简介:摘要目的研究冻存对犬脂肪干细胞(ADSC)生物学特征及体外诱导分化能力的影响。方法2017年2月至5月,取自上海市第六人民医院动物实验室雄性6月龄比格犬腹股沟处脂肪组织,采用胶原酶消化法分离培养ADSC,设置冻存组和非冻存组,其中冻存组,将犬ADSC传至第2代,予以-196 ℃液氮冻存。3个月后细胞复苏,倒置显微镜观察细胞形态,细胞计数试剂盒(CCK-8)绘制生长曲线,流式细胞仪检测干细胞标志CD45、CD90、CD105表达,体外经成骨成脂及成肌等多向诱导分化。比较两组犬ADSC上述生物学特性指标差异,组间均数比较采用t检验,细胞生长曲线分析采用重复测量方差分析。结果犬ADSC原代培养4~5 d便可达95%细胞融合,细胞贴壁生长,呈长梭形。与非冻存组比较,冻存组犬ADSC形态相似,CCK-8检测两组细胞增殖能力差异无统计意义(F=1.233,P>0.05);冻存组犬ADSC表面标志CD45、CD90、CD105表达分别为(1.53±0.11)%、(97.52±1.61)%和(96.86±1.88)%,非冻存组犬ADSC表面标志CD45、CD90、CD105表达分别为(1.44±0.12)%、(96.31±1.76)%和(97.90±1.25)%,组间比较差异无统计意义(tCD45=0.958,tCD90=0.877,tCD105=0.798,均P>0.05)。与非冻存组比较,冻存组犬ADSC同样具有强大的多向分化能力,包括成肌、成脂和成骨分化。结论冻存后犬ADSC一般生物学特性及多向分化潜能无明显改变,能作为犬ADSC长期储存和运输的保存条件。
简介:摘要:新证券法提出全面实行注册制,但在实践中,目前仍是在科创板和债券市场运用。注册制需要配套高质量的信息披露以作支撑,本文对在科创板试点注册制的中国存托凭证的信息披露中所存在的问题进行完善建议的探讨,期望 CDR的信息披露能够成为中国证券市场高质量信息披露的开端。
简介:摘要目的探讨自体纯化冻存脂肪颗粒注射移植对面部年轻化的作用。方法2018年1月至2019年2月,衡阳美莱医疗美容医院美容外科收治64例(男9例,女55例,年龄35~64岁,平均43岁)面部老化萎缩凹陷的美容就医者,在其腹部或大腿用肿胀吸脂术抽吸脂肪,经过低速低压离心纯化脂肪颗粒。在-20 ℃下低温冻存24周,37 ℃下复温培养1 h后,组织学观察细胞完整性;检测脂肪细胞活力,注射移植填充面部老化凹陷区域。结果脂肪细胞冻存24周后细胞膜、细胞核仍清楚完整,细胞活力(88.89±1.23)%。64例(186个部位)中21例接受1次脂肪颗粒注射移植,35例接受2次脂肪颗粒注射移植,8例接受3次脂肪颗粒注射移植。术后随访6~24个月,面部老化症状明显改善,效果满意、持久,吸收率低,无感染、脂肪液化等并发症发生。临床疗效美容就医者及医者满意度均>82.81%,不满意的1.56%。结论自体纯化冻存脂肪颗粒注射移植对面部年轻化效果明显、吸收率低、可重复注射、易于美容就医者接受,值得临床应用。
简介:摘要目的本研究探索了梅毒抗体阳性标本经-20 ℃冻存后梅毒酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法的稳定性,并探索比较ELISA、化学发光微粒子免疫检测法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)、甲苯胺红不加热血清试验(syphilis toluidine red untreated serum test,TRUST)与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(treponema pallidum gelatin particle agglutination test,TPPA)的诊断价值。方法选取2014年3月至2015年3月我院通过ELISA法和(或)CMIA法初筛阳性标本483例血清标本,再用TPPA法检测。根据ELISA法检测的S/CO值将患者标本分别分为四组:A组(S/CO≥10),B组(10>S/CO≥5),C组(5>S/CO≥1),D组(S/CO<1,但TPPA为阳性)。