简介：摘要目的研究低氧刺激慢性鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）与正常鼻黏膜上皮细胞炎性因子的变化与异同，探讨其在CRSwNP发病机制中的作用。方法选择2015年6月至2018年1月在吉林大学中日联谊医院就诊的68例CRSwNP患者，其中男性36例，女性32例，年龄（45.2±12.5）岁（x¯±s，下同），患者的鼻息肉黏膜纳入慢性鼻窦炎鼻息肉组（CRS-NP组），下鼻甲黏膜纳入慢性鼻窦炎下鼻甲组（CRS-IT组），并根据组织病理学结果进一步分成嗜酸粒细胞浸润及非浸润两种类型，即嗜酸粒细胞浸润性鼻息肉组（Eos-NP组，n=34）、非嗜酸粒细胞浸润性鼻息肉组（Non-Eos-NP组，n=34）、嗜酸粒细胞浸润性鼻息肉患者的下鼻甲组（Eos-IT组，n=20）和非嗜酸粒细胞浸润性鼻息肉患者的下鼻甲组（Non-Eos-IT组，n=20）；同期25例鼻窦囊肿或鼻中隔偏曲患者的下鼻甲黏膜作为对照组（n=25），其中男性14例，女性11例，年龄（42.8±10.2）岁。免疫组织化学染色分析各组黏膜上皮组织中白细胞介素（IL）17A、干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）与乏氧诱导因子（hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）的表达情况。酶联免疫吸附试验检测低氧刺激0、24和48 h后各组原代鼻黏膜上皮细胞分泌IL-17A、IFN-γ和TNF-α的差异；免疫荧光、固态光源高内涵与免疫印记实验检测原代鼻黏膜上皮细胞HIF-1α的表达情况。应用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析，采用双向方差分析作为主要统计学方法。结果免疫组织化学染色结果显示，IL-17A和TNF-α在对照组中表达最高（光密度值分别为0.37±0.03、0.53±0.02），IFN-γ和HIF-1α在Eos-IT组中表达最高（光密度值分别为0.47±0.03、0.39±0.02）。未接受低氧刺激时，IL-17A与TNF-α在对照组中水平较低；低氧刺激48 h后，对照组的IL-17A与TNF-α分泌量明显高于其他各组。未接受低氧刺激时，Eos-NP组分泌的IFN-γ明显高于对照组［（13.7±1.3）pg/ml比（11.1±1.6）pg/ml，P<0.05］；低氧刺激48 h后，IFN-γ在对照组和Eos-NP组中的分泌量没有显著区别。对照组与CRS-IT组表达的HIF-1α随低氧时间延长而增加，Eos-NP组与Non-Eos-NP组表达的HIF-1α随低氧时间延长而减少。对照组与CRS-IT组HIF-1α主要表达于鼻黏膜上皮细胞的细胞质内，CRS-NP组HIF-1α主要表达于鼻黏膜上皮细胞的细胞核内。结论低氧刺激下，CRSwNP患者的鼻息肉、下鼻甲与正常鼻黏膜上皮细胞中IL-17A、TNF-α、IFN-γ的分泌以及HIF-1α的表达水平存在差异，且呈现不同的亚细胞定位，提示其可能参与了CRSwNP发病相关基因的转录与调控。

简介：摘要目的通过对季节性与常年性变应性鼻炎（AR）患者鼻黏膜上皮细胞的基因表达进行转录组测序及生物信息学分析，获得季节性AR与常年性AR鼻黏膜上皮细胞基因表达的差异。方法体外培养人鼻黏膜上皮细胞系（human nasal epithelial cells，HNEpC），分别给予100 μg/ml 蒿（mugwort）或户尘螨（house dust mite，HDM）提取物处理24 h，提取细胞总RNA，实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）检测细胞因子白细胞介素（IL）6、IL-8、IL-33以及胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin，TSLP）的表达。2019年11月至2020年11月，就诊于吉林大学中日联谊医院耳鼻咽喉头颈外科的季节性AR、常年性AR患者以及健康对照者各3例，体外培养患者原代鼻黏膜上皮细胞，给予相应过敏原处理24 h，提取细胞总RNA进行转录组测序，对结果进行生物信息学分析。以SPSS 22.0对数据进行统计学分析。结果qPCR结果显示，蒿提取物与HDM提取物处理的HNEpC细胞因子IL-6、IL-8、IL-33以及TSLP变化趋势相同。而对季节性AR、常年性AR患者与健康对照者鼻黏膜上皮细胞转录组测序分析发现，二者受到相应过敏原处理后生物学过程及信号通路存在差异。基因本体（gene ontology，GO）富集分析显示，蒿过敏AR患者差异表达基因（differentially expressed genes，DEG）主要富集在氧化还原过程、凋亡负向调控过程、细胞黏附过程；HDM过敏AR患者DEG则主要富集在细胞黏附、细胞增殖的负向调控及药物反应的生物学过程中。京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）信号通路富集分析显示，蒿过敏AR患者DEG在花生四烯酸代谢、p53信号通路及转化生长因子β（TGF-beta）信号通路中存在显著富集，而HDM过敏AR患者DEG主要富集在细胞周期、Fanconi贫血通路及DNA复制信号通路。基因探针富集分析（Gene Set Enrichment Analysis，GSEA）显示，蒿过敏AR患者在炎性反应、肿瘤坏死因子/核因子κB（TNF-α/NF-κB）信号通路、IL-2/STAT5信号通路显著上调，可能促进炎性反应；HDM过敏AR患者在G2M、E2F、MYC显著下调，可能抑制细胞增殖。蛋白质相互作用网络显示，TNF与CDK1分别为蒿、HDM过敏AR患者蛋白质相互作用网络的中心，是有最多相互作用的蛋白。结论季节性AR与常年性AR可能通过影响鼻黏膜上皮细胞的不同生物学过程及信号通路，从而导致AR的发生发展存在差异。

简介：摘要目的验证慢性鼻-鼻窦炎（CRS）根据组织嗜酸性粒细胞（eosinophil，Eos）浸润程度进行分型的可行性。分析嗜酸性粒细胞型慢性鼻-鼻窦炎（ECRS）与非嗜酸性粒细胞型慢性鼻-鼻窦炎（NECRS）两组病例临床症状、外周血Eos百分比（Eos%）、影像学变化及预后等临床特点。方法纳入符合CRS诊断标准的330例研究对象，以组织Eos%≥15%将病例分为ECRS组（n=153）和NECRS组（n=177），比较和分析两组病例的相关特点，SPSS 22.0进行统计学分析。结果①ECRS组外周血Eos%显著高于NECRS组，组织Eos%与外周血Eos%呈正相关；②ECRS组鼻窦CT病变程度总分、前后组筛窦评分差异具有显著性（P<0.05）；③ ECRS组全组鼻窦累及率、后组筛窦及上颌窦累及率明显高于NECRS组，差异具有统计学意义（P<0.05）；④FESS术后1年评价远期疗效，ECRS组患者术后鼻塞、流涕、头面部胀痛及嗅觉障碍评分均明显低于术前症状评分（P<0.01），NECRS组患者术后除头面部胀痛无缓解（P>0.05）外，其余指标评分均低于术前各症状评分（P<0.05）。结论CRS可按组织Eos浸润程度进行分型，ECRS的鼻窦病变范围及程度较重，更易罹患全组鼻窦炎，其中筛窦病变程度最重，后组筛窦及上颌窦最易受累。外周血Eos%与组织Eos%呈正相关，且在ECRS病例中显著升高，可作为术前CRS分型的参考指标。