简介：摘要目的探讨M1型小胶质细胞源性外泌体（M1-exo）对氧糖剥夺/复氧后神经元损伤的影响，并研究其作用机制。方法取对数期生长的小鼠小胶质细胞BV2，加入100 μg/L脂多糖（LPS）和20 μg/Lγ-干扰素（IFN-γ）诱导小胶质细胞极化为M1表型，通过蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）、实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）、免疫荧光法鉴定M1型小胶质细胞。收取M1型小胶质细胞的上清液，用ExoQuick-TCTM试剂盒提取M1-exo，通过透射电镜及纳米颗粒粒径分析（NTA）观察外泌体形态，采用Western blotting法检测外泌体标记蛋白白细胞分化抗原（CD9、CD63）的表达。将生长良好的小鼠神经母细胞瘤细胞N2a分为6组：C组细胞常规培养；O组氧糖剥夺3 h后复糖复氧24 h制备N2a细胞氧糖剥夺/复氧损伤模型；E组的N2a细胞氧糖剥夺3 h后复糖复氧并与M1-exo共培养24 h；NC组、M组和I组分别构建阴性对照、过表达和敲低微小RNA-20a-5p（miR-20a-5p）的M1-exo，通过qPCR检测转染是否成功。NC组、M组和I组N2a细胞氧糖剥夺3 h后，与转染后的M1-exo共培养24 h后检测各项指标。采用细胞增殖检测试剂（CCK-8）法检测细胞活力，采用流式细胞术检测细胞凋亡，采用qPCR法检测miR-20a-5p表达。结果与M0型小胶质细胞相比，M1型小胶质细胞特异性标志物CD32和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）荧光强度及其mRNA和蛋白表达均明显升高〔CD32（荧光强度）：36.919±1.541比3.533±0.351，CD32 mRNA（2-ΔΔCt）：4.887±0.031比1.003±0.012，CD32/β-actin：2.663±0.219比1.000±0.028；iNOS（荧光强度）：29.513±1.197比7.933±0.378，iNOS mRNA（2-ΔΔCt）：4.829±0.177比1.000±0.016，iNOS/β-actin：1.991±0.035比1.000±0.045；均P<0.01〕，证明M1型小胶质细胞被成功激活。电镜下可见M1-exo为圆形或卵圆形囊泡状小体，并有明显膜性结构，直径范围约100 nm。Western blotting结果显示，M1-exo表达特异性CD63和CD9蛋白。与C组比较，O组N2a细胞活力明显下降，细胞凋亡率和miR-20a-5p的表达明显升高〔细胞活力（A值）：0.540±0.032比1.001±0.014，细胞凋亡率：（19.857±0.910）%比（13.508±0.460）%，miR-20a-5p（2-ΔΔCt）：5.508±0.291比1.033±0.101，均P<0.01〕。与O组比较，E组N2a细胞活力明显下降，细胞凋亡率和miR-20a-5p表达进一步升高〔细胞活力（A值）：0.412±0.029比0.540±0.032，细胞凋亡率：（31.802±0.647）%比（19.857±0.910）%，miR-20a-5p（2-ΔΔCt）：8.912±0.183比5.508±0.291，均P<0.01〕，说明M1-exo进一步加重了氧糖剥夺/复氧后N2a细胞的损伤。与E组比较，M组N2a细胞活力明显下降，细胞凋亡率和miR-20a-5p表达明显升高〔细胞活力（A值）：0.311±0.028比0.412±0.029，细胞凋亡率：（36.343±0.761）%比（31.802±0.647）%，miR-20a-5p（2-ΔΔCt）：32.348±0.348比8.912±0.183，均P<0.01〕；而I组N2a细胞活力明显升高，细胞凋亡率和miR-20a-5p表达明显下降〔细胞活力（A值）：0.498±0.017比0.412±0.029，细胞凋亡率：（26.437±0.793）%比（31.802±0.647）%，miR-20a-5p（2-ΔΔCt）：6.875±0.219比8.912±0.183，均P<0.01〕。E组与NC组N2a细胞活力、细胞凋亡率和miR-20a-5p的表达比较差异均无统计学意义。结论M1-exo加重氧糖剥夺复氧后神经元的损伤，这一损伤作用可能与其携载的miR-20a-5p有关。

