简介：目的探讨本课题组前期所构建的变异链球菌（S.mutans）ldh-luc荧光报告株在浮游态及生物膜状态下的活性及代谢状态的有效性,为探讨抗菌剂对多菌种生物膜中S.mutans的作用提供研究基础。方法采用生长曲线、扫描电子显微镜、活菌菌落计数等方法研究浮游态及生物膜状态下S.mutansldh-luc荧光报告株的生长活性及代谢状态,并测定荧光报告株的荧光活性。结果S.mutansldh-luc荧光报告株和野生株生长趋势一致,生物膜内可培养活菌数无差别（4h：F=2.13,P〉0.05;12h：F=1.45,P〉0.05;24h：F=2.72,P〉0.05;48h：F=1.85,P〉0.05）,SEM检测结果显示4、12和24h生物膜形成能力无差异;S.mutansldh-luc荧光报告株从对数生长早期到平台早期荧光表达稳定,荧光量能实时反映活菌数量。结论S.mutansldh-luc荧光报告株和野生株生长能力相似,具有稳定的荧光活性,荧光量能准确反映细菌活菌数量,提示可用S.mutansldh-luc荧光报告株代替野生菌株进行相关实验研究,并可用于实时观测抗菌剂对其的作用。

简介：目的探讨变形链球菌（S．mutans）荧光素酶（luc）基因报告株构建方法，拟为探讨抗菌剂对多菌种生物膜中S．mutans的作用提供研究基础。方法将S．mutansUA159乳酸脱氢酶（ldh）基因及其上游部分约1100000片段克隆至自杀质粒pFW5-luc的多克隆位点，构建重组质粒．并经酶切和测序证实。采用自然转化的方法，实现重组自杀质粒和S．mutansUA159同源序列的单次交换。结果经过聚合酶链反应（PCR）和测序分析，筛选出具有报告活性的S．mutansldh-luc基因荧光报告株。结论成功构建了S．mutansldh-luc基因荧光报告株。

简介：摘要目的建立红色荧光标记金黄色葡萄球菌(金葡菌)假体感染(PJI)临床株，探究工具菌的生物学特性及和初步应用可行性。方法通过分子克隆手段构建mCherry红色荧光表达质粒，通过电转化和噬菌体转导构建红色荧光标记金葡菌PJI临床株。通过生长曲线检测，体外成膜和生物量分析和荧光强度测量鉴定工具菌生物学特性。采用RAW264.7细胞株、工具菌建立共培养模型。采用该模型示踪不同锌离子浓度处理的巨噬细胞对于荧光PJI金葡菌吞噬能力。使用独立样本t检验、重复测量方差分析对定量数据进行统计。结果使用Gibson系统成功构建了荧光表达质粒pRMC2-pts-mCherry，并且使用噬菌体Phage11将该质粒成功导入金葡菌假体感染临床株ST1792。较之于野生株ST1792，荧光金葡菌ST1792-pRMC2-pts-mCherry两者的生长曲线没有统计学差异(F＝0.012，P>0.05)。在0.5%葡萄糖胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSBG)内，两者的生物膜光密度(OD)值分别为(3.700±0.003)和(3.715±0.042)(t＝0.6056，P>0.05)；10%滑液中生物膜OD值为(3.682±0.084)和(3.648±0.095)(t＝0.474，P >0.05)。使用动物活体成像系统(IVIS)检测荧光强度，24 h荧光强度为(1.95± 0.04)、48 h荧光为(1.94±0.13)、72 h荧光强度为(1.95±0.04)，荧光强度72 h稳定(F＝2.944，P>0.05)。通过荧光显微镜观察以及菌落形成单位(CFU)计数评价发现，使用锌离子浓度30～60 μmol/L不含抗生素的培养基处理RAW264.7 24 h，可以促进其吞噬金葡菌，其中30 μmol/L吞噬率为(44±4)%(t ＝4.75，P<0.01)、45 μmol/L吞噬率为(45±6)%(t＝4.086，P<0.05)、60 μmol/L离子处理的巨噬细胞，其吞噬率为(38±4)%(t ＝4.786，P <0.01)。结论本研究成功构建红色荧光临床PJI金葡菌，并验证其用于PJI相关体外吞噬研究的可行性。

简介：提出一种基于LUC公钥体制的分类多秘密共享方案,该方案使用各用户的私钥作为各自的秘密份额,秘密分发者不需要进行秘密份额的分配,整个系统不需要维护安全的信道,每个子组共享一个秘密,全体参与者共享一个总秘密,所有类型的秘密之和构成核心秘密,该方案能够有效地保管多个秘密,并且实现了对多个秘密的分类管理,其安全性是基于LUC密码体制与Shamir门限秘密方案的安全性.

