(吉林农业科技学院动物科技学院,吉林省吉林市,132109)
摘要:本试验通过建立兔骨关节炎的疾病模型,对20只健康兔子关节腔内注射木瓜蛋白酶,最终有16只兔子骨关节炎建模成功;将16只建模成功的兔子分为四组,第一组为对照组,不治疗,第二组为美洛昔康治疗对照组;第三组为鹿骨多肽低剂量治疗组;第四组为鹿骨多肽中剂量治疗组;结果表明第四组中剂量鹿骨多肽治疗组治疗效果较为理想。
关键词:鹿骨多肽;兔肘关节炎;治疗效果
近年来,养宠物的人越来越多,宠物已成为很多人不可或缺的家庭成员,宠物数量的增加也伴随着许多疾病的到来,骨关节炎便是其中一种。
目前关于宠物骨关节炎的治疗以维持为主,减缓发病速度为最终目的,临床上关于骨关节炎的治疗主要是使用糖皮质激素及非甾体抗炎药如美洛昔康进行抗炎止痛治疗,配合使用护骨成分的药物加强宠物骨骼的自我愈合,辅助治疗骨关节炎,但效果欠佳且长期使用激素类药物会导致犬猫的骨质疏松等副作用。本试验则通过鹿骨多肽药物治疗的方式来对比常规的治疗方法,挖掘出鹿骨多肽对动物关节炎疾病治疗的潜在价值和实用意义。
1材料与方法
1.1实验材料
1.1.1实验动物:选择同一批体型基本一致的6月龄白色雄性试验用兔子20只,每只试验兔的体重为2.5-2.8kg。
1.1.2实验药品:美洛昔康片(江西省特邦生物药业有限公司);鹿骨多肽(兰州沃特莱斯生物科技有限公司);木瓜蛋白酶(合肥千盛生物科技);DR仪;0.03mol/L的L-半胱氨酸等。1.2方法
1.2.1人工建模:兔肘骨关节炎模型的建立采用在关节腔内注射木瓜蛋白酶的建模法。操作方法为取适量的木瓜蛋白酶和0.03mol/L的L-半胱氨酸溶于适量的生理盐水中,调制出浓度为10%的木瓜蛋白酶和0.03mol/L的L-半胱氨酸混合液,充分混匀后静置30min待用。在开始建模的第1、3、5d将全部试验兔子进行保定,然后将其右膝关节轻微活动弯曲,挑选出合适的角度,使用注射器小心垂直插入右膝关节腔内,按照每只试验兔0.1ml/kg的药液注射量缓慢匀速推入10%浓度的木瓜蛋白酶和0.03mol/L的L-半胱氨酸混合药液,进行关节腔内注射建模。于最后一天注射混合药液的2周后,观察实验用兔的双膝维度变化以及兔子的精神状态和它的运动情况,如出现关节疼痛喜卧,运动出现跛腿,关节红肿,关节维度较正常关节维度增粗1cm及以上等情况,即建模完成。
1.2.2分组与给药治疗
将建模完成的兔子,进行随机分组,每只兔子做好区分标记后都进行独笼统一饲养。试验开始及试验途中所有兔子均生活于相同环境,试验开始后给予的阳光、温度、湿度、食物和运动等条件都基本保持一致。在试验的过程中,遵守动物实验的行为规范,遵循试验动物的3R原则,最大程度减轻对试验动物的伤害。
第一组为阴性对照组:生理盐水灌胃器灌服,每日两次;
第二组为阳性对照组:美洛昔康1.5mg/kg灌服给药,每日两次;
第三组为低剂量组:鹿骨多肽100mg/kg灌服给药,每日两次;
第四组为中剂量组:鹿骨多肽200mg/kg灌服给药,每日两次;
治疗周期为一周,观察指标为膝盖的维度,运动情况,是否红肿跛行。
2结果
2.1建模结果
给药2周后,观察实验用兔的双膝维度变化以及兔子的精神状态和运动情况等情况,结果见表2-1。
表2-1 兔肘关节建模情况
兔子编号 | 建模前关节维度 | 建模后关节维度 | 是否出现红肿 | 是否建模成功 |
1 | 11 cm | 12.1 cm | 是 | 是 |
2 | 12 cm | 13.1 cm | 是 | 是 |
3 | 11.2 cm | 12.2 cm | 是 | 是 |
4 | 11.1 cm | 12.1 cm | 是 | 是 |
5 | 11.2 cm | 12.2 cm | 是 | 是 |
6 | 11.3 cm | 12.3cm | 是 | 是 |
7 | 12.1 cm | 13.1 cm | 是 | 是 |
8 | 11.5 cm | 12.6 cm | 是 | 是 |
9 | 11.3 cm | 12.4 cm | 是 | 是 |
10 | 11.4 cm | 12.8 cm | 是 | 是 |
11 | 11 cm | 12 cm | 是 | 是 |
12 | 11.2 cm | 12.2 cm | 是 | 是 |
13 | 11.3 cm | 12.3 cm | 是 | 是 |
14 | 11.4 cm | 12.4 cm | 是 | 是 |
15 | 11.3 cm | 12.3 cm | 是 | 是 |
16 | 11.5 cm | 12.5 cm | 是 | 是 |
17 | 11.6cm | 11.8cm | 红肿不明显 | 否 |
18 | 12.1cm | 12.2cm | 红肿不明显 | 否 |
19 | 11.3cm | 11.6cm | 稍有红 | 否 |
20 | 11.5cm | 12cm | 有红 | 否 |
表2-1结果表明,20只健康兔子中有16只在建模第5d出现了运动障碍,第7d关节红肿,关节维度较正常关节维度增粗1cm及以上然后即可以确认是诱发关节炎,建模成功。
2.2治疗结果
给药后每天观察和测量膝盖的维度、红肿情况和运动情况,结果见表2-2。
