TOC清洁验证中取样瓶选择验证

TOC清洁验证中取样瓶选择验证

唐丽,李永玺,尹力

云南白药集团股份有限公司，云南 昆明 650500

摘要：目的：清洁验证中取样瓶选择的验证。方法：主要是通过TOC分析方法验证，判断以及评价选择的取样瓶是否科学、合理，是否能有效控制设备清洁后的残留物限度。结果：定量限及检测限，线性、精密度试验、系统适用性、准确度试验测试结果均能满足要求。结论：选择空白水平可控的取样用具，提高化学残留清洁验证中检验结果的准确性，更好地反应共线生产的交叉污染情况。

关键词：清洁验证；残留；TOC测定法；方法确认；离心管；TOC管

一、概述

在制药企业中，产品共线生产存在交叉污染的风险，因此企业需要对共线生产中的生产设备清洁方式并进行验证。清洁验证中微生物检测系对设备清洁后微生物污染的状态进行验证，化学检测主要是对相关设备中的残留物（药物活性成分（API）、药品赋形剂、蛋白质、蛋白质副产品和清洁剂或成分）进行检测，因此，化学残留是清洁验证的重点。清洁验证的化学残留检测属于风险控制指标，有效的清洁验证检验方法能够提供准确的数据，规避产品共线生产交叉污染的风险，降低产品交叉污染的风险。对已清洁的设备进行取样到实验室进行化学残留分析检验，取样的方式、规范性直接影响清洁验证的结果。取样用具的选择对结果的准确性影响较大。选择不恰当，可能存在残留物转移不完整、玻璃瓶因反复使用存在交叉污染的风险，空白水平无法得到很好地控制等问题。

二、分析与结论

1. 仪器设备、材料、试药

1.1.1总有机碳分析仪：杭州启鲲科技有限公司CW-700S

1.1.2纯水设备: 泽布拉仪器科技（上海）有限公司纯化水机Dura V

1.1.3超声设备：上海科导SK7210LHC

1.1.4试药与材料：TOC样品瓶，离心管（取样用），过硫酸钠 ，磷酸、蔗糖、1,4-对苯醌

2.选择样品瓶中总有机碳的确定 总有机碳测定法（TOC测定法）

2.1 样品瓶的准备与检测

目前，市场上有很多企业生产样品瓶，但由于企业的资质良莠不齐，极有可能生产一些质量不合格的产品来滥竽充数。根据新版 GMP 的规定：“企业应当确定需要进行的确认或验证工作，以证明有关操作的关键要素能够得到有效控制；清洁方法应当经过验证，证实其清洁效果，有效防止污染和交叉污染。因此我们选择了公司常用厂家的离心管及杭州启鲲科技有限公司配备的TOC样品管，加入泽布拉仪器科技（上海）有限公司纯化水机产出的去离子水40ml，进行超声处理10分钟，静置30分钟。检测离心管及TOC中的总有机碳。

分析验证证明使用离心管取样，经过模拟真实样品的处理方式，检测数据分析比较如下表。空白水中总有机碳是0.084mg/L,离心管中6次测试值的平均值与空白水的差值为0.0415mg/L,小于实验室允许差值0.1mg/L，TOC管中6次测试值与空白水的差值为0.0165mg/L，小于实验室允许差值0.1mg/L。而且两种管测试差值0.025，均小于0.1mg/L。

离心管中与TOC管中总有机碳检测数据

2.2 结论

证明实验用离心管取样，对总有机碳的检验结果无干扰，数据稳定

2.3 定量限及检测限

根据《药品GMP验证指南》（2010年修订）对清洁验证化学检验方法的规定。取纯化水，进行10次的TOC值检测，检测结果0.029、0.037、0.020、0.020、0.026、0.020、0.020、0.020、0.020、0.020、0.027，计算其10次结果的标准偏差σ是0.0056，其检测限0.018, 其定量限0.056。结果达到标准。2.4 线性

取蔗糖对照品贮备液（250mg/L），将其分别稀释，制成含碳量分别为0 mg/L、2.5 mg/L、5mg/L、7.5mg/L 、10mg/L的系列标准溶液。依次检测纯化水空白TOC值及标准溶液的相对TOC值，得出标准溶液的绝对TOC值。回归方程 Y= 0.8934X-0.0947，计算R2值是0.9995，其R2＞0.98。

2.5 精密度

精密度系指在规定的检测条件下，同一个均匀对照品经多次取样测定取得结果之间的接近程度。取5.0mg/L对照品溶液，即得。加入TOC取样瓶中，测定6次，记录TOC值，进行相对标准偏差分析。相对标准偏差RSD应≤8%。结果 TOC分别为 5.000、4.991、4.895、4.919、4.902、4.922，相对标准偏差RSD%为1.1%，说明仪器精密度良好。

2.6 系统适用性：

2.6.1 实验方法及合格标准

取纯化水，蔗糖对照品溶液（含碳量为0.50 mg/L）和1，4-对苯醌对照品溶液（含碳量为0.50 mg/L）分别进样检测，依次记录总有机碳响应值，试剂水（r

w）的平均值0.024mg/L, 500ppb蔗糖标样（rs）的平均值0.567 mg/L ，500ppb苯醌标样（rss）的平均值0.547 mg/L。计算，以百分数表示的响应效率应为85%～115%。验证结果响应效率96%响应限值0.543 mg/L。          

2.6.2 结论 按照制药用水总有机碳测定法对TOC系统适应性试验要求，此TOC系统适用性试验符合规定。

2.7 准确度：

  采用空白加标的方式来进行回收率的测定。取蔗糖对照品贮备液（1000mg/L），将其分别稀释，制成含碳量分别为2.5mg/L、5 mg/L、7.5mg/L的标准溶液，依次检测。

回收率在85%-115%之间，说明本方法在本实验室内准确性好。

  三、评价

该验证围绕清洁验证对于cGMP生产至关重要来开展，用以确保产品质量和患者安全。国家药品生产质量管理规范2010年修订中，明确规定药品生产过程的关键设备必须进行清洁验证。为达到相关法规规范的要求，药品生产企业应保证产品的残留，通过一定的清洁程序从设备表面清除，并提供书面证据证明各种污染和交叉污染已被有效防止。因此通过选择取样用具的优化，就可以避免残留物转移不完整、玻璃瓶因反复使用存在交叉污染的风险，可以很好地控制空白水平。为设备清洁sop的确定提供准确，有效的依据，对设备清洁sop进行修订补充完善。因此，选择通过验证的离心管及TOC管为TOC清洁验证取样瓶，对于保证实验数据的真实性、切实保障药品质量有着非常重要的现实意义。提高化学残留清洁验证中检验结果的准确性，更好地反应共线生产的交叉污染情况。