简介:摘要目的检测微小RNA-320(miR-320c)在骨关节炎外周血的表达水平,探讨miR-320c的临床意义及在骨关节炎发病机制中的作用。方法收集30例原发性膝骨关节炎、30例结缔组织病患者及同期30例健康对照者的血浆标本,采用荧光定量PCR检测外周血中miR-320c的表达水平。分析其与骨关节炎患者的膝关节严重程度和疼痛评分的相关性。最后转染miR-320c模拟物、miR-320c抑制物及对照物至软骨细胞HC-a,通过CCK-8法检测不同时间点HC-a软骨细胞增殖能力。结果(1)miR-320c在骨关节炎组血浆的表达量(3.26±0.55)明显高于结缔组织病组(1.62±0.50)和健康对照组(1.21±0.66)(F=107.66,P<0.001)。(2)miR-320c的表达水平与骨关节炎患者膝关节影像学的严重程度呈正相关(r=0.830,P<0.001),与疼痛评分尚未发现差异有统计学意义(P>0.05)。(3)与对照组相比,转染miR-320c模拟物组软骨细胞增殖的时点、组间、时点与组别的交互效应差异有统计学意义(F时点=5256.767,F组间=1947.436,F交互=114.314,均P<0.001),增殖水平明显降低。(4)转染miR-320c模拟物组软骨细胞凋亡率明显增高(t=7.85,P<0.01)。结论骨关节炎患者血浆miR-320c表达水平明显升高,且与膝关节影像学的严重程度呈正相关;过表达miR-320c可显著抑制软骨细胞增殖能力,促进凋亡水平。血浆miR-320c可能作为骨关节炎影像学的严重程度的一个预测指标。
简介:摘要目的探讨OA患者血浆微RNA(miRNA)表达谱特征,并对差异表达的miRNA进行生物信息学分析,寻找与OA相关的血浆生物标记物。方法收集20例OA患者及15名健康体检者静脉血,通过Agilent miRNA芯片表达谱检测OA血浆miRNA的表达谱。对差异表达的miRNA进行靶基因预测,聚类分析(GO)功能分析及KEEG通路聚类分析等生物信息学分析。最后选取独立验证样本采用方差分析对差异表达miRNA进行实时荧光定量-PCR验证,并评估效能。组间差异采用t检验分析。结果①与健康对照组相比,OA组筛选获得74个差异表达血浆miRNA,其中45个表达上调,29个表达下调。②预测差异性表达miRNA潜在靶基因2 731个,参与到462个KEGG通路条目中,主要富集于环磷酸腺苷(cAMP)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、破骨细胞分化等通路,主要功能集中在细胞间黏附作用、胶原合成作用、细胞内信号转导等生物学功能上。③ RT-PCR显示OA患者血浆miR-20a-5p、miR-320c表达水平明显升高(t=-6.142,P<0.05;t=-3.854,P<0.05),而miR-940表达明显下调(t=2.767,P<0.05),变化趋势与芯片结果一致。受试者工作特征曲线(ROC)显示这3个miRNA的曲线下面积(AUC)分别为0.864,0.851和0.818。结论OA患者有着独特的血浆miRNA表达谱,差异性表达的miRNA可能是OA诊断的生物标志物和潜在治疗靶点。