简介：摘要：肠道病毒（Enterovirus，EV）可引发多种常见传染病，目前感染后尚无针对性药物，接种疫苗是预防感染的最佳方法。病毒样颗粒（Virus-like particle,VLPs）疫苗作为亚单位疫苗具有无致病性，无感染性，免疫原性强等多种优势，是目前疫苗研发的热点之一。本文肠道病毒VLPs的结构、表达方式、佐剂使用、疫苗评价所需动物模型以及新型肠道病毒疫苗等方面综述了肠道病毒VLPs疫苗的研究进展。

简介：摘要病毒样颗粒(virus-like particle，VLP)是一类不同于可溶性重组抗原的亚单位疫苗，具有较强的免疫原性。与亲本病毒一样，VLP既可以是无包膜的，也可以是带包膜的。根据VLP的复杂性，它可以在原核或真核表达系统中使用重组载体生产。到目前为止，针对各种疾病的VLP候选疫苗已经在不同的表达系统中生产出来。一些VLP已经进入临床试验阶段，少数已经获得许可和商业化。文章综述了各类VLP疫苗、各种表达系统的表达效果以及嵌合类VLP的构建及其免疫原性。

简介：摘要人轮状病毒(rotavirus，RV)是引发全球性人类非细菌性急性胃肠炎疾病的主要病原体之一，减毒活疫苗是预防RV感染的有效手段。为了提高RV疫苗的安全性，开发活病毒疫苗以外的其他形式疫苗，如灭活疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒(virus like particle，VLP)等，以避免减毒疫苗株通过回复突变恢复毒力、导致严重不良反应(如肠套叠)或造成环境污染，本文就RV VLP疫苗的研究进行综述和展望。

简介：摘要病毒样颗粒(virus-like particles，VLP)是由病毒的一个或多个结构蛋白在表达系统内重组表达，并自行组装形成不含病毒遗传物质且不能复制、不具有感染能力的病毒样蛋白颗粒。VLP因具有和天然病毒颗粒类似的空间立体结构，可通过和病毒感染一样的途径提呈给免疫细胞，有效地诱导机体产生免疫保护反应。本文就目前VLP疫苗在预防疾病方面的研究进展，以及VLP疫苗基于目的基因选择、结构确证、生产质控对免疫原性影响的研究进展进行综述。

简介：摘要目的探究以乙肝病毒样颗粒(HBc-RGD-VLPs)作为递送抗癌药物DOX载体，制备靶向纳米复合物针对乳腺癌4T1细胞的生物学影响。方法用制备的乙肝假病毒颗粒包封DOX，形成靶向纳米复合物HBc-RGD-VLPs/DOX。通过透射电镜及粒度仪检测颗粒的均一度及形态，并将其应用到4T1细胞进行体外生物活性探究。结果通过透射电镜检测靶向纳米复合物HBc-RGD-VLPs/DOX的结构完整，形态均一，为规则的球形颗粒，粒径分布为30～35 nm。体外细胞实验表明靶向载体HBc-RGD-VLPs的安全性较好，细胞存活率达到80%以上，包封后的HBc-RGD-VLPs/DOX对4T1细胞的生长有明显抑制效果，其针对4T1肿瘤细胞的半数有效浓度(IC50)为1.445μg/ml。荧光显微镜观察到HBc-RGD-VLP/DOX相对于游离DOX可特异性靶向至肿瘤细胞。结论靶向载体HBc-RGD-VLPs的安全性较好，HBc-RGD-VLPs/DOX对肿瘤细胞显示出较好的增殖抑制效果及一定的肿瘤靶向性。

简介：目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒（WNV）prM和E蛋白，形成病毒样颗粒（virus-1ikepartcles，VLPs），为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株，构建重组质粒，转染293T细胞，表达并纯化西尼罗病毒prM-E蛋白，利用透射电镜、免疫印迹试验、间接免疫荧光实验0FA）和酶链免疫吸附试验（ELISA）对表达产物进行鉴定。结果重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒（viruslikeparticlesVLPs），转染细胞上清纯化物中透射电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒，免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明，表达的病毒样颗粒蛋白能够与抗西尼罗病毒抗体特异结合，具有良好的抗原性；间接ELISA证实，重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体。结论在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性，为西尼罗病毒感染快速特异诊断试剂研制奠定了基础。

