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  • 简介:目的制备载脂蛋白E(ApoE)修饰的Lipofectamine2000作为基因运载体,并研究其对肝癌HepG2细胞的靶向性和毒性作用。方法构建ApoE修饰Lipofectamine2000运载体,通过DNA包裹实验检测脂质体与DNA结合的能力,分析脂质体包裹DNA的结合比。脂质体包裹pGenesil-1质粒转染HepG2细胞,通过荧光显微镜和流式细胞术检测其转染效率。MTT实验研究脂质体对HepG2细胞的毒性作用。采用t检验进行两两数据之间的比较,实验数据以均数±标准差(sx±)表示,P<0.05为差异具有统计学意义。结果成功制备了ApoE修饰的Lipofectamine2000运载体,DNA包裹实验显示质粒与Lipofectamine2000和ApoE修饰的Lipofectamine2000的质量体积比分别为1∶2、1∶2.5时,可完全包裹质粒;Lipofectamine2000和ApoE修饰的Lipofectamine2000转染HepG2细胞的转染效率分别为(20.35±0.50)%、(30.65±0.49)%,ApoE修饰的Lipofectamine2000对HepG2细胞的转染效率明显高于Lipofectamine2000,转染效率差异有统计学意义(P=0.001);MTT实验表明ApoE修饰后的Lipofectamine2000没有增加Lipofectamine2000对HepG2细胞的毒性作用(P>0.05)。结论通过ApoE对Lipofectamine2000进行修饰,提高了HepG2细胞对质粒的摄取,成功构建了一种高效的肝癌靶向基因治疗运输载体。

  • 标签: 载脂蛋白E HEPG2细胞 靶向转染 LIPOFECTAMINE 2000 基因治疗