简介：玛多县位于青海省的南部高原，是青海省的主要畜牧业基地之一，盛产藏羊和托牛。本区海拔高度大都在4200－4800m之间，具有典型的高原大陆性气候特征．由此而造成的牲畜冬春缺草长达半年之久。为解决这一问题，我们在推广种植优良牧草、积极建立人工草地的同时，进行了牧草整株青贮试验，对不同品种和不同含水量的牧草、不同添加剂处理和不同容器等对青贮效果影响作了对比分析。结果表明：以低水份的人工种植的垂穗披碱草再添加食盐的青贮效果最好；青贮容器应以中小型规模的水泥窖或土、砖、石等窖体衬以塑料膜为好。试验表明，在高寒牧区进行牧草整株青贮不但可行，而且易行，应该推广。

简介：摘要采用免疫荧光法检测狂犬病毒株PV-2061株的病毒滴度，并将检测结果与小鼠进行比较，验证该方法的可行性。两名实验人员分别检测相同样品3次，比较两种方法的重复性与精密度。结果显示，免疫荧光法测得的结果与小鼠法结果趋势相同；重复性实验中，免疫荧光法的变异系数更低，表明重复性更好。免疫荧光法检测病毒滴度，快速、准确、精密度好，可广泛推广。

简介：ThisarticleaddressesthesynthesisoforganicallytailoredNi-Allayereddoublehydroxide(ONi-AlLDH)anditsuseinthefabricationofexfoliatedpoly(methylmethacrylate)(PMMA)nanocomposites.ThepristineNi-AlLDHwasinitiallysynthesizedbyco-precipitationmethodandsubsequentlymodifiedusingsodiumdodecylsulfatetoobtainONi-AlLDH.NanocompositesofPMMAcontainingvariousamountsofmodifiedNi-AlLDH(3wt%?7wt%)weresynthesizedviasolventblendingmethodtoinvestigatetheinfluenceofLDHcontentonthepropertiesofPMMAmatrix.SeveralcharacterizationmethodssuchasX-raydiffraction(XRD),transmissionelectronmicroscopy(TEM),Fouriertransforminfraredspectroscopy(FTIR),rheologicalanalysis,differentialscanningcalorimetry(DSC)andthermogravimetricanalysis(TGA),wereemployedtoexaminethestructural,viscoelasticandthermalpropertiesofPMMA/OLDHnanocomposites.TheresultsofXRDandTEMexaminationconfirmtheformationofpartiallyexfoliatedPMMA/OLDHnanocomposites.TheFTIRresultselucidatethatthecharacteristicbandsforbothpurePMMAandmodifiedLDHarepresentinthespectraofPMMA/OLDHnanocomposites.Rheologicalanalyseswerecarriedouttoexaminetheadhesionbetweenpolymermatrixandfillerspresentinthenanocompositesample.TheTGAdataindicatethatthePMMAnanocompositesexhibithigherthermalstabilitywhencomparedtopurePMMA.ThethermaldecompositiontemperatureofPMMA/OLDHnanocompositesincreasesby28KcomparedtothatofpurePMMAat15%weightlossasapointofreference.IncomparisonwithpurePMMA,thePMMAnanocompositecontaining7wt%LDHdemonstratesimprovedglasstransitiontemperature(Tg)ofaround3K.Theactivationenergy(Ea),reactionorders(n)andreactionmechanismofthermaldegradationofPMMA/OLDHnanocompositeswereevaluatedusingdifferentkineticmodels.WateruptakecapacityofthePMMA/OLDHnanocompositesislessthanthatofthepurePMMA.

简介：荧光性物质污染带皮鲜猪肉的调查报告郝建国吴明杰姚明海梁勇刘子胜侯振生王庆伟张杰山东省冠县卫生防疫站（２５２５００）王宝生李宗立杨春华山东省聊城地区卫生防疫站（２５２０００）１９９４年８月，有人检举个体生猪屠宰户，在猪肉上使用荧光增白剂。国内报导，在馒...