结果A组标本冷冻前和冷冻后ELSIA方法检测结果与TPPA结果符合率差异无统计学意义(99%比99%,P>0.05);B组标本冷冻前和冷冻后ELSIA方法检测结果与TPPA结果符合率差异无统计学意义(97.84%比97.84%,P>0.05);C组标本冷冻前和冷冻后ELSIA方法检测结果与TPPA结果符合率差异无统计学意义(91.11%比92.22%,P>0.05);D组标本冷冻前和冷冻后ELSIA方法检测结果与TPPA结果符合率差异有统计学意义(0%比88.89%,P<0.05),并且D组ELISA、CMIA、TRUST检测结果与TPPA结果的符合率分别为0%、88.89%、61.11%,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA方法检测冻存前和冻存后血清阳性预测值差异无统计学意义(95.48%比96.03%,P>0.05);ELISA方法检测冻存前和冻存后敏感性差异无统计学意义(96.10%比99.57%,P>0.05);而检测的冻存前标本ELISA法结果和CMIA法结果的敏感性分别为96.10%、99.57%,均高于TRUST敏感性(40.69%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论-20 ℃冷冻对ELISA检测梅毒为阳性的标本无影响,而对ELISA检测梅毒为假阴性的标本有一定影响。检测梅毒螺旋体抗体时应关注ELISA、CMIA和TRUST检测方法的假阳性和假阴性标本,使用多方法联合检测可有效保证检测结果的稳定性和准确性。
简介:摘要目的研究人类胚胎冷冻保存时间超过6年复苏移植后胚胎的存活率、妊娠结局及对母体和子代安全性的影响。方法回顾性分析2008年1月至2012年12月在郑州大学第二附属医院生殖中心接受辅助生殖技术助孕并有冻存胚胎患者的资料,根据冻存时间是否超过6年分为长期冻存组(84例)和对照组(278例)。比较两组的临床资料,复苏胚胎的存活率,移植后的种植率、临床妊娠率、流产率、异位妊娠率、活产率以及妊娠期间母体并发症发生率和子代安全性。结果长期冻存组复苏移植时女方年龄高于对照组(P<0.05),两组间胚胎存活率比较差异未见统计学意义(P>0.05),但胚胎完全存活率低于对照组(52.49%比67.72%),P<0.05。两组种植率、临床妊娠率、流产率和活产率比较差异未见统计学意义(P>0.05)。妊娠期并发症和子代安全性比较差异未见统计学意义(P>0.05)。结论冻存6年以上的胚胎尚可获得良好的妊娠结局,但需考虑母体年龄增长可能引起的妊娠及围生期风险。
简介:摘要目的对自制冷冻片微型载体(Strawtop)法与麦管法冷冻保存人微量精液的冻存效果进行系统评价。方法采用前瞻性研究分析2018年5月1日至2018年6月30日期间于同济大学附属东方医院生殖医学中心行卵胞质内单精子显微注射(ICSI)助孕治疗的患者捐献的部分精液样本,比较自制Strawtop法与麦管法冷冻人精子复苏后的冷冻复苏率、DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)、超显微结构和受精能力与胚胎发育情况。结果Strawtop法冻存人精子的冷冻复苏率(46.8%±17.1%)显著高于麦管法(23.1%±13.7%,P=0.001);与冷冻前(18.9%±11.6%)相比,麦管法(33.5%±15.0%)冷冻精子复苏后的DFI显著增加(P=0.019),而Strawtop法冻融人精子的DFI(23.4%±11.7%)与冷冻前相比差异无统计学意义(P=0.375);Strawtop法对冷冻精子超显微结构的损伤低于麦管法;Strawtop法冻融精子、麦管法冻融精子和新鲜精子的正常受精率、卵裂率和受精后48 h(第2日)的优质胚胎率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Strawtop法冷冻人微量精液冷冻复苏率高于麦管法,复苏精子的损伤较小,且复苏后无需离心洗涤即可直接用于ICSI,具有较高的临床应用价值。