简介:为探讨TATPTD对苏云金杆菌鞘翅目特效基因CryAa是否具有协同作用,本试验在实现了融合基因TATPTD-Cry3Aa大肠杆菌原核表达的基础上,以甘薯小象甲为生测对象测定了原核表达产物PTD-Cry3Aa与Cry3Aa的毒力。结果表明,用大肠杆菌表达的Cry3A和PTD-Cry3Aa包涵体初提物均对甘薯小象甲成虫和幼虫有杀虫活性,且表现出一定毒力增效作用,对成虫的增效倍数为2.01倍,对幼虫的增效作用更加明显,达到3.19倍。这一研究结果对于甘薯小象甲的生物防治研究以及转基因抗虫甘薯的研究具有重要的指导作用。
简介:【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(CsCAD1)的基础上,明确CsCAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆CsCAD1基因片段,将构建的pET-28a-(+)-CsCAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用westernblot和ligandblot技术分析其与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21中表达一个约44ku的蛋白,原核表达载体构建成功。SDS-PAGE显示该蛋白条带单一,且纯度较好。Ni柱亲和层析纯化该目的蛋白后进行Ligandblot分析,结果显示CsCAD1重组蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合。【结论】CsCAD1蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合,是潜在的Cry蛋白受体,所得结果有助于阐明Cry1Ac和Cry2Aa蛋白对二化螟的作用机制。
简介:Chlamydiatrachomatisoutermembraneprotein2(Ctomp2)isamajorimmunogeninchlamydialinfectionsandahighlygenus-conservedstructuralproteinofallChlamydiaspecies.Topurifytheproteinandtopreparemonoclonalantibodies(mAbs)againstit,therecombinantproteinwasinducedbyIPTG,whichwasconfirmedbySDS-PAGEandpurifiedbymeansofaNi2+-chargedresincolumn.ThedenaturedproteinwasrefoldedintheGSH-GSSHbuffergraduallyandidentifiedbyWesternblotting.ThentheBALB/cmicewereimmunizedwiththerecombinantproteintopreparethemAbagainstCtomp2.TheobtainedmAbswerecharacterized.GenitalspecimensweretestedwithindirectELISAmostlymadeofthemAbandcellculturein84patientswithgenitalsymptoms.Theresultsshowedthathigh-levelexpressionoftherecombinantproteinwasachieved,whichexistedasinclusionbodyandamountedto38%oftotalbacteriumprotein.AmAbagainstCtomp2wasobtained.ItbelongstoIgG2b.Thetiterswereashighas1:40000.TheWesternblottingshowedthatthemAbonlyreactedwiththerecombinantprotein.IthadnocrossingreactionsagainstE.coli,N.gonorhoea,M.hominis,U.urealyticumandM.penetrans.Ithadhighspecifity.Incomparisonwithgoldstandardtest-cellculture,thesensitivities,specificities,positivepredictivevaluesandnegativepredictivevaluesofindirectELISAwere95.24%,100%,100%and98.44%,respectively.Theabove-mentionedresearchworkcontributednotonlytothefurtherstudyofthestructureandfunctionofthisprotein,butalsototheestablishmentofthemethodforitsclinicalapplication,forithadnotbeenreportedbefore.
简介:【背景】此研究为“十二五”转基因生物新品种培育国家项目中创建新的转基因棉花品种环境安全评价技术而设。【方法】以转双价双成抗虫基因(cry1Ac+cry2Ab)棉和转双价抗虫、抗除草剂基因(cry1Ac+肼强阳)棉为观察品种,非转基因棉赣棉11号为对照品种,在荒地用撒播和3cm深度播种2种方式,于2011年5月一2012年3月对棉花出苗率、株高、生育进程、棉吐絮瓣数、絮瓣脱落率、自生苗等生存竞争能力进行比较,检测、评价其杂草化的风险,并探讨、验证检测技术的可行性。【结果】在荒地条件下,以2种方式播种的转cry1Ac+cry2Ab基因棉和转cry1Ac+EP5P5基因棉与非转基因棉相比,上述各项指标的竞争能力总体上未表现显著优势。【结论与意义】转cry1Ac+cry2Ab基因棉和转cry1Ac+EPSPS基因棉在荒地条件下生长无杂草化风险。同时,研究证明,在荒地自然生态条件下,可以采用撒播和3cm深度播种方法检测新的转基因棉花品种在生存竞争能力上的杂草化风险,在测评上有互为参照效应,为定性评价新的转基因棉花品种的杂草化风险提供了保障。
简介:Inthe13thcentury,MarcoPolotraveledalongwaytoChina.HewasafamousItalian1.DuringhisstayinChina,hesawmanywonderfulthings.Oneofthethingshe2wasthattheChineseusedpapermoney.Peoplein3countriesdidn’tusepapermoneyuntilthe17thcentury.However,peopleinChinabegantousepapermoneyinthe10thcentury.4wasinventedbyaChineseabout2,000yearsago.HisnamewasCaiLun.Hethen5thesepiecesofpapertogetherandmadethemintoa6.Nowpapermainlycomesfromtrees.Weuseiteveryday.Sometimeswewastealotofit.Ifwekeepondoingso,peoplehavetocutdownmanymoretrees.Thentherewillnotbeanytreesleft.Ifthereareno7,therewillbenopaper.
简介:李林:夫妻之间的财产怎样处理才好呢?是AA制还是都存在一起好呢?陈一这个问题是一千个人有一千个答案,陈一没有办法说好还是不好,这和夫妻性格有关。如果夫妻双方都赞同,价值观是统一的,生活的方式是可以的,哪就没有任何问题。但需要双方充分的商议之后做选择,做决定,而不是单方面的去做决定。另外,家庭模式也决定夫妻间的经济模式。其实家庭的生活模式是多元化的,男主内、女主外、男主外、女主内、男管钱、或者女管钱什么的,这些都和夫妻双方的性格、经济来源、工作状态、生活习性等有充分的关系的。实现经济AA制需要双方的生活模式一致才行。但是,就算夫妻间实现AA制,陈一也建议大家要注意:需要制定一些灵活的政策或者灵活的处事空间,不要绝对化处理,否则就太没有人情味了。要制定AA制的范围和时效,比如,有了孩子、老人、人际应酬什么的,这些都要考虑在内。