简介：摘要目的观察HO-1/CO/PPAR-γ信号通路在小鼠动静脉内瘘内膜增生病理损害中的变化规律。方法选取雄性野生型小鼠随机分为模型组及对照组，每组18只。应用显微外科技术建立小鼠颈动静脉内瘘模型(模型组)，对照组仅做手术切口缝合。术后21天使用过量戊巴比妥钠处死小鼠，获取血液及病理标本。应用全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、脂蛋白α、总胆红素水平；HE染色检测血管壁变化；应用分子染色方法对标记的活性氧(reactive oxygen species，ROS)进行检测；应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)测定目标基因血红素加氧酶-1(heme oxygenase，HO-1)、过氧化物酶增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferators-activated receptors-γ，PPAR-γ)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9，MMP-9)的mRNA水平；应用Western blot法测定目标基因HO-1、PPAR-γ及MMP-9的蛋白表达；应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法测定HO-1/CO/PPAR-γ信号通路下游因子转化生长因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)、白细胞介素(interleukin，IL)-1β、IL-8表达水平。结果模型组小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和总胆红素较对照组明显降低，差异具有统计学意义[mmol/L：(3.45±0.32)比(4.03±0.16)，(1.62±0.42)比(2.06±0.35)，(3.87±0.30)比(5.11±0.26)，(0.45±0.04)比(0.65±0.09)，(11.28±1.73)比(13.47±0.87)，t值分别为－6.88、－3.41、－13.25、－8.62和－4.80，P值均<0.05]。HE染色提示，模型组小鼠静脉壁内膜厚度较对照组明显增厚，血管壁中活性氧ROS水平较对照组明显升高，差异具有统计学意义[EU/mg：(99.11±6.34)比(89.71±8.41)，t＝3.79，P<0.05]。与对照组相比，模型组小鼠HO-1/CO/PPAR-γ信号通路目标基因及蛋白HO-1、PPAR-γ 、MMP-9 mRNA表达明显升高，差异具有统计学意义[目标基因：(1.02±0.69)比(7.17±2.16) ，(0.96±0.04)比(6.75±0.24) ，(0.61±0.35)比(1.02±0.03) ，t值分别为11.51、100.96和4.95，P值均<0.05；目标蛋白：(0.07±0.02)比(0.41±0.01) ，(0.27±0.04)比(0.35±0.05) ，(0.12±0.02)比(0.45±0.08) ，t值分别为81.43、5.19和17.39，P值均<0.05]。与对照组相比，模型组小鼠HO-1/CO/PPAR-γ信号通路下游炎性因子TGF-β、IL-1β、IL-8分泌明显升高，差异有统计学意义[pg/mL：(3.52±2.92)比(27.46±2.70) ，(16.78±0.60)比(38.54±2.53) ，(35.20±1.95)比(101.71±7.75) ，t值分别为25.53、35.55和35.31，P值均<0.05]。结论HO-1/CO/PPAR信号通路参与了小鼠动静脉内瘘血管内膜增生发生发展过程，并通过提高目标基因、目标蛋白的表达水平，增强相关炎性因子的释放等途径保护内膜功能，减轻血管的损伤。

