简介：Antifungaldrugresistanceisasignificantclinicalproblem,andantifungalagentsthatcanevaderesistanceareurgentlyneeded.Ininfectiveniches,resistantorganismsoftenco-existedwithsensitiveones,orasubpopulationofantibiotic-susceptibleorganismsmayevolveintoresistantonesduringantibiotictreatmentandeventuallydominatethewholepopulation.Inthisstudy,weestablishedaco-cultureassayinwhichanazole-resistantCandidaalbicansstrainwasmixedwithasusceptiblestrainlabeledwithgreenfluorescentproteintomimicinvivoconditionsandscreenforantifungaldrugs.Fluconazolewasusedasapositivecontroltoverifythevalidityofthisco-cultureassay.FivenaturalmoleculesexhibitedantifungalactivityagainstbothsusceptibleandresistantC.albicans.Twoofthesecompounds,retigericacidB(RAB)andriccardinD(RD),preferentiallyinhibitedC.albicansstrainsinwhichtheeffluxpumpMDR1wasactivated.Thisselectivitywasattributedtogreaterintracellularaccumulationofthedrugsintheresistantstrains.Changesinsterolandlipidcompositionswereobservedintheresistantstrainscomparedtothesusceptiblestrain,andmightincreasecellpermeabilitytoRABandRD.Inaddition,RABandRDinterferedwiththesterolpathway,furtheraggregatingthedecreaseinergosterolinthesterolsynthesispathwayintheMDR1-activatedstrains.Ourfindingshereprovideanalternativeforcombatingresistantpathogenicfungi.

简介：Objective:ToestablishafluoregenicprobequantitativeRT-PCR(FQ-RT-PCR)methodfordetectionoftheexpressionofMDR1geneintumorcellsandtoinvestigatetheexpressionofMDR1geneinpatientswithlungcancer.Methods:ThefluorogenicquantitativeRT-PCRmethodfordetectionoftheexpressionofMDR1genewasestablished.K562/ADMandK562celllinesor45tumortissuesfrompatientswithlungcancerwereexaminedonPEAppliedBiosystems7700SequenceDetectionmachine.Results:theaveragelevelsofMDR1geneexpressioninK562/ADMcellsandK562cellswere(6.86±0.65)×107copies/mgRNAand(8.49±0.67)×105copies/mgRNA,respectively.Theformerwas80.8timesgreaterthanthelatter.Eachsamplewasmeasured10timesandthecoefficientvariation(CV)was9.5%and7.9%,respectively.VariouslevelsofMDR1geneexpressionweredetectedin12of45patientswithlungcancer.Conclusion:QuantitativedetectionofMDR1geneexpressionintumorcellswasachievedbyusingFQ-RT-PCR.FQ-RT-PCRisanaccurate,andsensitivemethodandeasytoperform.Usingthismethod,lowlevelsofMDR1geneexpressioncouldbedetectedin24%ofthepatientswithlungcancer.

简介：摘要目的多重耐药（drug resistance，MDR）是肿瘤化疗失败的主要原因。本研究旨在探讨MDR1甲基化对宫颈癌经皮子宫动脉血管腔内化疗栓塞疗效的影响。方法选择67例宫颈癌患者接受栓塞化疗，45例正常宫颈组织作为对照。免疫组化检测宫颈癌中P-糖蛋白（P-gp）水平，并与正常组织进行比较。通过使用特异性千碱基裂解法和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法分析MDR1基因启动子区16个CpG岛的甲基化状态。结果P-gp在正常宫颈组织中的阳性表达率为0％ （0/45），介入栓塞化疗前后的阳性表达率分别为61.19％（41/67）和77.61％（52/67）。宫颈癌组织与正常宫颈组织相比有明显差异（χ2=4.2523，0.0392）。化疗前P-gp的阳性表达率与化疗疗效呈负相关（r=-0.340，P=0.005）。正常组织中13个CpG岛的甲基化率显著高于宫颈组织（P<0.05）。在宫颈癌组织中，经皮子宫动脉血管腔内化疗栓塞前6个CpG岛的甲基化率高于化疗后，但1个CpG岛的甲基化率低于化疗后（P<0.05）。化疗前有效化疗的1个CpG岛甲基化率明显高于无效化疗（P<0.05），其他CpG岛相似（P<0.05）。结论MDR1编码的P-gp表达水平，部分MDR1基因启动子区CpG岛的甲基化状态，与宫颈癌介入栓塞化疗的疗效密切相关。