简介：摘要目的在毕赤酵母细胞中稳定表达经连接肽连接的HBsAg和水痘-带状疱疹病毒糖蛋白(glycoprotein，g)E的重组蛋白，并进行初步纯化及颗粒性验证。方法构建HBsAg-gE的四拷贝重组表达质粒，经酶切线性化后电转化至毕赤酵母KM71细胞中，甲醇诱导表达。采用免疫印迹法和ELISA检测表达的重组蛋白，经蔗糖密度梯度离心和凝胶排阻层析初步纯化后进行透射电子显微镜观察。结果HBsAg-gE四拷贝重组质粒经双酶切鉴定正确。表达的重组蛋白经免疫印迹法检测，可以与小鼠抗gE单克隆抗体及抗HBsAg多克隆抗体特异性结合，相对分子质量约90 000。经ELISA检测HBsAg呈阳性。蔗糖密度梯度离心后，重组蛋白聚集在40%至55%区带之间，在透射电子显微镜下观察到直径约20 nm左右的病毒样颗粒结构。结论成功在毕赤酵母中表达了HBsAg-gE病毒样颗粒，为在酵母系统中表达水痘-带状疱疹重组疫苗奠定了基础。

简介：摘要目的利用汉逊酵母系统重组表达人细小病毒B19(human parvovirus B19, B19V)主要衣壳蛋白VP2，并对VP2病毒样颗粒(virus-like particles, VLP)进行理化性质研究及免疫效果评价。方法重组表达B19V VP2蛋白，并使其自组装成VLP；通过高密度发酵和系列层析纯化步骤获得VP2-VLP；SDS-PAGE和凝胶过滤高效液相色谱检测蛋白质纯度，动态光散射和透射电镜观察颗粒形态，并检测VP2-VLP磷脂酶活性。采用ELISA和红细胞凝集抑制试验检测小鼠体内VP2-VLP特异性IgG抗体和中和抗体水平。结果本研究制备的重组VP2-VLP纯度大于95%，颗粒均一且形态良好，大小近似天然病毒颗粒；VLP可与特异性单克隆抗体结合，磷脂酶A2活性为阴性；吸附佐剂后的VP2-VLP能够诱导小鼠产生高滴度的特异性IgG抗体和中和抗体。结论汉逊酵母表达系统制备的B19V VP2-VLP可作为候选靶抗原用于B19V预防性疫苗的开发。

简介：摘要目的制备GII.3[P12]型人源诺如病毒(human norovirus, HuNoV)广州株GZ2013-L20的病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)和多克隆抗体，系统表征其免疫原性特征和受体结合能力，为HuNoV防控提供数据支撑。方法以GZ2013-L20毒株基因组为模板，扩增ORF2并构建重组转座载体，转化至大肠埃希菌DH10Bac获得重组杆状病毒质粒Bacmid-L20-ORF2，在昆虫细胞sf9中表达目的VLP，采用透射电镜、SDS-PAGE、Western blot(WB)和受体结合实验等方法对纯化后VLP进行鉴定。此外，将VLP免疫小鼠获得多克隆抗体，通过间接ELISA和受体结合阻断试验进行评价。结果构建了重组杆状病毒Bacmid-L20-ORF2，并成功获得目的毒株VLP；透射电镜显示颗粒直径约为30 nm；SDS-PAGE和WB结果显示蛋白相对分子质量(Mr. ×103)约58；受体结合实验表明，目的VLP与分泌型唾液受体(A型、B型、AB型和O型)、O型非分泌型唾液受体以及猪胃黏蛋白均能有效结合；VLP多克隆抗体效价达到2×105，且与20种(20/28)基因型HuNoV的衣壳蛋白具有交叉免疫反应；受体结合阻断实验显示，多克隆抗体仅对同型VLP具有中和阻断效果，而对GII.2、GII.4、GII.8和GII.17等基因型VLP没有中和作用。结论GII.3[P12]型HuNoV广州株VLP与分泌型和非分泌型唾液受体均呈现较强的结合能力，其多克隆抗体具有免疫结合广谱性，但中和阻断效果仅对同型病毒有效，其结果为疫苗研发的理性设计提供基础数据。

