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  • 简介:采用SDS和CTAB两种方法分离提取金丝小枣基因DNA,并比较其提取效果.结果表明,改进后CTAB法可获得高质量、高得率基因DNA,可用于金丝小枣各种分子生物学研究.

  • 标签: 金丝小枣 基因组DNA 提取方法 分子生物学 CTAB
  • 简介:生物质谱是蛋白质学研究必不可少关键技术.近年来,生物质谱在鉴定通量、分辨率和灵敏度等方面均有质飞跃,从而促进了蛋白质研究各个领域飞速发展.本文就生物质谱技术原理、技术和仪器发展现状,及其在蛋白质学研究中应用进展作一简要综述.

  • 标签: 生物质谱 蛋白质组
  • 简介:mirVanaqRT-PCRmiRNA检测试剂盒扩增特定小RNA,可以精确定量小RNA表达水平。这个测定系统还可以通过传统RT-PCR或实时RT-PCR使用SYBRGreen1描述小RNA表达特征。引物也几乎涵盖人、大鼠、小鼠微小RNA。另外,引物特别含有小RNA-U6snRNA和5srRNA,它们可以控制输入变异性和样本标准化。

  • 标签: 小RNA 检测试剂盒 测定系统 引物 RT-PCR SNRNA
  • 简介:基因芯片又称DNA微阵列,分为cDNA微阵列和寡聚核苷酸微阵列.DNA微阵列技术是探索基两功能一种强有力工具.扼要介绍基因芯片、表达谱芯片技术和原理,以及基因芯片技术在肿瘤基因学中应用。

  • 标签: 基因芯片 DNA微阵列 表达谱芯片 肿瘤基因组学
  • 简介:就DNA序列信息本身讲,它几乎不能给我们提供特定基因功能的确定信息.基因功能研究包括一个给定基因在什么地方、什么时候表达以及基因实际上是做什么.因为这不可避免地涉及到许多基因产物同时相互作用和影响,所以功能研究是很复杂.

  • 标签: 人类基因组计划 基因治疗 基因型 治疗方法 遗传变异力 等位基因
  • 简介:简述了蛋白质概念、内容和意义,重点综述了现代质谱技术在蛋白质学中应用,主要包括蛋白质和肽段鉴定和定量、蛋白质翻译后修饰鉴定和蛋白质间相互作用检测等.随着新高质量精确度、分辨率、灵敏度和通量质谱仪出现,现代质谱技术在蛋白质学中应用将越来越广泛,并给蛋白质学研究带来新机遇.

  • 标签: 蛋白质组 蛋白质组学 生物质谱
  • 简介:传统蛋白质定量策略主要是通过双向凝胶电泳来进行相对定量.由于该方法不能对相对分子质量极高或极低、等电点极酸或极碱和含量低蛋白质以及膜蛋白质等进行有效分离和检测,所以已不能适应目前蛋白质研究深入发展需要.近年来,定量蛋白质发展主要是以同位素亲和标签试剂为代表、以质谱检测为核心稳定同位素化学标记方法.稳定同位素化学标记结合质谱技术,使定量蛋白质分析更趋简单、准确和快速,具有良好发展前景.本文对稳定同位素化学标记结合质谱技术在定量蛋白质学中研究进展进行了评述.

  • 标签: 稳定同位素 化学标记方法 定量蛋白质组学 生物质谱
  • 简介:腺相关病毒(AAV,AdenoassociatedVirus)是一类线状单股DNA微小病毒。腺相关病毒因共具有定点整合(19q13qter)及非病原性等特点而在基因转移与治疗中可望作为较为理想载体。其在宿主染色体DNA上整合需要辅助病毒共转染。根据Cavalier-Smith线状SSDNA分子复制模式,即复制过程中3′OH端作为引物在DNA聚合酶作用下合成另一姊妹股DNA分子,然后共价地连接到亲代未折叠5′端回纹末端而进行DNA复制。本文

  • 标签: 腺相关病毒 ITRs NEOMYCIN 染色体基因 DNA 末端反向重复
  • 简介:利用O-超家族芋螺毒素具有保守信号肽编码序列特性,采用RACE方法,对线纹芋螺O-超家族芋螺毒素cDNA进行克隆、序列测定,并经化学合成,获得一种新型高活性芋螺多肽毒素SO3。该肽含25个氨基酸残基,其序列为CKAAGKPCSRIAYNCCTGSCRSGKC-NH2,有三对二硫键。对其进行了正确折叠及活性筛选。结果表明,该肽折叠主峰对小鼠脑内给药100ng,可明显观察到小鼠颤抖现象,对小鼠有明显镇痛作用,而非正确折叠则无反应。

  • 标签: O-超家族芋螺毒素 线纹芋螺 SO3 折叠 活性
  • 简介:基因克隆一般分为定位克隆和表型克隆。表型克隆进展较快,主要有消减杂交、代表性差异分析法、mRNA差异显示、DNA转染法及抑制消减杂交法。抑制消减杂交法是1996年报道一种表型克隆新方法,是目前寻找差异表达基因较有效方法,较过去方法有许多先进之外。本文对此方法原理及应用作一详细介绍,并与其他方法作简单比较。

