简介：目的：分析同源异型盒基因B7（HomeoboxB7，HOXB7）在人胃癌组织中的表达情况，并探讨HOXB7的表达与胃癌患者临床病理特征和预后的关系。方法：收集行手术切除的胃癌组织及对应癌旁组织共120例，采用实时定量PCR（qRT—PCR）技术、蛋白印迹（Westernblot）和免疫组化染色分别检测HOXB7mRNA水平及蛋白水平在胃癌及对应癌旁组织中的表达，通过卡方检验分析HOXB7表达水平与胃癌患者临床病理因素间的相关性，采用单因素及多因素Cox回归模型评估HOXB7在胃癌风险评估中的作用，Kaplan-Meier生存曲线分析HOXB7表达水平与胃癌患者无瘤生存期和总生存期的关系。结果：胃癌组织中HOXB7mRNA和蛋白表达水平均显著高于对应癌旁组织（P〈0．05）；HOXB7蛋白表达与肿瘤临床分期、浸润深度及淋巴结转移均具有显著相关性（P〈0．05），而与患者性别、年龄、分化程度及远处转移均无显著相关性（P〉0．05）。单因素和多因素Cox分析提示HOXB7可以作为评估胃癌患者预后的独立风险因素。Kaplan-Meier生存分析结果显示高表达HOXB7的胃癌患者无瘤生存时间和总生存时间均显著低于HOXB7低表达患者组（P〈0．01）。结论：HOXB7蛋白在胃癌组织中高表达，并与胃癌的恶性表型有关，可能参与胃癌发生及恶性进展过程，可作为判断胃癌患预后的重要参考指标。

简介：目的构建稳定过表达的miR-31转基因小鼠,检测其主要组织器官中miR-31的表达变化情况并对在体miR-31过表达的应用提供合格的工具鼠。方法使用Gatewaycloning技术构建miR-31过表达载体,使用DNA显微注射技术将构建好的载体注入受精卵内,随后转移至假孕母鼠内,待其自然生产。将新生小鼠提取尾部DNA,PCR及琼脂糖凝胶电泳鉴定miR-31过表达阳性小鼠,筛选阳性小鼠并饲养繁殖。另取阳性小鼠,提取主要组织器官的miRNA并使用RT-PCR检测其miR-31的表达量。同时对比阳性小鼠和野生型小鼠神经系统中Nestin的表达和神经干细胞的数量。结果成功构建了miR-31过表达转基因小鼠,并在屏障环境下饲养繁殖至14代以上。各主要组织器官miR-31的表达均升高且稳定表达。阳性小鼠Nestin的表达和神经干细胞数量均高于野生型小鼠。结论通过使用Gatewaycloning技术成功构建了miR-31过表达转基因小鼠,且在各代小鼠中miR-31的表达稳定,神经系统内的神经干细胞数量多于野生型小鼠,可为进一步研究miR-31过表达后在体内的功能和神经系统疾病的治疗提供良好的工具小鼠。

简介：目的：探讨微小核糖核酸145（microRNA-145）表达对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法：实验室常规培养宫颈癌Hela细胞并分为4组，空白（Blank）组（Hela细胞＋lipMI1640）、microRNA-145组（Hela细胞＋RPMI1640＋microRNA-145-5pmimics）、阴性序列（NC）组（Hela细胞＋RPMI1640＋NC）、Mock组（Hela细胞＋RPMI1640＋Lipofectamine2000），记录各组Hela细胞转染率，采用实时荧光定量聚合酶链锁反应（QRT-PCR）检测各组Hela细胞中microRNA-145的表达水平，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测Hela细胞增殖情况，采用4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色法判断Hela细胞凋亡情况。结果：本研究中，各组Hela细胞转染率均〉80％；microRNA-145组microRNA-145的表达显著高于Blank组、NC组和Mock组，差异有统计学意义（P〈0．05）。转染24h、48h、72h后，microRNA-145组490nm波长处的光密度值（OD490值）较转染Oh后明显降低，转染48h、72h后，Blank组、NC组、Mock组OD490值较转染0h后时明显升高，转染24h、48h、72h后．microRNA-145组OD490值均低于Blank组、NC组、Mock组，差异有统计学意义（P〈0．05）。DAPI染色后，microRNA-145组Hela细胞凋亡率高于Blank组、NC组、Mock组，差异有统计学意义（P〈0．05）。转染后，Blank组、NC组、Mock纽的microRNA-145表达率、OD490值、DAPI染色后Hela细胞凋亡率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：microRNA-145表达上调可抑制宫颈癌Hela细胞增殖，并促进Hela细胞凋亡，通过药物调控microRNA-145表达有望成为宫颈癌治疗的新靶点。

