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  • 简介:1985年Cetus公司的Mullis发明的聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是现代分子生物学研究中的一项非常重要的技术,它可在短时间内在试管中获得数百万特异DNA序列的拷贝,从而很容易地对目的基因进行分析、鉴定以及其它操作。这一技术现已广泛应用于生物学的各研究领域。PCR的定量实质是核酸的体外扩增,当人们利用技术扩增出大量的特异DNA序列后,还必须对这些PCR产物进行定性或定量检测,特别是临床检验中,定量分析PCR产物可以为临床诊断、疗效观察等提供更为准确的信息。另外,在研究基因的表达调控研究中,经常利用RT-PCR定量检测某一特定的转录mRNA,因此,建立灵敏、准确、重复性好的PCR产物定量检测法是目前PCR及其相关技术研究的特点,电是定量PCR技术的基础。本文将对这一技术近年来的研究进展状况作一简要综述。

  • 标签: RT-PCR定量检测 PCR产物 技术进展 分子生物学研究 定量PCR技术 DNA序列
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  • 简介:摘要:PCR(聚合酶链式反应,polymerase chain reaction)在现代分子生物学分析和遗传学中具有不可撼动的根本性基石地位。它与分子克隆和DNA序列分析几乎构成了整个分子生物学的基础部分。在现代生物科技中,它的应用领域涵盖了方方面面,包括农业、医学、法学与食品科学等。现有PCR扩增技术受限于空间与成本,无法真正流水线处理,现提出一种集自动清洗,扩增与检测于一体的流路装置。

  • 标签: PCR扩增 流路装置 自动清洗
  • 简介:摘要近年来数字PCR技术发展迅速,与传统PCR技术相比数字PCR可以对核酸分子进行绝对定量检测,并且具有高准确、高灵敏的优点。广泛应用于分子生物学领域和临床检测上,在癌症早期诊断、产前诊断、感染性疾病的早期检测、器官移植后监测等方面都有着重要的作用。

  • 标签: 数字PCR技术 绝对定量 基因检测
  • 简介:摘要:PCR主要是指生物学的聚合酶链式反应,PCR实验技术虽然简单,但是该技术很容易受到各种因素影响,影响实验结果。基于此,本文对PCR实验技术的影响因素和对策展开研究,以供参考。

  • 标签: PCR实验技术 影响因素 对策
  • 简介:摘要:目的:探讨在微生物检验中PCR技术的应用价值。方法:选择医院2021年1-12月收治患者90例,均采集痰液或尿液标本进行PCT技术检验,分析检测结果,评价PCR检验的特异度、灵敏度。结果:该90例患者中痰液标本62份,检出大肠埃希菌计35.48%、铜绿假单胞菌计6.45%、肺炎克雷伯菌计19.35%;尿液标本28份中检出金黄色葡萄球菌14.29%。PCR检测特异度100.00%,102拷贝/ml核酸样本检测灵敏度为100.00%。结论:PCR技术在微生物检验中的应用能有效检出各类病原菌,诊断效能高。

  • 标签: 微生物检验 PCR技术 灵敏度 特异度
  • 简介:摘要病毒检测在病毒感染的预防、诊断、治疗及病毒性疫苗的质量控制等方面发挥着重要的作用。实时荧光定量PCR通过荧光信号实时检测目的基因扩增数量,是目前实验室最常用的的病毒检测技术,具有灵敏度高、检测快速、污染小等优点。此文对实时荧光定量PCR技术在病毒感染的快速诊断、病毒核酸定量检测和病毒型别的鉴定三个方面的应用进行阐述。

  • 标签: 定量聚合酶链反应 快速检测 核酸载量 基因分型
  • 简介:摘要 :改革开放以来 , 我国的经济快速发展 , 人民生活水平不断提高 , 人们越来越关注食品安全问题。在加入世贸组织之后,国际上也对我国食品出口的质量进行严格把关 。 自 PCR技术问世以来,因其灵敏、快速、操作简便的优点,在食品检测领域得到广泛应用。近年来,关于 PCR改进技术在食品检测中的应用研究越来越多。 本文主要就 PCR技术在食品检测中的应用予以讨论,旨在为相关工作者提供有益借鉴。

  • 标签: PCR技术 食品检测 应用
  • 简介:摘要:本文旨在介绍荧光定量PCR技术,并详细说明了其使用前的准备工作、操作流程和注意事项,为广大动物实验爱好者提供参考。

  • 标签: 动物实验检测 PCR技术
  • 简介:摘要:本文旨在介绍荧光定量PCR技术,并详细说明了其使用前的准备工作、操作流程和注意事项,为广大动物实验爱好者提供参考。

