简介:摘要目的探讨应激诱导蛋白Sestrin2,对新生SD大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经细胞自噬作用及其机制。方法选择80只新生10日龄SD大鼠(受试鼠)为研究对象。对其中60只建立HIBD模型,并根据这60只受试鼠缺氧缺血(HI)后的处死时间点,将其分别纳入HI后4、8、12、24、72 h组(除HI后24 h组为20只受试鼠外,其余均为10只)。对剩余的20只受试鼠仅分离右颈总动脉,既不结扎右颈总动脉,亦不进行缺氧处理,处死时间对应于HI后24 h组,纳入假手术组(n=20)。①对HI后4、8、12、24、72 h组及假手术组(各组受试鼠均为10只),获取海马组织标本后,采用蛋白质印迹法,检测Sestrin2、肝酶B1(LKB1)、磷酸化LKB1(p-LKB1)、AMP活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链(LC)3及凋亡相关蛋白活化型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(CC)3在受试鼠海马组织中的相对表达量,并采用方差分析及最小显著性差异(LSD)-t法,对上述指标进行6组之间,或HI后4、8、12、24、72 h组分别与假手术组的组间比较。②对于HI后24 h组与假手术组各组剩余的10只受试鼠,获取大脑标本后,采用免疫组织化学SP法,检测海马组织中p-AMPK、LC3及CC3表达水平,包括积分吸光度(IA)值测定及染色结果,并采用t检验,对这3项指标的IA值进行2组比较。本研究通过四川大学动物实验伦理委员会批准[审批文号:SYXK(川)2013-185]。结果①蛋白质印迹法检测结果显示,HI后4、8 h组受试鼠海马组织中p-mTOR及CC3水平,均分别高于假手术组;HI后12、24 h组受试鼠海马组织中Sestrin2、p-LKB1、p-AMPK、p-mTOR、Beclin1、LC3及CC3水平,均分别高于假手术组;HI后72 h组受试鼠海马组织中Sestrin2及CC3水平,均高于假手术组;并且这些差异均有统计学意义(P<0.05)。其中,HI后8 h组受试鼠海马组织中p-mTOR水平最高,HI后24 h组受试鼠海马组织中Sestrin2、p-LKB1、p-AMPK、Beclin1、LC3及CC3水平均最高。6组受试鼠海马组织中LKB1、AMPK及mTOR水平比较,以及HI后4、8、12、24、72 h组受试鼠海马组织中LKB1、AMPK及mTOR水平分别与假手术组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。②免疫组织化学SP法IA值检测结果显示,HI后24 h组受试鼠海马组织中p-AMPK、LC3及CC3表达水平分别为(24 106±2 393)、(41 892±4 094)、(61 670±4 696),均高于假手术组的(15 593±1 575)、(18 941±2 131)、(20 279±1 912),并且差异有统计学意义(t=9.398、P=0.035,t=15.723、P<0.001,t=25.812、P<0.001)。免疫组织化学SP法染色结果显示,HI后24 h组受试鼠海马组织中p-AMPK、LC3及CC3呈阳性细胞的表达水平较高。结论10日龄新生SD大鼠发生HIBD时,其大脑海马组织中Sestrin2可能通过LKB1/AMPK/mTOR信号通路,参与调节神经细胞自噬及凋亡。
简介:摘要目的探讨人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/恢复(OGD/R)模型中应激诱导蛋白Sestrin2基因过表达对线粒体分裂的调控作用及其机制。方法(1)将SH-SY5Y细胞分为正常对照组、OGD/R组、Sestrin2过表达组及空载体组,后2组细胞预先采用慢病毒感染方法分别构建Sestrin2过表达及空载体稳转细胞株,除正常对照组细胞外均给予氧糖剥夺4 h/恢复18 h造模处理。造模完成后采用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测各组细胞的存活率,采用Western blotting实验检测各组细胞中Sestrin2、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胞浆Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1(Keap1)、胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)的蛋白水平,采用透射电镜观察各组细胞中线粒体的超微结构,采用免疫荧光染色检测各组细胞中Nrf2的核移位情况。(2)将Sestrin2过表达稳转SH-SY5Y细胞株分为Sestrin2过表达组、鸦胆子苦醇+Sestrin2过表达组、二甲基亚砜(DMSO)+Sestrin2过表达组,后2组细胞在造模前分别给予Keap1/Nrf2通路抑制剂鸦胆子苦醇(终浓度100 nmol/L)或DMSO溶液(终体积分数0.1%)预处理4 h,然后各组细胞均给予氧糖剥夺4 h/恢复18 h造模处理。造模完成后采用Western blotting实验检测各组细胞中胞浆Keap1、胞核Nrf2、Drp1、Fis1的蛋白水平。结果(1)与OGD/R组相比,Sestrin2过表达组细胞的存活率明显升高(61.33%±1.15% vs. 81.00%±3.00%),Bcl-2/Bax值明显升高(0.467±0.006 vs. 0.880±0.010),Drp1、Fis1、胞浆Keap1蛋白水平明显降低(1.089±0.033 vs. 0.865±0.014;0.829±0.009 vs. 0.350±0.007;0.967±0.017 vs. 0.881±0.024),胞核Nrf2蛋白水平明显升高(0.627±0.025 vs. 0.957±0.015),差异均有统计学意义(P<0.05);并且,Sestrin2过表达组细胞的线粒体结构明显较OGD/R组更完整,Nrf2发生了明显的核移位。(2)与Sestrin2过表达组相比,鸦胆子苦醇+Sestrin2过表达组细胞胞核Nrf2的蛋白水平明显降低(0.920±0.013 vs. 0.627±0.035),Drp1、Fis1的蛋白水平明显升高(0.994±0.020 vs. 1.084±0.005;0.728±0.010 vs. 0.906±0.022),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Sestrin2基因过表达可下调胞浆Keap1蛋白水平、促进Nrf2核移位而激活Keap1/Nrf2通路,从而抑制线粒体分裂,减少细胞凋亡,减轻SH-SY5Y细胞的OGD/R损伤。
