简介:以分离筛选、鉴定的假单胞菌为研究材料,提取假单胞菌的基因组为模板基因.设计引物进行PCR扩增。扩增的条件为94℃预变性4min,98℃变性10S,58℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环,72℃复性10min。用试剂盒回收PCR产物,以PGEM—TEasyVector为载体。产生重组质粒,转化到大肠杆菌(E’coli)JM109细胞中,于LB平板上进行蓝白筛选阳性克隆。提取阳性克隆的质粒,电泳筛选滞后质粒,EcoRⅠ酶切验证后进行测序,检测弹性蛋白酶基因在JM109Ecoli细胞中的表达。结果表明:PCR扩增出1,67kh的基因片段。并成功克隆在EcoliJM109细胞中:挑取白斑提取的质粒,检测有滞后质粒,EcoRⅠ酶切检测到3.0kh的载体和1,67kb的基因片段;以滞后质粒为模板再次进行PCR扩增,扩增出1.67kb基因片段。证明该质粒为重组质粒,经上海博亚生物技术公司测序为1.67kh的基因片段。并在EcoliJM109细胞中表达。
简介:利用自制超声波转鼓,研究了在铬鞣初期或铬鞣末期施加超声波(23.7KHz)对铬鞣过程的影响.结果表明,超声波对铬鞣的影响主要体现在超声波对铬鞣初期的促进作用,即铬鞣初期施加超声波可以促进铬鞣剂的渗透和与皮胶原的结合,使革内铬含量高,革的Ts升高.鞣制末期施加超声波对铬鞣几乎无影响.从整个铬鞣过程来看,超声波对铬鞣的影响程度不大.用阳离子色谱法分析铬溶液的电荷组分的变化情况表明,超声波(20KHz)作用于不同碱度的硫酸铬溶液后,铬液电荷组分的种类和各组分的相对含量并没有发生明显的改变.因此超声波在铬鞣过程中并未改变铬鞣剂的分子结构,也未改变铬鞣剂与裸皮的结合方式,从而对铬鞣的结果影响不大.
简介:为获得超声辅助提取香薷挥发油的最佳工艺参数,采用Box-Behnken设计,以料液比、提取温度、超声时问为自变量,香薷挥发油的得率为因变量,对影响香薷挥发油提取工艺的因素进行了优选。结果表明:3个因子对香薷挥发油得率的影响大小依次为提取温度〉超声时间〉料液比,提取温度、超声时间对提取效果有极显著影响,料液比对提取效果有不显著影响,且交互作用都不显著,二次项都极显著。通过软件模拟优化后得到超声辅助提取香薷挥发油的最佳工艺参数为:液料比12.1mL/g,提取温度56.8℃和超声时间31min,香薷挥发油的得率为3.868%。Box-Behnken设计优选香薷挥发油的提取工艺,方法简单,预测性良好,对工业生产优化香薷挥发油的提取工艺提供了可行性依据。