简介：摘要目的评价外泌体在M2型小胶质细胞减轻星形胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤中的作用。方法体外培养原代星形胶质细胞至对数生长期，采用随机数字表法分为5组(n＝14)：对照组(C组)、氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)、氧糖剥夺-复糖复氧＋M2型小胶质细胞组(O＋M2组)、氧糖剥夺-复糖复氧＋M2型小胶质细胞＋GW4869组(O＋M2＋G组)和氧糖剥夺-复糖复氧＋M2型小胶质细胞源性外泌体组(O＋M2-E组)。C组在正常条件下培养，O组氧糖剥夺4 h，复糖复氧24 h；O＋M2组氧糖剥夺4 h，复糖复氧时加入M2型小胶质细胞的上清液2 ml培养24 h；O＋M2＋G组氧糖剥夺4 h，复糖复氧时加入经外泌体抑制剂GW4869 10 μmol/L处理后的M2型小胶质细胞上清液2 ml培养24 h；O＋M2-E组氧糖剥夺4 h，复糖复氧时加入M2型小胶质细胞源性外泌体10 μg/ml培养24 h。光镜下观察细胞形态变化，采用CCK-8法检测细胞活力，qRT-PCR法检测水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达水平，Western blot法检测AQP4及胀亡蛋白porimin的表达水平。结果与C组相比，其余4组细胞活力下降，AQP4及其mRNA、porimin表达上调(P<0.05)，细胞发生水肿；与O组相比，O＋M2组和O＋M2-E组细胞活力升高、AQP4及其mRNA和porimin表达下调，O＋M2＋G组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)，细胞水肿程度减轻；与O＋M2组相比，O＋M2＋G组细胞活力下降，AQP4及其mRNA和porimin表达上调(P<0.05)，O＋M2-E组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)，细胞水肿程度增强。结论M2型小胶质细胞可通过外泌体减轻星形胶质细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤。

简介：摘要对于体外膜氧合（ECMO）辅助患者的神经功能改变，目前的认知还远远不足，前瞻性研究的难度也非常大。脑梗死、脑出血等的诊断需要依靠特殊的辅助检查，如果只对少部分患者进行这些检查，诊断率和实际发生率之间就会具有较大差异。从应对神经系统并发症的方法看，目前尚无针对ECMO辅助患者神经系统并发症的特异性治疗手段。当前阶段，对ECMO辅助患者神经系统并发症的预防大于治疗，需要充分理解ECMO造成的病理生理改变，对有ECMO适应证的患者及早进行辅助治疗，在ECMO转机中做好每一个细节，加强监测，及时撤机。

简介：摘要目的评价miR-205-3p在氧糖剥夺-复氧复糖(OGD/R)星形胶质细胞胀亡中的作用及其与水通道蛋白4(AQP4)的关系。方法体外培养原代星形胶质细胞至对数生长期，采用随机数字表法分为5组(n＝16)：对照组(C组)、OGD/R组(O组)、OGD/R+miR-205-3p模拟物组(M组)、OGD/R+miR-205-3p抑制剂组(I组)和OGD/R+阴性对照组(NC组)。C组在正常条件下培养，O组于37 ℃厌氧孵育箱(含94%N2、1%O2和5%CO2)氧糖剥夺4 h，于复氧复糖24 h；M组、I组和NC组分别转染miR-205-3p模拟物、抑制剂和阴性对照后，氧糖剥夺4 h，复氧复糖24 h。采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术分析细胞损伤及胀亡情况，qRT-PCR法检测AQP4 mRNA表达，Western blot法检测AQP4及porimin的表达。结果与C组相比，O组miR-205-3p表达下调，细胞活力降低，细胞损伤率及胀亡率升高，AQP4及其mRNA和porimin表达上调(P<0.05)；与O组相比，M组miR-205-3p表达上调，细胞活力升高，细胞损伤率及胀亡率降低，AQP4及其mRNA和porimin表达下调，I组miR-205-3p表达下调，细胞活力降低，I组细胞损伤率及胀亡率升高，AQP4及其mRNA和porimin表达上调(P<0.05)，NC组差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-205-3p参与了OGD/R星形胶质细胞胀亡的过程，与调控AQP4表达有关。