简介：摘要本文依据GB17378.4-2007(5.1)方法要求，通过对海水中汞进行实验室测定，验证在我站实验室条件下开展海水中汞测定的适用性。

简介：摘要目的在pMDT-18克隆质粒载体的基础上，构建实用型的能够稳定转染甲型流感病毒RNPs并且可体外定量检测的RNA聚合酶I荧光报告系统。方法设计并人工合成人RNA聚合酶I启动子、小鼠终止子序列及毒株A/Puerto Rico/8/34的NP基因的UTR，利用嵌合PCR方法将绿色荧光蛋白（eGFP）基因与上述元件体外连接，形成小鼠终止子-3’UTR-eGFP-5’UTR-人RNA聚合酶I启动子报告元件，将报告元件克隆至不携带任何启动子的pMDT-18质粒载体中，构建实用型RNA聚合酶I荧光报告质粒，转染稳定表达流感病毒A/Puerto Rico/8/34 RNPs的HeLa细胞，观察荧光表达及测定相对荧光度。结果该系统在转染HeLa细胞后，无任何荧光产生，而转染稳定表达流感病毒A/Puerto Rico/8/34 RNPs的HeLa细胞后24 h、36 h、48 h和60 h均有荧光产生，强度随时间逐渐增强。结论成功构建了实用型RNA聚合酶I荧光报告系统，有助于提高流感病毒反向遗传系统的拯救效率、研究流感病毒聚合酶功能以及探索UTR多态性对特定基因的复制或转录的影响机制，为流感工作者在病毒分子机制领域的研究搭建了可靠的技术平台。

简介：目的：对炎症细胞因子TNF-α及IFN-γ刺激下，人NOX1基因的表达调控进行初步分析。方法：将NOX1基因5′-端上游序列连接到无启动子的PGL3-BASIC质粒，构建了PGL3-BASIC／NOX1报告质粒。PGL3-BASIC／NOX1质粒转染A549细胞，用TNF-α、IFN-γ刺激12h，双荧光素酶报告基因系统检测基因表达情况。结果：克隆的NOX1片段具有较强的启动子活性，在TNF-α和IFN-γ共同刺激下，转染报告基因的A549细胞萤光素酶活性与对照相比有明显的增高（约4．3倍）。分析显示NOX1基因5′端上游序列片段含有NF-KB结合位点，提示细胞因子刺激的荧光素酶表达增强可能与NF-KB位点激活相关。结论：NOX1基因表达水平明显受到炎症细胞因子的调控，提示该基因可能参与机体免疫防御（特别是上皮细胞免疫防御），值得进行深入研究。

简介：目的：构建含解耦联蛋白2（UCP2）-3’非翻译区（UTR）序列的野生型和突变型质粒的双荧光素酶报告基因载体．探讨微小RNA（miR）-15b对UCP2基因表达的调控作用。方法：应用生物信息软件预测miR-15b的靶基因，分别将预测靶基因UCP2的3’UTR及其突变体克隆到荧光素酶载体DsiCHECK-2骨架中，构建UCP2野生型和突变型质粒。并采用测序方法鉴定DsiCHECK-2-UCP2载体是否构建成功。将UCP2野生型和突变型质粒分别与miR-15b模拟物、miR-15b模拟物正常对照、miR-15b抑制剂、miR-15b抑制剂正常对照在293T细胞中共转染。通过双荧光素酶报告基因检测分析miR-15b对UCP2基因表达的调控作用。结果：测序鉴定证实psiCHECK-2-UCP2双荧光素酶报告基因载体构建成功。双荧光素酶报告基因检测显示转染UCP2野生型和UCP2突变型报告基因的293T细胞过表达miR-15b后，UCP2野生型报告基因的荧光素酶活性明显下降．下调31％（P=0．003），过表达miR-15b抑制剂后，UCP2野生型报告基因的荧光素酶活性明显增加，上调46％（P=0．01）。而miR-15b模拟物、miR-15b模拟物正常对照、miR-15b抑制剂、miR-15b抑制剂正常对照对UCP2突变型的表达均无明显影响（P〉0．05）。结论：UCP2是miR-15b直接作用的靶基因，且miR-15b结合于UCP2基因3’UTR区域．转录后水平对UCP2有直接的抑制作用。