  • 标签: 动物实验检测 PCR技术
  • 简介:【摘要】目的:分析数字PCR及实时荧光定量PCR技术在新型冠状病毒感染核酸检测中的差异。方法:对本院2022年12月-2023年9月30日的100例疑似新型冠状病毒感染患者进行研究,以数字PCR及实时荧光定量PCR技术进行检测,分析两种技术的准确度、特异性与灵敏度。结果:两种技术检测方式的阳性例数、准确度与灵敏度差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在低病毒载量的样本中,数字PCR检测价值更高,提高敏感性,减少假阴性,对于初期感染者,快速精准将其隔离,对疫情防控起着决定性意义。

  • 标签: 数字PCR 实时荧光定量PCR 新型冠状病毒感染 检测 应用
  • 简介:【摘要】:实时荧光定量 PCR 技术是普通聚合酶链式反应技术基础上演变起来,一种灵敏度较高的核算定量技术。与常规 PCR 相比,它的不同之处在于其根据 PCR 产物中莹光信号的强度定量 , 不仅提高了反应的特异性和自动化程度,而且有效解决 PCR 污染等问题,实现了检测质量的飞跃 . 当前已经被广泛应用于医学诊断和环境监测多种领域的研究,本文对实时荧光定量 PCR 的原理,分类以及应用做一系统性综述。

  • 标签: 实时荧光定量 PCR 原理 应用
  • 简介:摘要目的探讨荧光定量PCR技术检测结核杆菌的方法及应用。方法建立检测结核杆菌的荧光定量PCR技术,并与培养法、涂片镜检法进行效果对比。结果本方法检测结核杆菌具有较高的特异性、敏感性和重复性。对120例结核标本进行检查,荧光定量PCR法阳性率高达52.50%,培养法涂阳性率达24.17%,片镜检法阳性率达15.00%。结论相对于传统的结核杆菌检查方法,荧光定量PCR技术具有高特异性,高敏感性等优势,对于结核病的诊断具有重要意义,值得临床推广应用。

  • 标签: 荧光定量PCR 结核杆菌 检测
  • 简介:【摘要】目的:研究PCR技术在乙型肝炎中检验的应用价值。方法:选取

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  • 简介:目的应用PCR检验技术在口岸进行鼠疫检测,以提高鼠疫诊断的准确性和灵敏度,建立适合于口岸鼠疫检测的快速诊断方法,提高鼠疫检测水平.方法首先,根据口岸地区样品的特点确定相应PCR检测方法,然后对样品进行PCR检测、鼠疫细菌学检验和反向间接血球凝集试验.结果形成了一套适合于口岸地区鼠疫PCR检测的方法,灵敏度为7cfu的鼠疫菌.PCR反应体系中以dUTP代替DTTp,加入UDG酶防止产物污染,对特异性和敏感性无影响.对在口岸地区采集的鼠类标本111份、进口旱獭皮张500份进行了PCR检测,并分别进行鼠疫细菌学、反向间接血球凝集试验.PCR检测出3份阳性鼠类标本,与鼠疫细菌学检验结果一致:对进口旱獭皮张的PCR检测和反向间接血球凝集试验均为阴性.结论经实验研究建立了一套完整的鼠疫PCR检测方法,本方法特异性和敏感性强、操作简便、快捷、成本较低,适合在口岸地区推广应用.

  • 标签: PCR技术 口岸 鼠疫 监测 细菌学检验 反向间接血球凝集试验
  • 简介:聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是一种在体外模拟自然DNA复制过程,用聚合酶催化物扩增核酸分子的新技术。由美国Cetus公司的KaryMullis于1984年发明,Saiki等人于1985年首先在《Science》杂志上完整地描述了PCR技术。应用PCR技术进行体外基因扩增,可使极微量的单拷贝特定核苷酸片段在数小

  • 标签: PCR技术 HBV感染 诊断 治疗 聚合酶链反应
  • 简介:摘要目的比较PCRHBV-DNA和ELISAHBsAg两种检测方法在检测内窥镜中HBV的检测情况,从而确定本次研究的试验方法。方法现场采集内窥镜各关键部位(镜身、孔道、活检钳)的样品207份,平均分成两份,按各自所用试剂盒的要求分别进行试验,比较两种试验的阳性检出率、一致性等试验评价指标。结果PCRHBV-DNA阳检率为27.54%、ELISAHBsAg阳检率为2.42%,经χ2检验,χ2=4.63P=0.031、一致性检验,kappa=0.089,P=0.008,由此说明两种检验方法在内窥镜中痕量的HBV的检测过程中有显著性差异。结论PCRHBV-DNA对与内窥镜中痕量的HBV的检测试验方法优于ELISAHBsAg方法,在本次调查研究中应该采用PCRHBV-DNA的检测方法。

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