简介：摘要目的构建小鼠颈内动静脉内瘘（arteriovenous fistula，AVF）模型，筛选AVF内膜增生狭窄过程中的差异表达基因，分析研究参与AVF内膜增生狭窄的异常表达信号通路及作用机制。方法选取雄性C57BL/6小鼠46只，按简单随机法分为AVF组和假手术组，每组23只。AVF组行小鼠颈内AVF成形术，假手术组分离右侧颈外静脉、颈总动脉后缝合切口。应用转录组学可逆链终止物和合成测序法测定AVF内膜增生狭窄小鼠全基因组序列，建立微阵列数据集；应用基因芯片数据分析多重假设检验校正（Benjamini & Hochberg法）筛选AVF增生狭窄过程中的差异表达基因；利用R语言富集分析筛选AVF内膜增生狭窄过程中的差异表达基因，并对差异表达基因及信号通路进行基因本体（gene ontology，GO）分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析；应用多样性增量分析BUSCA软件进行AVF增生狭窄差异表达基因亚细胞定位；应用STRING数据库及Cytoscape软件进行差异表达基因的蛋白网络互作可视化分析。结果AVF组造模成功21只，失败2只，故最终AVF组21只，假手术组亦仅执行手术操作21只。小鼠颈内AVF模型创新采用连续-间断缝合法，提高了此模型建模的成功率。差异基因测序比对分析显示，AVF增生狭窄过程中差异表达基因2 514个，其中上调基因1 323个，下调基因1 191个；GO功能富集分析显示，差异基因主要富集在代谢过程、活性激活、氧化还原及线粒体等；KEGG通路富集分析显示，差异富集在代谢、能量物质合成、糖尿病、氧化应激等相关信号通路；亚细胞定位统计分析显示，差异蛋白主要在线粒体蛋白（24.24%）、胞质蛋白（17.51%）、细胞核蛋白（13.13%）、细胞膜蛋白（11.45%）、细胞外蛋白（10.77%）。结论线粒体氧化应激损伤可能参与AVF内膜增生狭窄的病理损害过程。

简介：摘要：近年来，随着经济市场体制的改革，供电企业的服务质量也不断提高，作为电费回收而言，它是电力企业主要经营收入，电费回收的高低直接关系到企业的健康发展。因此加强企业的电费回收管理是提高企业生存和发展的关键。但是供电公司在回收电费过程中，经常发生企业及个人拖欠电费，难以做到电费的月清月结。针对此种现象，从供电公司所处的社会形式，行业地位出发，重点分析了电费回收工作中的风险及应采取的措施等。

简介：摘要：供电企业在完成核算电费与电量这一基本业务时，需要同时做好相应的电费与电量管理工作，利用创新机制，来考察新时期形成的全新管理诉求，强化核算管理系统的可行性，找出电费控制管理过程中的问题，给电费核算相关工作部门提供更多的支持，本文结合供电企业的经营条件，从管理层面出发，分析创新电费与电量管理手段的方法与实践情况。

简介：摘要目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）/核因子κB（NF-κB）信号通路在人肾小管上皮细胞（human kideny-2，HK-2）-尿酸性肾病细胞模型中表达水平变化及其作用机制。方法体外培养HK-2细胞，随机分为对照组及实验组。实验组经高尿酸（720 μmol/L）浸泡48 h建立体外尿酸性肾病细胞模型，分为高尿酸处理组、过表达蛋白激酶活化受体2（protease activated receptor 2，PAR2）组和敲减PAR2组。实时定量PCR法检测HK-2细胞PAR2、PI3K、AKT、NF-κB的mRNA表达水平，Western印迹法检测HK-2细胞PAR2、PI3K、AKT、NF-κB蛋白表达水平，酶联免疫吸附法检测上清液肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-1β前体（pro-interleukin-1β，pro-IL-1β）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）表达水平。结果（1）与对照组相比，高尿酸处理组HK-2细胞中PAR2、PI3K、AKT、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加（均P<0.05），上清液中TNF-α、MCP-1、IL-6、pro-IL-1β、IL-1β、TGF-β1增加（均P<0.01）。（2）与高尿酸处理组相比，过表达PAR2组HK-2细胞中PAR2、PI3K、AKT、NF-κB的mRNA及蛋白表达明显增加（均P<0.05），上清液中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β、TGF-β1明显增加（均P<0.05）。（3）与高尿酸处理组相比，敲减PAR2组HK-2细胞PAR2、PI3K、AKT、NF-κB的mRNA及蛋白表达明显下降（均P<0.05），上清液中IL-6、pro-IL-1β、IL-1β、TGF-β1明显减少（均P<0.05）。结论尿酸致肾脏HK-2细胞损伤过程中，尿酸通过激活PAR2显著上调PI3K/AKT/NF-κB信号通路表达，导致HK-2细胞炎症损伤明显加重。敲减PAR2抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路，可有效减轻HK-2细胞炎症损伤。