表2-2 不同组别治疗情况一览表
治疗 情况 治疗 时间 | 膝盖维度 | 红肿情况 | 运动情况 | ||||||||||||||||
1d | 2d | 3d | 4d | 5d | 6d | 7d | |||||||||||||
组别 | 编号 | ||||||||||||||||||
一 组 | 1 | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 红肿 | 跛行 | |||||||||
2 | 13.1cm | 13.1cm | 13.1cm | 13.1cm | 13.1cm | 13.1cm | 13.1cm | 红肿 | 跛行 | ||||||||||
3 | 12.2cm | 12.2cm | 12.2cm | 12.2cm | 12.2cm | 12.2cm | 12.2cm | 红肿 | 跛行 | ||||||||||
4 | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 12.1cm | 红肿 | 跛行 | ||||||||||
二 组 | 5 | 12.2cm | 12cm | 12cm | 11.6cm | 11.4cm | 11.2cm | 11.2cm | 无红肿 | 正常 | |||||||||
6 | 12.3cm | 12cm | 11.9cm | 11.7cm | 11.5cm | 11.3cm | 11.3cm | 无红肿 | 正常 | ||||||||||
7 | 13.1cm | 12.7cm | 12.5cm | 12.5cm | 12.3cm | 12.1cm | 12.1cm | 无红肿 | 正常 | ||||||||||
8 | 12.6cm | 11.8cm | 11.8cm | 11.7cm | 11.5cm | 11.5cm | 11.5cm | 无红肿 | 正常 | ||||||||||
三 组 | 9 | 12.4cm | 11.4cm | 11.3cm | 11.3cm | 11.3cm | 11.3cm | 11.3cm | 无红肿 | 正常 | |||||||||
10 | 12.8cm | 12.6cm | 12.2cm | 11.6cm | 11.6cm | 11.4cm | 11.4cm | 无红肿 | 正常 | ||||||||||
11 | 12.0cm | 11.9cm | 11.9cm | 11.8cm | 11.8cm | 11.6cm | 11.6cm | 红肿 | 跛行 | ||||||||||
12 | 12.2cm | 11.7cm | 11.7cm | 11.5cm | 11.5cm | 11.3cm | 11.2cm | 无红肿 | 正常 | ||||||||||
四 组 | 13 | 12.3cm | 12cm | 11.9cm | 11.7cm | 11.3cm | 11.3cm | 11.3cm | 无红肿 | 正常 | |||||||||
14 | 12.4cm | 12.2cm | 12cm | 11.7cm | 11.4cm | 11.4cm | 11.4cm | 无红肿 | 正常 | ||||||||||
15 | 12.3cm | 12cm | 12cm | 11.8cm | 11.3cm | 11.3cm | 11.3cm | 无红肿 | 正常 | ||||||||||
16 | 12.5cm | 12.4cm | 12.2cm | 12cm | 11.5cm | 11.5cm | 11.5cm | 无红肿 | 正常 | ||||||||||
表2-2结果表明,第四组中剂量鹿骨多肽治疗组实验兔的关节维度显著改变,双膝维度与正常维度一样,状态很好,跛行等现象消失治疗效果较为理想。
3.讨论与分析
从试验结果可知,第一组为阴性对照组无任何关节变化,仍然处于关节炎状态。第二组关节维度有变化,关节炎症状得到明显缓解。第三组实验兔关节炎症状较轻的有明显改变,维度恢复正常,整体状态较好;症状较重,关节维度变化大的,虽然有变化,但变化不明显,且在用药治疗期间,未能痊愈;药用剂量少,效果不明显。第四组实验兔的关节维度显著改变,双膝维度与正常维度一样,状态很好,跛行等现象消失。
在本病的治疗方面,美洛昔康针剂治疗为常规治疗手段和方法,治疗效果也较为理想,但多次针剂注射可能对宠物产生恐惧心理,并且西药用药时长会加重机体的肝肾负担 ,而鹿骨多肽可直接通过口服灌胃无需担心心理问题的发生,再经过调养休息就可以治疗关节炎;无需依赖进口。我国是中药大国,中药的制备上完全可以自给自足。鹿骨多肽有优点的同时也有不足之处,比如跟手术治疗相比较,药物治疗周期慢,关节炎恢复时间长,对疾病的治疗结果不彻底等。 在接下来的试验研究中会继续分析并做出相应的改善。
参考文献
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* 基金项目:大学生科技创新项目吉农院合字SJ2022020
**通讯作者:刘芳(1976-),女,讲师,主要从事中兽医学和动物药理学方面的研究