简介：摘要目的评价miR-20a-5p在M1型小胶质细胞加重氧糖剥夺-复糖复氧(OGD/R)后神经元损伤中的作用及其与线粒体融合蛋白2(MFN2)的关系。方法将生长良好的BV2小胶质细胞(M0型)用脂多糖(100 ng/ml)和干扰素-γ(20 ng/ml)诱导小胶质细胞极化为M1表型，并通过qRT-PCR和免疫荧光法进行鉴定。将生长良好的N2a细胞采用随机数字表法分为6组(n＝6)：对照组(C组)、OGD/R组(OGD/R组)、M0型小胶质细胞共培养组(M0组)、M1型小胶质细胞共培养组(M1组)、转染miR-20a-5p抑制剂组(I组)和阴性对照组(NC组)。C组细胞常规培养；OGD/R组氧糖剥夺3 h，复糖复氧24 h制备N2a细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤模型；M0组氧糖剥夺3 h，复糖复氧时与M0型小胶质细胞共培养24 h；M1组氧糖剥夺3 h后复糖复氧时与M1型小胶质细胞共培养24 h；I组和NC组分别将转染试剂miR-20a-5p抑制剂和阴性对照miRNA转染至M1型小胶质细胞后，将N2a细胞氧糖剥夺3 h，复糖复氧时与转染后的M1型小胶质细胞共培养24 h。采用CCK-8法测定细胞活力，测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量，采用qRT-PCR法检测miR-20a-5p和MFN2 mRNA的表达，采用Western blot法检测MFN2表达。结果与C组比较，其余5组细胞活力降低，LDH漏出量增加，MFN2及其mRNA表达下调，OGD/R组、M0组和M1组miR-20a-5p表达上调，I组miR-20a-5p表达下调(P<0.05)；OGD/R组与M0组细胞活力、LDH漏出量、miR-20a-5p、MFN2及其mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。与OGD/R组和M0组比较，M1组细胞活力下降，LDH漏出量增加，MFN2及其mRNA表达下调，miR-20a-5p表达上调(P<0.05)；与M1组比较，I组细胞活力增加，LDH漏出量下降，MFN2及其mRNA表达上调，miR-20a-5p表达下调(P<0.05)。结论M1型小胶质细胞加重N2a细胞OGD/R损伤的机制可能与M1型小胶质细胞miR-20a-5p表达上调抑制N2a细胞MFN2表达有关。

简介：摘要目的探讨冠状动脉旁路移植术(CABG)后应用股动静脉体外膜肺氧合(VA-ECMO)辅助患者的远期疗效，量化心脏术后VA-ECMO患者的生存结局，识别远期死亡的危险因素。方法回顾性连续纳入2012年6月至2016年12月期间在北京安贞医院心脏外科ICU因单独CABG后心源性休克接受VA-ECMO治疗的108例患者，其中男84例，女24例；中位年龄62(55，67)岁，中位体质量指数25(23，27)kg/m2。37例(34%)有左主干病变，56例(52%)行不停跳CABG。按照ECMO后3年生存结局分为生存组(35例)和死亡组(73例)，对比分析两组患者各临床指标差异，Cox回归分析识别ECMO后3年死亡的相关风险因素。结果108例中，65例(60%)成功脱离ECMO，49例(45%)生存出院，35例(32%)生存至ECMO撤机后3年。中位ECMO辅助时间、ICU滞留时间、住院时间分别为4(3，5)天、8(5，12)天、20(13，29)天。多因素Cox回归分析结果显示，与ECMO后3年死亡独立相关的因素包括高龄(HR＝1.06，95%CI：1.03~1.10，P<0.001)、左主干病变(HR＝1.62，95%CI：1.00~2.60，P＝0.048)及正性肌力药物评分(HR＝1.09，95%CI：1.03~1.17，P＝0.007)。本组年龄≥60岁、左主干病变及正性肌力药物评分>60分的模型曲线下面积为0.88(95%CI：0.80~0.95)，优于SOFA评分0.80(95%CI：0.71~0.89)。结论心脏手术后VA-ECMO患者的整体生存率较低，但生存出院的VA-ECMO患者远期预后良好。高龄、左主干病变及正性肌力药物评分是ECMO撤机后3年内死亡的独立风险因素。