简介:【摘要】:集体备课活动是现代教学中不可或缺的重要内容,说课是集体备课中的重要环节,通过有效措施提高教师说课水平,达到提升集体备课效果的目的,从而整体提高课堂教学质量。
简介:二次根式(a~2)~(1|2)和((a~2)~(1|2))有什么区别吗?主要表现在下面三个方面:1.读法不同.(a~2)~(1|2)读作根号a的平方,而((a~2)~(1|2))读作括号根号a括号的平方.2.表示的意义不同.(a~2)~(1|2)是求a~2。的算术平方根.((a~2)~(1|2))求的是a的算术平方根的平方.一个表示求一
简介:Twonewdicyanamidecoordinationpolymers,{Mn(dmpz)[N(CN)2]2}2(1)and{Cu(dmpz)[N(CN)2]2}2(2)(dmpz=3,5-dimethylpyrazole),weresynthesizedandcharacterizedbysinglecrystalX-raydiffractionanalysisandIRspectroscopy.In1and2themetalionshavetwodifferentcoordinationmodes,whereoneiscoordinatedtofourdicyanamideanionsandtwomonodentatedmpzmoleculestoformaslightlydistortedoctahedralgeometry,whiletheotheradoptsoctahedralgeometry,surroundedbyfournitrileNatomsandtwoamideNatomsofthedicyanamideanions.Bothcomplexescontaintwoalternatingchainsthatareparalleltoeachother.
简介:Hypersubstitutions是印射操作符号到相应arities的术语的地图砰。他们作为使ahyperidentity和归纳的概念精确到M-hyperidentities的一个方法被介绍。每身份作为亢奋的身份在满足的一个变化被称为固体。如果每身份是为子集Mof的M-hyperidentity所有亢奋的替换的集合,变化被称为M固体。在亢奋的替换的单音的标志和一种给定的类型的代数学的所有变化的格子的潜水艇格子之间有一个Galois连接。因此,知道怎么有趣、有用半组或在到M固体变化的相应格子的性质的这个Galois连接下面的亢奋的替换转移的单音的标志性质ofmonoids。在这篇论文,我们学习类型(2,2)的eachhypersubsfitution的顺序,即,周期的subsemigroup的顺序由类型的所有亢奋的替换的单音的标志的thathypersubstitution产生了(2,2)。主要结果是顺序是1,2,3,4或无限。
简介:在本期的“课例大家评”中,我们刊登了同一课题下的6篇课例供大家点评.2001年第4期,我刊登出了“直线方程的一般形式(第一课时)”课例的征稿启事.截止4月30日,我们收到课例来稿百余篇.这6篇课例就是从这些应征稿件中遴选出来的.为了便于大家点评,我们将6篇课例按学生学习状况的优、中、差分为三组,每组有2篇课例.在撰写点评稿时,您可以对6篇课例进行总评,也可以就学生学习状况相当的两篇课例进行评析,还可以对某一课例做单独的评议.总之,点评的内容应相对集中,以便于编者对稿件进行选择和组构.文稿字数以1000字左右为宜,截稿日期为9月10日.投稿时请在信封左下方注明“课例大家评”字样.欢迎广大数学教师和教研工作者积极参与本次“课例大家评”活动,我们将以较大篇幅集中发表观点新颖、论述深刻、对教学具有较强启发性的优秀来稿.在此,我们还特别对提供“直线方程的一般形式”课例的所有老师表示衷心的感谢.
简介:ThesplittingofpotentialenergylevelsforgroundstateX2ΠgofOx2(x=+1,1)underspin–orbitcoupling(SOC)hasbeencalculatedbyusingthespin–orbit(SO)multi-configurationquasi-degenerateperturbationtheory(SO-MCQDPT).TheirMurrell–Sorbie(M–S)potentialfunctionsaregained,andthenthespectroscopicconstantsforelectronicstates2Π1/2and2Π3/2arederivedfromtheM–Sfunction.TheverticalexcitationenergiesforOx2(x=+1,1)areν[O+12(2Π3/2→X2Π1/2)]=195.652cm1,andν[O12(2Π1/2→X2Π3/2)]=182.568cm1,respectively.Allthespectroscopicdataforelectronicstates2Π1/2and2Π3/2aregivenforthefirsttime.
简介:ThecrystalstructureofDi-nitratobis(ethylcaprolactam)uranyl(Ⅱ)UO2[CH2(CH2)4CONC2H5]2(NO3)2wasestablishedbyasingle-crystalX-raydiffractionstudy.Itistriclinie,spacegroupP1,witha=7.171(2),b=8.655(3),c=10.182(5)A,α=78.27(3),β=70.63(3),γ=81.76(3)°,V=581.7(4)A3,Z=l,Dc=1.94g.cm-3.FinalRvalueis0.0218.Theresultrevealsthaturanylioniscoordinatedtosixoxygenatoms,twoofthemarefromtwocarbonylgroupsofethylcaprolactamandtheotherfourarefromtwonitrategroups.