简介：【目的】原核表达纯化人锌指蛋白（zincfingerprotein580,ZNF580）并制备抗人ZNF580单克隆抗体。【方法】将构建的重组质粒pET30a-ZNF580转化大肠杆菌BL21（DE3）,由异丙基-β-D-半乳糖苷（Isopropylbeta-D-galactosidase,IPTG）诱导表达并纯化目的蛋白。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备针对ZNF580的特异性单克隆抗体并通过ELISA和Westernblotting方法鉴定。【结果】含有该质粒的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19kDa,通过将Sp2/0细胞与免疫鼠的脾细胞融合获得了1株能稳定表达ZNF580抗体的杂交瘤细胞株（H4E4C5）,其分泌的单克隆抗体的IgG亚类IgG2b,ELISA检测腹水抗体效价为1：1.28×10~5,Westernblotting结果显示抗ZNF580单克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本实验成功表达并纯化了ZNF580蛋白并制备了抗ZNF580蛋白的单克隆抗体,为进一步研究锌指蛋白ZNF580的功能奠定了基础。

简介：【目的】研究过氧化氢（H2O2）对EA．hy926内皮细胞锌指蛋白580（zincfinger580，ZNF580）表达的影响。【方法】先以不同浓度H2O2作用内皮细胞EA．hy926，测定细胞上清中乳酸脱氢酶（1acticdehydrogenase，LDH）确定细胞的损伤程度。选择适宜的H2O2浓度作用细胞，在不同浓度和不同时间点提取总RNA和蛋白，以RT-PCR检测ZNF580的mRNA表达水平，同时westernblotting检测其蛋白表达差异。【结果】随着H2O2浓度的升高，LDH释放随之升高，不同浓度H2O2作用EA-hy926内皮细胞后，ZNF580在mRNA转录水平和蛋白水平的表达均有增加，并呈现浓度依赖的趋势。同样的浓度为100μmol／L的H2O2作用EA-hy926内皮细胞不同时间后，检测可知ZNF580mRNA和蛋白水平的表达增加，与对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】一定浓度和时间的外源性H，0，作用内皮细胞可促进ZNF580存一定程度表达上调。

简介：【目的】研究人锌指蛋白新基因ZNF580过表达对人脐静脉内皮细胞株EA.hy926血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）的表达及增殖能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】重组质粒pEGFP-ZNF580经LipofectamineTM2000脂质体转染法转染EA.hy926细胞,48h后荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在内皮细胞中的表达情况;应用半定量RT-PCR、Westernblotting及ELISE法检测转染前后内皮细胞ZNF580和VEGFmRNA、蛋白表达的变化;运用MTT实验检测转染前后内皮细胞增殖能力的改变。【结果】荧光显微镜下示融合蛋白ZNF580-EGFP在EA.hy926细胞核中表达;ZNF580基因过表达后,内皮细胞VEGFmRNA及蛋白的表达均上调（P〈0.05）,且其增殖能力显著升高（P〈0.01）。【结论】ZNF580可以调控EA.hy926细胞VEGF的表达,且ZNF580在内皮细胞增殖过程中具有重要的调节作用。

简介：【摘要】目的 研究湖北省麻城市泌尿系结石患者的结石成分及及构成情况。 方法 回顾性分析近两年泌尿系结石患者 580例，使用红外光谱自动分析仪对其结石成分及特征进行统计分析。 结果 男性多于女性：男 378例，女 202例；中年人结石例数最多，为 283例； 上尿路结石例数与下尿路结石例数，分别为487例与 93例；结石成分 以草酸钙结石所占比例最高，达到75.34%;其次为碳酸磷灰石，达到 12.58%。 结论 泌尿系结石患者结石成分以草酸钙及碳酸磷灰石为主，患者以中年男性多发，结石发病部位主要为上尿路结石。

简介：

简介：摘要目的分析研究白带常规与BV唾液酸酶联合检测在诊断菌性阴道病中的临床价值，为细菌性阴道病（BV）临床诊治和预后提供诊治依据。方法采用白带常规检测法与BV唾液酸酶检测法，同时选取580例女性阴道分泌物作为标本，并将检测结果进行统计分析，了解BV唾液酸酶法阳性患者检测结果及患者年龄段分布情况。结果580例患者BV唾液酸酶阳性41例（7.10%），清洁度Ⅲ度比例最高（68.3%），其次为清洁度Ⅱ度、混合感染、清洁度Ⅳ度，41～50岁人群检出率最高（16.3%）。结论白带常规与BV唾液酸酶联合检测用于诊断BV实用性高，具有重要的临床价值。

简介：【目的】内皮祖细胞（endothelialprogenitorcells,EPCs）参与血管内皮修复及血管新生,EPCs分化受多种转录因子调控网络的影响,本实验旨在研究新型C2H2锌指蛋白基因ZFP580对EPCs分化作用的影响。【方法】密度梯度离心法,分离培养大鼠骨髓源性EPCs,免疫荧光染色鉴定EPCs;腺病毒转染过表达ZFP580的EPCs,QPCR及Westernblotting检测ZFP580对EPCs分化的影响。【结果】细胞培养至7d时,Dil-acLDL/FITC-UEA-I双阳性细胞约占87.39%±2.98%。证实所培养细胞为EPCs。腺病毒转染技术获得过表达ZFP580的EPCs,ZFP580基因过表达促进成熟内皮表型CD31和vWF的表达。【结论】ZFP580基因过表达促进EPCs向成熟血管内皮细胞分化,提示ZFP580基因在EPCs分化过程中起重要的调控作用。