简介：【目的】松墨天牛是松树的重要蛀干害虫，也是林业重大外来人侵种松材线虫的媒介昆虫。虽然松墨天牛和松材线虫互作的化学生态和分子进化机制受到人们的广泛关注，但miRNA等表观遗传因子在天牛一线虫互作中的作用未见报道。【方法】使用illuminaHiSeq2000平台进行miRNA高通量测序，得到4个携带线虫的天牛miRNA库和4个未携带线虫的天牛miRNA库。此外，对鉴定出的miRNA进行了差异表达分析，并对这些miRNA的靶基因进行了GO注释和KEGG通路富集分析。【结果】在携带线虫的天牛表皮、脂肪体、中肠和气管样本中分别鉴定出780、802、617和762个miRNA;在未携带松材线虫的天牛的不同组织样本中分别鉴定出784、723、713和837个miRNA。在携带松材线虫的松墨天牛中，某些已知miRNA表达量会显著升高，如miR-14、miR279和miR-312等。差异表达miRNA的功能大多指向代谢、免疫等方面。【结论】miRNA在松墨天牛和松材线虫互作中起着重要的调控作用。

简介：目的研究体外培养的牛子宫上皮细胞内整合素αvβ3基因诱导差异表达的变化,以期为探究牛子宫容受态的标志蛋白提供参考。方法运用RT-PCR方法分析不同浓度雌激素、孕激素以及雌、孕激素协同作用对牛子宫内膜上皮细胞中整合素αvβ3的诱导表达变化情况。结果单独添加孕激素10^-7mg/mL时,整合素αvβ3表达量均最高,10^-7mg/mL组内αv和β3的表达量均显著高于对照组（P〈0.05）。单独添加雌激素10^-10mg/mL组,αv的表达量最高,而β3的表达量最低。协同添加雌、孕激素组中,整合素αvβ3的表达量均高于对照组,其中αv的表达量显著高于对照组（P〈0.05）;β3的表达量与对照组相比差异不显著（P〉0.05）。结论单独添加孕激素和协同使用雌、孕激素时,均可以促进牛子宫内膜上皮细胞中整合素αvβ3的mRNA表达量上升;单独添加雌激素的作用则与之相反。由此,整合素αvβ3在＂种植窗＂期的牛子宫内膜上皮中可作为一个潜在的子宫容受态参考标志基因。

简介：在对长尖叶蔷薇和大花香水月季转录组测序的基础上,利用生物信息学方法,从其转录组数据中共获得23条MLOunigenes并对其进行了分析。结果显示它们之间的氨基酸数量、碱基数、分子量差异较小,多数为疏水性蛋白,平均亲水系数为-0.157-0.190,富含亮氨酸和丝氨酸。亚细胞定位主要分布于质膜中,包含5-9个跨膜结构;二级结构主要由α-螺旋组成。其中,等电点小于7的仅有1条,2条蛋白具有信号肽。这23条MLO蛋白具有15个长度在15-50个氨基酸间的保守基序。它们的系统进化关系分析结果揭示了MLO基因在长尖叶蔷薇与大花香水月季间具有较高的同源性和保守性。将这23条unigenes与来自于月季和拟南芥的MLO基因进行聚类分析,确定了6条可能参与抗白粉病的候选基因,对这6条候选基因进一步分析发现仅有2条unigenes符合MLO型白粉病基因的典型结构特征。最后,通过qRT-PCR试验验证,结果表明：这2条候选基因的相对表达量,在受到白粉病菌侵染后呈积极上调趋势。上述研究结果表明这2条候选基因很可能参与了寄主—白粉病菌的互作过程。