简介：摘要目的对比无创通气与经鼻高流量氧疗(HFNC)治疗COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭的临床疗效。方法选取北京大学首钢医院2017年4月至2018年4月收治的120例住院COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者进行回顾性分析，按随机数表法分为HFNC组与无创通气组，各60例。其中HFNC组有2例出院后失访，最终58例进入统计分析。HFNC组采取常规综合性治疗＋HFNC，无创通气组采取常规综合性治疗＋无创正压通气。比较2组入院时、治疗2 h及3 d后的血氧饱和度(SpO2)、动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、呼吸频率(RR)、心率(HR)、动脉血pH值、插管率、治疗失败率、病死率、鼻面部皮损发生率、总通气时间、ICU住院时间、总住院时间、气道护理干预次数。结果2组入院时的SpO2、PaO2、PaCO2、RR、HR、动脉血pH值的差异无统计学意义(P>0.05)；治疗2 h和3 d后，2组的SpO2、PaO2、动脉血pH值均较入院时升高，PaCO2、RR、HR均较入院时降低(P<0.05)。治疗2 h和3 d后，HFNC组的SpO2、PaO2、动脉血pH值高于同期无创通气组，PaCO2、RR与HR低于同期无创通气组(P<0.05)。HFNC组插管率与鼻面部皮损率分别为12.07%与5.17%，低于无创通气组的26.67%与18.33%(P<0.05)。2组治疗失败率与病死率的差异无统计学意义(P>0.05)。HFNC组通气时间、ICU住院时间、总住院时间与气道护理干预次数均低于无创通气组(P<0.05)。结论HFNC可有效缓解COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者的临床症状，改善其氧合状况，降低插管率，缩短住院时间，且舒适度更高，利于减少鼻面部皮损，利于患者耐受，易被患者接受。

简介：摘要：随着经济的健康发展，人们对建筑工程的要求越来越高，为了满足人们日益增长的物质精神的需求，建筑工程需要不断提升自身的建筑水平，不断完善优化建筑体系，就需要做好建筑工程中机电安装的工作，重视机电安装可能潜在的质量问题，提升机电一体化安装的质量，保障建筑工程更好地适应当代社会的发展。

简介：摘要目的探讨静脉留置针输液、采血一体化技术在小儿外科急诊患者中的应用效果。方法选取急诊患儿850例，随机分为观察组和对照组。对照组采用传统方法，静脉采血与留置针静脉输液分开操作；观察组采用静脉留置针输液、采血一体化技术。结果与对照组相比，观察组提高了急诊患儿采血、输液两项操作的一次性成功率，缩短了总操作时间，同时家长满意度也得到了提高，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论静脉留置针输液、采血一体化技术避免了对急诊患儿的反复穿刺，减轻了患儿痛苦，减少了护士工作量，提高了家长满意度，增进了护患关系，为急诊诊断和治疗的快速、有效、顺利进行提供了保证。

简介：【摘要】目的 分析在结核病预防控制过程中应用“三位一体”服务模式的效果。方法 本次研究于本院随机抽取了92例2020年2月-2021年2月接诊的结核病初诊患者进行，按照电脑排序均分为2组，各46例。其中，采取常规防控模式的为参照组，应用“三位一体”服务模式的为研究组，将不同方案下的效果进行对比。结果 患者于研究组方案下发病转诊用时及诊断报告用时均更低，对比差异明显（P＜0.05）。患者于与研究组方案下痰菌转阴率更高、不良反应更低，对比差异明显（P＜0.05）。 结论 在结核病预防控制过程中应用“三位一体”服务模式能够明显缩短诊疗用时，促进疾病转阴，减少患者的不良反应，适合于临床中应用。