  • 标签: 抑制消减杂交 表型克隆 定位克隆
  • 简介:目前有关造血基因重组细胞因子不断出现,如EPO、TPO、G-CSF、SCF及多种白介素等等。如何评价这些细胞因子生物活性,已成为重要研究课题,基中对造血祖细胞增殖分化影响是一个重要技术途径。本文就常用几种体外培养体系及方法作一探讨,以提供检测基因重组细胞因子活性有效方法。①培养体系选择,大致分为二大类:琼脂培养法主要用于粒-巨噬系祖细胞CFU-GM;培养甲基纤维素法,用于CFU-E、BFU-E、

  • 标签: 生物活性 重组细胞因子 细胞培养方法 放射医学研究所 基因重组 医学科学院
  • 简介:用于防治器官移植排斥反应药物CsA发挥作用必须由体内受体蛋白亲环素(CyP)来介导。CyP是一个功能相关蛋白家族,具有肽基脯氨酸顺/反异构酶(PPIase)活性,能催化细胞内蛋白质折叠、装配和运输。CyP自身抗体与某些自身免疫病也有关系。亲环素A(CyPA)是免疫抑制剂CsA在体内主要受体蛋白。本研究对CyPA基因进行了克隆和序列测定,并构建了表达载体,在大肠杆菌中获得高水平表

  • 标签: 亲环素A 肠杆菌 基因的克隆 肽基脯氨酸顺 自身免疫病 表达载体
  • 简介:用PCR技术获得抗菌肽-X基因、TNFα基因,与温度诱导表达载体pRC连接成为重组表达载体,导入大肠杆菌TG1,通过温度诱导表达重组蛋白.将重组质粒转入不同表达菌中进行表达,经SDS-PAGE选出EcoliBL21(DE3)为最佳表达宿主菌.培养后,离心得菌体,经超声破碎离心得包涵体,溶解后用CNBr切割并透析,最后经CM52纤维素柱分离纯化得到有活性高纯度抗菌肽-X.

  • 标签: 抗菌肽—X基因 克隆 大肠杆菌 表达
  • 简介:EppendorfResearchFamily移液器包括固定体积,可调节体积,以及多通道等多种模式,同时还包括电动研究专用移液器。机械设计特征能够使每天工作部变得有效,舒适,并且不产生肌肉劳损。该系列移液器使用范围包括从0.1ul-5ml。扩大旋钮能有利于拇指进行操作。大分离式枪头排出器按钮能够降低分离枪头时需要压力,而扩大手柄则能够提高手部稳定性,并降低手部和上臂肌肉受到张力。经过放大后体积指示使体积设置更方便。

  • 标签: 移液器 Research 力学 FAMILY 机械设计 分离式
  • 简介:本文概述了实验动物分类、特点及其在医学生物学中应用。在医学生物学发展过程中,实验动物重要性已愈来愈被人们所认识。合理地选用实验动物对达到预定实验目的起着至关重要作用。

  • 标签: 医学研究 实验动物
  • 简介:根据已发表植酸酶基因phyA序列(GI:4815609和GI:22901877)设计引物,以米曲霉(AsperillusoryaeCohn,编号:ACCC30155)总DNA为模板,利用PCR扩增得到目的片段.将此片段克隆到表达载体pPIC9KEcoRⅠ酶切位点构建重组质粒,通过电转化方式将重组质粒转化毕赤酵母(Pichiapastoris).检测结果表明,植酸酶基因在毕赤酵母中得到了表达.

  • 标签: 米曲霉 植酸酶基因 PCR 毕赤酵母 基因表达 饲料添加剂
  • 简介:多不饱和脂肪酸(PUFA),尤其是n-3系PUFA,可以降低脂肪酸以甘油三酯形式沉积,同时促进脂肪酸氧化和葡萄糖合成糖原。其具体机制是PUFA通过激活过氧化物酶体活化增生因子受体α(PPARα)来控制氧化途径过程中基因表达,而其对脂肪合成途径中有关基因抑制则是通过降低能传递胰岛素和碳水化合物信息转录因子与DNA亲和力和转录因子核内丰度。尤其是PUFA抑制了类固醇空单元结合蛋白-1(SREBP-1)核内丰度和表达,降低了核因子Y(NF-Y)、Sp1和肝核因子-4(MNF-4)与DNA亲和力。

  • 标签: 多不饱和脂肪酸 过氧化物酶体活化增生因子α受体 类固醇调控单元结合蛋白-1 转录
  • 简介:丹麦地处北欧,临北海,东靠波罗海,南部与德国接壤,北与挪威、瑞典隔海相望,是高收入、高福利、高税收、高消费代表国家之一。在这片413万平方公里美丽富饶土地上,曾出现了十多位诺贝尔奖获得者,对世界科学发展和进步做出了突出贡献。在生物技术方面,该国生物技术研究开发能力已达到世界先进水平,在医药产业研究开发投入上位居欧洲第二,是欧洲三大生命科学中心之一,在蛋白质技术、生物信息技术、纳米技术、生物制品生产技术等部分领域居世界前列,是北欧地区生物技术强国。

  • 标签: 生物技术 北欧地区 生命科学中心 诺贝尔奖获得者 丹麦 蛋白质组技术