简介：[摘要]目的：分析TRAIL抑制胃癌多药耐药基因MDR1/P-gp表达情况。方法：把各浓度TRAIL和SCC-7901 /VCR细胞株进行处理，时间为48h。对于每个小组的胃癌细胞株之内的多药耐药MDR1 mRNA表达情况使用RT-PCR加以测定，与此同时利用ELISA法测定胃恶性肿瘤的细胞株内P-gp表达水平。结果：各浓度的TRAIL作用在细胞中以后，胃恶性肿瘤耐药细胞株SGC-7901/VCR之中MDR1/P-gp 表达呈现出程度不一抑制情况，相较于对照组，P＜0.05；200 μg/L组以及400 μg/L组相比，MDRI /P-gp抑制水平不显著，剩余小组差异存在统计学意义P＜0.05。结论：TRAIL对于SCC-901 /VCR MDRI /P-gp表达呈抑制作用，表现为量效关系。其能经减少耐药基因MDRI表达的方式，体现出逆转胃恶性肿瘤多药耐药的效果。

简介：目的：探讨初治治卵巢癌组织多药基因（ＭＤＲ１）表达水平及其相关药物抗肿瘤的影响。方法：用逆转录酶链聚合反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法对３７例初治卵巢癌组织（ＭＤＲ１）表达水平进行了定量测定，结果：３７例卵巢癌组织均有ＭＤＲ１表达，其中浆液性癌的表达水平为０．７５±０．２２，粘液性癌为１．０３±０．２８，内膜样癌为０．５７±０．１１，３种病理类型之间ＭＤＲ１的表达水平有显著性差异（Ｐ〈０．０５），３４例卵巢癌的小鼠肾包膜下移植肿瘤药敏测定（ＳＲＣＡ）肿瘤药敏试验成功，此卵巢癌存在固有的ＭＤＲ１表达，ＭＤＲ１的表达降低相关药物的抗肿瘤作用。

简介：目的验证smallinterferenceRNA(siRNA)片段稳定转入肾细胞癌细胞中抑制其癌细胞生长,同时试图解释其原因。方法将合成好的RNAi慢病毒颗粒稳定转入目的细胞中并达到稳定传代后,以CCK-8试剂盒检测目的细胞的生长情况,以Real-timePCR检测目的细胞中p53基因及survivin基因的表达变化。结果CCK-8法测得ACHN细胞在MDR1被干扰以后的生长水平,干扰组细胞明显低于两对照组,且干扰组细胞的细胞活力出现了明显的下降趋势。Real-timePCR检测得p53基因和survivin基因的mRNA表达水平明显降低,而无意义重组载体组(NC组)则和亲本细胞无明显差异。结论MDR1沉默可使肾细胞癌ACHN细胞增殖减慢,生长抑制。同时沉默后细胞内的mtp53及survivin基因的表达均明显减少,MDR1介导的对肿瘤细胞生长的抑制作用至少部分是通过p53和survivin基因来实现的。

简介：摘要目的探究儿童肝移植术后早期MDR1(C3435T)基因多态性对受者他克莫司代谢的影响，辅助临床个体化给药。方法收集天津市第一中心医院90例儿童肝移植供、受者术前血样，检测供、受者基因型。记录术后受者他克莫司剂量、血药浓度及相关人口学信息。根据供、受者CYP3A5基因型，将受者划分为4个亚组：R/D-S亚组、R-F/D-S亚组、R-S/D-F亚组和R/D-F亚组。从亚组水平比较不同MDR1基因型受者他克莫司谷浓度/日剂量(C0/D)值差异是否有统计学意义。结果肝移植术后第1周90例受者中MDR1基因TT型的C0/D值显著高于CC型和CT型受者(P<0.01)。R/D-S亚组术后第2周CT型的C0/D值显著大于CC型受者(P<0.05)。R/D-F亚组CT型的术后第2周(P<0.05)、第3周(P<0.01)C0/D值显著大于CC型受者。结论MDR1(C3435T)基因CC型受者较CT和TT基因型受者代谢较快，相同日剂量，他克莫司血药浓度较低，不同MDR1基因型受者需要调整给药剂量。这种差异在CYP3A5快代谢亚组中更加明显，需要临床给予更多的关注，优化个体化给药方案，降低不良反应发生率并提高疗效。