简介：摘要目的评价外泌体在M1型小胶质细胞诱发神经元损伤中的作用。方法将生长良好的BV2小胶质细胞加入脂多糖100 ng/ml和干扰素-γ 20 ng/ml诱导小胶质细胞极化为M1表型。收集M1型小胶质细胞上清液，提取外泌体。将生长良好的N2a细胞采用随机数字表法分为4组(n＝24)：对照组(C组)、M1型小胶质细胞组(M组)、外泌体组(E组)和外泌体抑制剂+M1型小胶质细胞组(G+M组)。C组常规培养24 h；M组加入M1型小胶质细胞上清液培养24 h；E组加入M1型小胶质细胞源性的外泌体培养24 h；G+M组于M1型小胶质细胞加入外泌体抑制剂GW4869培养24 h后，取上清液，加入到N2a细胞中培养24 h。采用CCK-8法检测N2a细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，qRT-PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达，Western blot法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。结果与C组比较，其余3组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，Bcl-2及其mRNA表达下调，Bax及其mRNA表达上调(P<0.05)；与M组比较，G+M组细胞活力升高，细胞凋亡率下降，Bcl-2及其mRNA表达上调，Bax及其mRNA表达下调(P<0.05)，E组和M组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论M1型小胶质细胞可通过外泌体介导神经元损伤。

简介：摘要目的了解回肠造口患者焦虑抑郁、自我护理能力、生活质量情况以及患者造口并发症的发生情况。同时探索医护一体化工作模式对回肠造口患者焦虑抑郁情绪、出院后的生活质量、自我护理能力及造口并发症等方面的影响程度。方法选取2018年12月～2019年6月在青岛大学附属医院行回肠造口术的100例中低位直肠癌患者为试验对象，按照随机数字表法将入组的患者随机分成试验组（n=50）和对照组（n=50），其中对照组给予常规护理，试验组给予医护一体化护理。干预时间从入院时起至术后3个月。测定两组患者的焦虑抑郁评分、自我护理能力评分及生活质量评分，并观察患者造口相关的并发症情况。结果试验组在自我护理能力、生活质量及焦虑和抑郁方面均好于对照组，对照组的造口并发症的发生率明显高于试验组。结论医护一体化工作模式可以显著提高患者的自我护理能力；改善患者生活质量；缓解患者的焦虑抑郁等负性情绪，显著降低患者造口并发症的发生率。

简介：摘要目的利用神经突方向离散度和密度成像(neurite direction dispersion and density imaging，NODDI)分析阿尔兹海默病(Alzheimer's disease，AD)和遗忘型轻度认知障碍(amnestic mild cognitive impairment，aMCI)患者双侧海马微观结构改变，为AD的发病机制提供更多信息，并以此探究NODDI技术对AD和aMCI的临床价值。材料与方法招募15例aMCI患者、20例AD患者与20例正常对照(normal contral，NC)进行前瞻性NODDI扫描，利用MRIcro软件测量三组双侧海马神经突密度指数(neurite density index，NDI)、神经突方向离散度指数(orientation dispersion index，ODI)、各向同性水分子体积分数(volume fraction of isotropic water molecule，Viso)，三组间各参数利用单因素方差分析比较差异性，并用LSD检验组间差异性，对于有差异的参数，采用Spearman相关分析差异参数与简易智能状态检查量表(Mini-Mental State Examination，MMSE)评分和蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment，MoCA)评分的相关性，获取相关系数r。结果与NC组相比，aMCI组和AD组双侧海马NDI值和ODI值明显低于NC组，差异具有统计学意义(P＜0.001)，Viso值显著高于NC组，差异也具有统计学意义(P＜0.001)。aMCI组和AD组再进行组间比较，AD组Viso值显著高于aMCI组，差异有统计学意义(P＜0.001)，而NDI值和ODI值差异无统计学意义(P＞0.05)。相关性分析：左侧海马NDI值(r＝0.656，P＜0.001)与MMSE评分正相关最强，左侧Viso值(r＝-0.690，P＜0.001)与MMSE评分负相关最强；同时，左侧海马NDI值(r＝0.632，P＜0.001)与MoCA评分正相关最强，左侧Viso值(r＝-0.629，P＜0.001)与MoCA评分负相关最强。结论aMCI阶段和AD阶段双侧海马神经突数量、体积和排列复杂程度都有显著降低，为探究AD的发病机制提供了更多的参考数据。同时，aMCI向AD进展的过程中，双侧海马Viso值有可能成为重要评估指标，对aMCI和AD的鉴别、随访和评估预后具有重要价值。