简介：【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(CsCAD1)的基础上,明确CsCAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆CsCAD1基因片段,将构建的pET-28a-(+)-CsCAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用westernblot和ligandblot技术分析其与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21中表达一个约44ku的蛋白,原核表达载体构建成功。SDS-PAGE显示该蛋白条带单一,且纯度较好。Ni柱亲和层析纯化该目的蛋白后进行Ligandblot分析,结果显示CsCAD1重组蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合。【结论】CsCAD1蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合,是潜在的Cry蛋白受体,所得结果有助于阐明Cry1Ac和Cry2Aa蛋白对二化螟的作用机制。

简介：目的：探讨寻常型银屑病患者血清白介素17（IL-17）、白介素18（IL-18）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达及与病情严重程度的相关性。方法：选取2015年8月到2017年4月在我院接受治疗的寻常型银屑病患者86例为研究组，另选取同期在我院体检结果为健康的志愿者40例作为健康对照组，并根据临床症状和病情变化对研究组患者进行分组，其中进行期银屑病组32例，静止期银屑病组24例，退行期银屑病组30例。对比研究组和健康对照组血清中IL-17、IL-18、VEGF水平，对比不同严重程度的寻常型银屑病患者血清中IL-17、IL-18、VEGF水平和PASI评分，采用Spearman相关性分析IL-17、IL-18、VEGF的表达与PASI评分的相关性。结果：研究组患者血清中的IL-17、IL-18、VEGF水平显著高于健康对照组（P〈0．05），进行期银屑病组患者血清中IL-17、IL-18、VEGF水平和PASI评分显著高于静止期银屑病组和退行期银屑病组，静止期银屑病组患者血清中IL-17、IL-18、VEGF水平和PASI评分显著高于退行期银屑病组（P〈0．05），Spearman相关性分析结果显示，研究组患者血清中IL-17、IL-18、VEGF水平与PASI评分均呈正相关（P〈0．05）。结论：寻常型银屑病患者血清中IL-17、IL-18、VEGF水平异常升高，且其水平与病情严重程度有关，对上述三种指标进行监测有助于临床治疗寻常型银屑病。

简介：目的观察鱼腥草素钠对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织中PI3K、AKT1及mTORmRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法选取Wistar雄性大鼠24只,体重（220±20）g,随机分为正常组、模型组、地塞米松组和鱼腥草素钠组（每组6只）。采用烟熏和脂多糖气管滴注联合方法建立慢性阻塞性肺疾病（chronicobstructivepulmonarydisease,COPD）大鼠模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PI3K、AKT1及mTORmRNA表达,并观察大鼠肺组织病理变化。结果与正常组相比,模型组大鼠肺组织PI3K、AKT1mRNA表达显著增高（P〈0.01,P〈0.05）,mTORmRNA表达显著降低（P〈0.01）;与模型组相比,鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织PI3K、AKT1mRNA表达显著降低（P〈0.01,P〈0.05）,mTORmRNA表达显著增高（P〈0.01）;与地塞米松组相比,鱼腥草素钠组肺组织mTORmRNA表达显著增高（P〈0.05）。病理观察结果显示,与正常组比较,模型组局部肺实变,肺泡腔内大量中性粒细胞浸润,胶原染色显示肺间质纤维组织大量增生;鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织病理改变明显轻于模型组,鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织呈轻度间质性肺炎,仅见少量的纤维组织增生。结论鱼腥草素钠能够减轻慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织损伤,其机制可能与其能够下调PI3K、AKT1mRNA的表达、上调mTORmRNA表达有关。