简介：摘要目的构建共表达P1和3CD的重组杆状病毒，利用昆虫细胞重组表达2型脊髓灰质炎病毒(poliovirus type 2，PV2)的病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)，制备PV2-VLP进行初步免疫原性研究。方法基于粉纹夜蛾细胞(High 5)密码子偏好性，将PV2的P1基因和3CD基因进行序列优化，并对P1基因进行稳定性突变，构建突变型rBac-PV2-P1s-3CD和野生型rBac-PV2-P1-3CD杆状病毒。Western blot分别检测目的蛋白表达量，离子交换层析纯化PV2-VLP，透射电镜观察VLP高级结构确定组装效率。免疫大鼠评估免疫原性。结果成功构建了可稳定表达P1s蛋白和3CD蛋白的重组杆状病毒。Western blot结果表明热稳定性突变后VLP产量相比野生型有所提高。电镜观察发现直径约30 nm的三维结构，表明VLP成功组装。动物实验结果表明，重组制备的PV2-VLP具有免疫原性，且能有效刺激产生中和抗体。结论用昆虫细胞-杆状病毒表达系统可成功制备有效的VLP类疫苗，为PV-VLP疫苗的研制提供参考。

简介：摘要目的观察健脾止泻宁颗粒对轮状病毒肠炎（湿热证）的治疗作用。方法选取轮状病毒肠炎75例，随机分为治疗组39例，对照组36例。两组均给予维持水电解质平衡等常规治疗。治疗组在常规治疗基础上给健脾止泻宁颗粒口服，对照组给蒙脱石散口服。观察两组显效率、总有效率和轮状病毒转阴率。结果治疗组总有效率92.3%，显效率76.9%，轮状病毒转阴率79.5%对照组总有效率69.4%，显效率44.4%轮状病毒转阴率47.2%。与对照组比较差异有统计学意义（P<0.01，P<0.05，P<0.01)。结论健脾止泻宁颗粒治疗轮状病毒肠炎能够缩短病程提高疗效，值得临床推广。

简介：

简介：摘要目的观察磷酸奥司他韦颗粒治疗流感样肺炎的效果。方法抽取我院在2017年2月－2018年8月收治的90例流感样肺炎患者，按照电脑排序的方式将患者分为对照组和观察组，每组45例。对照组患者采取常规治疗干预，观察组患者在对照组的基础上给予磷酸奥司他韦治疗。对两组患者的治疗效果进行观察和比较。结果观察组患者的退热时间、咳嗽消失时间、肺部啰音改善时间短于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；观察组患者的治疗总有效率显著高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论对流感样肺炎患者采取磷酸奥司他韦颗粒治疗，能够快速地改善患者的临床症状，提高其治疗效果。

简介：目的观察菌毒清颗粒的体外抗病毒作用。方法采用细胞病变的CPE法观察菌毒清颗粒在体外对呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒的抑制作用,采用实时荧光定量PCR法观察菌毒清颗粒对EB病毒BcLF和BARF1基因表达的抑制作用。结果菌毒清颗粒对呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒所致CPE均有明显的抑制作用,对EB病毒的BcLF和BARF1基因表达具有明显的抑制作用。结论菌毒清颗粒能在体外抑制呼吸道病毒、肠道病毒和疱疹科病毒。

简介：目的:为其临床合理应用提供实验依据.方法:采用体内外实验研究抗菌和抗病毒作用.结果:清热痰咳颗粒剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、人葡萄球菌、表皮葡萄球菌、洋葱假单孢杆菌等临床致病菌有较强的抑菌作用(MIC为0.0125g/m1),996g/kg剂量组对金黄色葡萄球菌感染小鼠有明显的保护作用(P＜0.05),16.6g/kg、49.8g/kg和99.6g/kg剂量组时流感病毒感染小鼠死亡均有显著保护作用(P＜0.05,P＜O.01).