简介：目的构建多药耐药基因（MDR1）的短发卡RNA表达质粒，并检测其对胶质瘤干细胞药物敏感性的作用。方法培养脑胶质瘤干细胞；根据MDR1的DNA序列设计shRNA，用Siportxp-1脂质体法转染胶质瘤干细胞。分别采用定量聚合酶链反应（PCR）和Westernblot检测转染前后MDR1mRNA和蛋白表达情况；使用活细胞计数试剂盒（CCK-8）对转染后细胞进行药物敏感性试验，评价shRNA对多药耐药性的逆转作用。结果成功构建MDR1shRNA表达质粒，转染组MDR1mRNA表达水平有所下降（P〈0．05），转染5d组下降最明显；RT—PCR结果显示MDR1mRNA水平降低，第3、5、7d抑制率分别为78．46％±14．17％，82．02％±11．87％，79．5％±13．27％。Westernblot结果显示：shRNA转染组P-糖蛋白（P-gp）的表达降低，第3、5、7d抑制率分别为58．1％±6．5％，39．5％±5．2％，45．8％±8．6％；而药敏实验显示：阿霉素、长春新碱对转染MDRIshRNA的胶质瘤干细胞的半数抑制浓度（IC50）均有不同程度降低，且出现凋亡峰（P〈0．05）。结论MDR1短发卡RNA可在转录后水平对多药耐药进行调节，下调MDR1基因表达，提高药物敏感性，诱导细胞凋亡。

简介：本研究探讨中药复方当归注射液、马钱子碱、麻黄碱、士的宁对人红白血病多药耐药细胞株K562／A02Mdr1基因及其表达产物P—gP的影响。采用噻唑蓝（MTT）法、台盼蓝拒染法检测上述药物的细胞毒作用；采用半定量RT—PCR和Westernblot分别检测上述4种中药在非细胞毒浓度（IC10）作用下对K562／A02细胞Mdr1基因及P—gP表达的影响。结果表明：复方当归注射液、马钱子碱、麻黄碱作用后，K562／A02细胞中Mdr1基因及P—gP表达降低（p〈0．01），其中马钱子碱组的作用最为显著；而士的宁作用后K562／A02细胞Mdr1基因及P—gP表达无明显变化。结论：复方当归注射液、马钱子碱、麻黄碱能部分逆转K562／A02细胞的耐药性，其作用机制主要与下调K562／A02细胞Mdr1mRNA的表达而导致细胞膜上P—gP的表达量减少有关。

简介：本研究探讨多药耐药（mdr1）基因体外转染人骨髓间充质干细胞（BMMSC）以应用于基因治疗的可行性、安全性。体外分离、培养、鉴定MSC；采用具有高效转染非分裂期细胞的慢病毒载体（1entiviralvector，LV）系统将mdr1基因导入BMMSC中；采用RT—PCR和GFP荧光技术检测目的基因的表达，台盼蓝染色及MTT法检测转染后细胞的增殖能力。结果表明：慢病毒感染MSC的感染复数（multiplicityofinfection，MOI）为10，最佳感染率可达80％；Msc表面低表达CD34、HLA—DR、CD31、CD45，高表达CD44、CDl05、CD90、CDl3；GFP荧光表达自72小时开始出现，以后逐渐增强；转染细胞中显示目的基因mRNA的表达；转染对MSC存活及增殖几乎无影响（P〉0．05）。结论：慢病毒载体可成功转染人骨髓间充质干细胞并使其mdrl表达增高，转染对MSC存活及增殖基本无影响。

简介：目的：探讨健康志愿者和高血压患者的多药耐药基因（Multidrugresistance1gene,MDR1）C3435T基因多态性对替米沙坦血药浓度和药动学的影响。方法：采用聚合酶链反应（Polymerasechainreaction,PCR）和限制性内切片段多态性（Restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）的方法对19名健康志愿者和61例高血压患者进行MDRl基因分型；使用HPLC-MS法测定志愿者单剂量口服40mg替米沙坦48h内血药浓度和高血压患者的稳态血药浓度。比较替米沙坦在不同基因型的健康志愿者单剂量药动学及高血压患者稳态血药浓度的差异。结果：在61例高血压患者中，MDRlCC型纯合子频率39.34%，TT型纯合子频率11.48%，CT型杂合子频率49.18%，C3435T发生率在健康人群和高血压患者之间没有明显的差异，C3435T的三个不同基因型志愿者Cmax、tmax、t1/2、AUC0-48、AUC0-∞和CL差异无统计学意义（P＞0.05）。三个基因型高血压患者的稳态血药浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：MDRlC3435T基因多态性对替米沙坦的血药浓度和药动学无影响。

