了新线索。

  • 标签: 里氏木霉 磷酸化蛋白组学 液相色谱串联质谱 非标记定量 纤维素酶
  • 简介:蛋白质新技术为我们研究细胞内信号转导过程提供了更广泛和崭新思路,它克服了传统技术局限性,实现了对蛋白高通量分析。简要综述了蛋白质学技术在信号转导过程中信号分子的确定、定量,磷酸化等翻译后修饰识别,以及蛋白质之间相互作用研究等方面的应用。

  • 标签: 蛋白质组学 信号转导
  • 简介:由中国、英国和美国科学家组成“国际协作”,22日在深圳、伦敦和华豆顿同时宣布:国际“千人基因计划”正式启动。这一宏伟计划将测定选自全世界各地至少一千个人类个体全基因DNA序列,绘制迄今为止最详尽、最有医学应用价值的人类基因遗传多态性图谱。

  • 标签: 基因组计划 国际协作 科学家 人类基因组 DNA序列 遗传多态性
  • 简介:记录了采自长春地区白粉菌属叉丝壳(Erysiphesect.Microsphaera)吉林省新记录变种2个:万布白粉菌原变种(E.vanbruntianavar.vanbruntiana)和车轴草白粉菌原变种(E.trifoliivar.trifolii),其寄主东北接骨木(SambucusmanshuricaKitag.)和海滨米口袋(GueldenstaedtiamaritimaMaxim.)为世界新寄主,根据标本对其进行了详细形态描述、显微照相和分析讨论。

  • 标签: 万布白粉菌原变种 车轴草白粉菌原变种 东北接骨木 海滨米口袋
  • 简介:简述了蛋白质概念、内容和意义,重点综述了现代质谱技术在蛋白质学中应用,主要包括蛋白质和肽段鉴定和定量、蛋白质翻译后修饰鉴定和蛋白质间相互作用检测等.随着新高质量精确度、分辨率、灵敏度和通量质谱仪出现,现代质谱技术在蛋白质学中应用将越来越广泛,并给蛋白质学研究带来新机遇.

  • 标签: 蛋白质组 蛋白质组学 生物质谱
  • 简介:目的Tg2576转基因小鼠与阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)患者病理改变相近,本文动态研究了Tg2576小鼠在AD发病不同阶段血清代谢物特征,为临床AD早期诊断提供代谢依据。方法收集Tg2576小鼠在AD发病初期(6个月)和末期(12个月)时血清样本,采集样本1HNMR谱并运用多变量分析方法进行代谢特征分析。结果结果显示Tg2576与C57小鼠分别在6和12个月时血清代谢特征有明显差异,且不同AD发病阶段Tg2576小鼠具有明显代谢差异。与C57小鼠相比,在AD出现初期阶段,Tg2576小鼠血清中乳酸、肌醇和氨基酸(如亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸)含量升高,而脂质、胆碱、磷脂酰胆碱/甘油磷脂酰胆碱、甜菜碱、甘氨酸和葡萄糖含量降低;在AD发病末期,血清中乳酸、肌醇和丙氨酸含量继续上升,脂质、胆碱、磷脂酰胆碱/甘油磷脂酰胆碱、甜菜碱和甘氨酸含量持续降低,同时谷氨酸和肌酸含量初步显示出下降趋势。通过比较AD初期和末期血清代谢物,我们能够发现疾病末期血清中乳酸、肌醇和丙氨酸含量升高,脂质、胆碱、磷脂酰胆碱、甘油磷脂酰胆碱含量降低。在这些代谢物中,乳酸、脂质、胆碱、磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰胆碱在AD发生初期已具有显著性变化,且与AD发生严重程度密切相关。结论结果表明Tg2576小鼠中乳酸与阿尔茨海默病程度加重呈正相关变化,而脂质、胆碱、磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰胆碱呈负相关改变,且这些代谢物随着疾病发展呈动态进行性变化,可能是AD早期诊断重要代谢标志物。

  • 标签: 阿尔茨海默病 Tg2576小鼠 核磁共振氢谱 代谢组学