简介：目的研究荧光素钠注射液不良反应的规律和特点,为临床用药提供参考。方法收集2010年1月-2017年6月我省上报的荧光素钠注射液413例,利用Excel软件进行统计并分析。结果413例报告中男性患者略多于女性,其不良反应特征主要表现为速发型,累及系统-器官以胃肠系统损害最为常见,占总例次的58.58%,其次为皮肤及其附件损害和用药部位损害。严重不良反应累及系统-器官以全身性损害为主。过敏试验不能完全预测不良反应。结论用药过程需重视和持续关注荧光素钠注射液引起的不良反应,尤其是过敏性休克等严重不良反应。医护人员要做好用药前后不良反应的预防、监护和救治工作。

简介：

简介：现代青贮户玉米青贮的概念，是选择适合通辽地区种植的生物产量高，籽实产量在5千kg／hm^2以上的全株青贮玉米种子，科学的栽培管理，以获得高产，优质的青贮原料。利用科学合理的青贮技术提高全株青贮玉米的饲料价值。

简介：摘要本文依据GB17378.4-2007(5.1)方法要求，通过对海水中汞进行实验室测定，验证在我站实验室条件下开展海水中汞测定的适用性。

简介：患者，女，9岁。因发热、左颈部有肿块于2006年10月28日到天津市儿童医院就诊。6天前发现左颈部有肿块，并逐渐增大和伴疼痛，3天后出现发热症状，体温38℃，持续24小时后自行降至正常，本次再次发热1天，最高达40℃，伴寒战，故到医院就诊。入院查体：体温38℃，左颈部可触及-3×4cm^2大小淋巴结，质韧、触痛，表皮不红，无破溃和流脓，无波动感，颈部活动受限。B起显示：左颈部可见多个大小不等、均匀低回声结节，边界清，最大3，3×2．0cm^2，内部可栓出血流。化验室检查：血C反应蛋白（CRP）30mg／L，WBC33×10^9／L，嗜中性粒细胞80％。患者自发病以来，精神可、食欲佳、大小便正常，无皮疹等异常，

简介：摘要目的观察电击伤后家兔血清心肌酶乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）的动态变化。方法220V交流电电击，复制家兔电击伤模型，分别于电击伤后6个时间点(0h、4h、12h、1d、2d、3d)采家兔心室血，以无电击家兔为对照组（C）,测定各组家兔心室血清的LDH和CK。结果LDH在电击伤后的4h、12h、1d、2d、3d时间点均显著上调(P<0.01或P<0.05)，在电击伤后4h达最高值，以后有所降低；CK在电击伤后的4h、12h、1d三个时间点显著升高(P<0.01或P<0.05)，在12小时升到峰值，随着时间的推移，2d、3d渐回复至正常（P＞0.05）。结论电击伤后血清LDH和CK的变化特点为电击伤存活案例的法医鉴定及临床诊断提供实验依据。

简介：摘要目的探讨德尔塔变异株新型冠状病毒（新冠病毒）感染康复者恢复期血浆（CP）在治疗重型、危重型患者中的疗效和应用价值。方法报道1例应用CP成功治疗德尔塔变异株新冠病毒感染所致危重型患者的治疗经过及结果，结合文献分析CP治疗德尔塔变异株新冠病毒感染的临床应用价值。结果该例患者为男性，50岁，由境外输入，未接种新冠疫苗，入境前新冠病毒核酸检测阴性。入境后次日出现发热症状，新冠病毒核酸检测阳性，胸部CT检查示双肺多发小片状磨玻璃影，并伴有恶心、头痛、食欲减退、腹泻，无流涕、鼻塞、呼吸困难，无嗅觉和味觉异常，感染后迅速由普通型进展为危重型。在综合救治基础上，于入院第10天（转为重型的第6天）给予输注德尔塔新冠肺炎康复者CP治疗，该例患者的病情快速好转。结论通过对该患者进行疗效评估，认为CP治疗在重型及危重型新冠肺炎患者的治疗方面有重要价值。

简介：摘要目的总结宝应县发现的1例VDPV病例卫生应急处置情况。方法启动1V级脊灰相关事件的应急响应，开展流行病学调查、标本采集和检测、脊灰疫苗接种率评估、急性弛缓性麻痹病例主动搜索、应急接种等工作。结果病例免疫水平低下，检出脊灰病毒Ⅲ型阳性，经治疗和隔离医学观察痊愈，人群脊灰疫苗各剂次接种率均在99%以上，人群脊灰Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体阳性率均在95%以上，AFP检测敏感度高，无漏报现象，脊灰疫苗查漏补种率达94%以上。结论采取的应急处置措施快速、有效，未发现形成VDPV循环，应急响应终止。