简介：摘要目的实时荧光定量PCR检测多发性骨髓瘤患者WT1和MDR1基因的表达水平，并探讨其临床意义。方法构建实时荧光定量PCR检测WT1和MDR1基因表达水平技术，检测30例不同分期多发性骨髓瘤患者血清WT1和MDR1表达水平，并对其表达量进行统计学分析。结果多发性骨髓瘤患者WT1和MDR1表达显著高于对照组（P<0.05），且两者与患者分期显著相关，其中，WT1基因在Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅱ期比较中具有显著性差异（P<0.05），MDR1基因在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期两两比较中均具有显著性差异（P<0.05）。另外，WT1和MDR1基因表达水平呈现相关性（P=0.008），且两者均与β2-微球蛋白水平呈正相关，P值分别为0.006和0.034。结论WT1和MDR1基因表达水平可以作为多发性骨髓瘤患者疾病进程的检测指标。

简介：目的：观察肾移植术后供肾多药耐药基因（MDR1）外显子26及外显子21的基因型对他克莫司（FK506）急慢性肾毒性和血药浓度的影响。方法回顾51例肾移植术后常规使用FK506＋MMF＋Pred三联免疫抑制用药方案的患者资料。通过基因组测序检测肾移植供者MDR1exon26和exon21的基因型，比较不同供肾基因型的患者FK506的用量、血药浓度及和肾毒性的差异。结果在术后1年时比较内生肌酐清除率时，在exon26中，TT型的内生肌酐清楚率明显低于CC型和CT型（P＜0.05），在exon21中，低表达型（TT型）明显低于高表达型（GG/GT/GA/AT型）（P＜0.05）；在比较术后1个月内的移植肾急性肾中毒发生率时，exon21中低表达型明显高于高表达型（P＜0.05）。结论在保护移植肾功能，减少FK506的急慢性肾毒性上，exon26的CC/CT型和exon21的高表达型明显优于exon26的的TT型和低表达型。

简介：[摘要 ] 目的：探讨紫杉醇联合卡铂新辅助化疗对宫颈癌组织中 MDR1基因表达的影响，以寻找预测化疗药物疗效的敏感指标。方法：采用免疫组织化学 S-P法分别检测 60例宫颈癌患者新辅助化疗前后癌组织中 MDR1基因编码的 P-gP的表达阳性率的差异。结果：化疗临床有效率为 65%；化疗可以诱导宫颈癌 P-gP的表达，其表达水平明显高于化疗前组，两组有显著性差异 (p<0.05)；化疗有效组化疗前 P-gP表达明显低于化疗无效组，两组间有显著性差异 (p<0.05)；结论：化疗可以诱导宫颈癌 P-gP的表达，化疗后表达水平明显高于化疗前； MDR1基因编码的 P-gP的表达与新辅助化疗疗效有相关性，化疗有效组化疗前 P-gP表达明显低于化疗无效组； MDR1基因可以作为预测宫颈癌新辅助化疗疗效的指标。

简介：目的探讨急性髓系白血病（AML）患者MDR1和Nrf2基因表达水平及其临床意义。方法选择2011年10月至2014年1月南方医科大学南方医院血液科110例初治AML患者,其中男性66例,女性44例;年龄14~77岁,中位年龄36岁。通过实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法联合检测患者MDR1和Nrf2基因的表达水平,分析其表达水平与疾病特征及临床疗效之间的关系。结果以110例初治AML患者MDR1和Nrf2基因表达量的中位数为分界点,将患者分别分为MDR1基因低表达组和MDR1基因高表达组及Nrf2基因低表达组和Nrf2基因高表达组各55例,而初治AML患者MDR1和Nrf2基因表达水平在不同分层的年龄、性别、法国（France）、美国（American）和英国（Britain）（FAB）分型、外周血象、骨髓原始细胞比例、遗传学危险度分层、免疫分型CD34表达间差异无统计学意义（P〉0.05）。MDR1基因低表达组完全缓解（CR）率和总生存（OS）率均显著高于MDR1基因高表达组（P=0.032、0.045）,而Nrf2基因低表达组和Nrf2基因高表达组CR率和OS率差异无统计学意义（P〉0.05）。在MDR1基因低表达组患者中Nrf2基因表达水平高、低两组患者CR率及OS率差异均无统计学意义（P〉0.05）。但在MDR1基因高表达组患者中Nrf2基因高表达组患者CR率和OS率皆优于Nrf2基因低表达组患者（P=0.007和P=0.001）。结论MDR1基因是AML预后差的指标之一,Nrf2基因不同表达水平患者的危险度分层、疗效、预后差异均无统计学意义;但在MDR1基因高表达组患者中Nrf2基因高表达可能是预后好的指标。