简介：摘要目的观察板蓝根颗粒对不同急性病毒性咽炎的治疗效果。方法对110例确诊的急性病毒性咽炎患者给予板蓝根颗粒冲剂治疗，2包/次，2次/天，连续服用5天，结果板蓝根颗粒对呼吸道合胞病毒治疗有效率为85.71%，呼吸道腺病毒治疗有效率为97.37%，鼻病毒、副流感病毒、偏肺病毒的治疗有效率达100%；其中鼻病毒与呼吸道合胞病毒组在总有效率方面差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论板蓝根颗粒治疗不同病毒性咽炎总体效果好，值得在临床上应用。

简介：摘要目的观察稳心颗粒治疗小儿病毒性心肌炎的临床疗效，探讨该药对小儿病毒性心肌炎的治疗效果和安全性。方法选择病毒性心肌炎并室性96例，随机分为观察组和对照组，两组基础治疗相同，观察组口服稳心颗粒，对照组传统治疗方法。结果稳心颗粒组综合疗效优于对照组(P<0.05)，疗效无统计学意义(P>0.05)。结论稳心颗粒治疗小儿病毒性心肌炎效果显著，无不良反应和毒副作用，值得推广。

简介：目的建立复方黄芪颗粒的新剂型。方法根据中医药理论，通过现代药学、药剂学等技术手段，对处方及生产工艺进行优化。结果由传统的抗病毒中药汤剂成功地转变成现代剂型--中药复方颗粒剂。结论该剂型携带、服用方便，生产成本合理，初步临床观察显示有较高的抗乙肝病毒活性，耳反跳率低，有良好的市场发展前景。

简介：目的：应用重组杆状病毒表达系统制备由HA、NA、M1和M2蛋白组成的H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒,为研究H5N1高致病性禽流感疫苗奠定基础。方法：构建能共表达A/chicken/Jilin/2003（H5N1）禽流感病毒血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）、A/PR/8/34（H1N1）流感病毒基质蛋白（M1）和离子通道蛋白（M2）的2个二元重组杆状病毒,共同感染HighFive细胞,同时表达HA、NA、M1和M2蛋白,使这4种蛋白在感染的细胞内自主组装成病毒样颗粒。经差速离心和蔗糖密度梯度超速离心收获病毒样颗粒,通过Western印迹鉴定病毒样颗粒的组成,透射电镜观察病毒样颗粒形态,血凝试验测定病毒样颗粒的活性。结果：HA、NA、M1、M2蛋白在昆虫细胞中共表达,并组装成病毒样颗粒;电镜观察到病毒样颗粒的形态与流感病毒一致,直径约80nm;血凝试验显示该病毒样颗粒具有凝集鸡红细胞的活性。结论：应用该方法可以制备流感病毒样颗粒,为H5N1流感疫苗研究提供了可行方案。

简介：摘要目的观察消旋卡多曲颗粒治疗小儿轮状病毒肠炎的临床疗效。方法112例轮状病毒肠炎随机分为治疗组和对照组，每组56例。2组均采取常规治疗，在此基础上，对照组口服蒙脱石药物，治疗组服用消旋卡多曲颗粒治疗。结果治疗组痊愈35例，有效18例，无效3例，总有效率为94.6%对照组痊愈16痊例，有效24例，无效16例，总有效率为71.4%。2组总有效率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论消旋卡多曲颗粒治疗婴幼儿轮状病毒肠炎能较快减少腹泻次数，改变大便性状，缩短腹泻病程，且安全性好，是治疗小儿轮状病毒肠炎一种有效的方法。