简介：目的建立人结肠癌多药耐受性动物模型并初步探索其耐药机制。方法结合体内外诱导方法建立人结肠癌多药耐受性动物模型,利用VCR和CTX的肿瘤抑制实验评价其MDR特性;利用real-timePCR和West-ernblotting等方法分析其P-gp/MDR1和MRP1基因和蛋白的表达。结果肿瘤抑制实验结果显示,MDR和敏感型结肠癌模型的肿瘤生长速度差异不显著,MDR结肠癌动物模型对于VCR和CTX的耐药性均有较大程度的提高;表达分析结果显示,人结肠癌MDR动物模型的P-gp/MDR1表达水平有较大提高,而MRP1表达没有显著变化。结论人结肠癌多药耐受性动物模型具有较好的多药耐受性,其多药耐受性表型主要是由于P-gp/MDR1过量表达所导致。

简介：摘要目的探讨新辅助化疗前后宫颈癌组织中MDR1、Bcl-2的表达情况及与紫杉醇联合卡铂新辅助化疗疗效的关系。方法采用免疫组织化学S-P法分别检测60例宫颈癌患者新辅助化疗前后癌组织中Bcl-2和MDR1基因编码的P-gP的表达阳性率的差异。结果化疗临床有效率为65%；化疗后Bcl-2表达低于化疗前，P>0.05；化疗后P-gP的表达水平明显高于化疗前组，P<0.05；化疗前P-gP、Bcl-2的表达在化疗有效组均低于无效组，但P-gP降低的更明显，P<0.05；Bcl-2阳性组中P-gP表达阳性率高于Bcl-2阴性组，P>0.05。结论化疗能诱导P-gP的表达，P-gP可作为预测化疗疗效的指标；Bcl-2的过量表达也可能是宫颈癌产生耐药的原因；在宫颈癌组织中P-gP与Bcl-2的表达无明显相关性。

简介：目的：构建含MDR1基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,并检测其在朊蛋白高表达胃癌细胞系中的活性表达。方法：PCR克隆人MDR1基因启动子片段,通过亚克隆将启动子分别插入到pMD18-T载体和荧光素酶报告基因pGL3-Enhancer载体中,建立含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒pGL-MDR1,并经测序及酶切确定扩增序列;脂质体基因转染法将pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系SGC7901-PrP,并测定其荧光素酶活性。结果：PCR克隆出MDR1启动子经DNA测序证实序列正确,pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系的荧光素酶活性,较转染入pcDNA3.1空载体细胞系相比升高3-5倍。结论：成功构建含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒;上调朊蛋白表达可激活MDR1的转录活性。

简介：目的:癌细胞膜上Pgp糖蛋白的过量表达是肿瘤多药抗性的主要机制。人体内编码Pgp糖蛋白的基因中仅有mdr1涉及多药抗性。本研究中设计了针对mdr1的反义核酸与阿霉素的偶联物,并且对其细胞毒性进行了考察。同时对偶联物对人表皮癌细胞株KBA1内的Pgp蛋白的表达也做了分子水平上的研究。方法:使用MTT法考察偶联物对KBA1细胞的毒性。用HPLC考察偶联物对细胞内阿霉素的积累量的影响。对于Pgp蛋白表达的变化,主要是通过RTPCR及WesternBlot方法进行了研究。结果:偶联物的细胞毒性比寡核苷酸高。在低剂量的偶联物(0.5μmol·L-1)的作用下,细胞对阿霉素的敏感性提高。偶联物能有效的提高细胞内阿霉素的积累量。并且从RTPCR及WesternBlot看,偶联物处理后的细胞内Pgp表达最少。结论:选用合适的基团,对反义核酸进行结构修饰能够较好的增强反义核酸的性能。采用阿霉素作为偶联基团尽管增强了细胞毒性,但是在更大程度上增强了其抑制Pgp蛋白的效力,提高了肿瘤耐药性的逆转倍数,具有一定的潜在应用价值。更多还原

简介：