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摘要:由于维生素E本身存在着较为复杂的结构,并且存在多种同系物,所以,在进行该成分的测定时,存在着多种方法,例如液相色谱-串联质谱法、高效液相色谱法以及气相色谱法等等。本文首先研究了采用高效液相色谱法对保健食品中维生素E类成分的进行检测的实验,包括实验材料、实验试剂、实验设备以及具体实验方法,其次对此次维生素E类成分检测试验的结果进行了分析与评价。
关键词:保健食品;维生素E类成分;检测;质量评价
引言:不同个体在饮食结构上的差异将会致使机体受到较为直接的影响,不合理的饮食结构很可能会引发一些疾病。基于此,越来越多的人选择食用保健食品,以此延缓自身疾病的进一步发展或改善身体健康。作为一种具备较强抗氧化能力、延缓衰老能力、提升人体免疫能力等多种功能的物质,近些年来,维生素E类物质已经成为保健食品中较为常见的添加剂,对保健食品中此类物质的具体含量进行测定有着重要意义。
1保健食品中维生素E类成分的检测实验
1.1实验材料与实验试剂
本次实验的检测样品共有两种,分别是胶原蛋白天然维生素E片和葡萄籽维生素E软胶囊。
本次试验所使用到的实验试剂包含多种,每一种试剂的规格均选择分析纯或者是以上的类型,所使用到的水均为超纯水。第一,α-淀粉酶,该试剂中的酶活力至少超过1.5U/mg;第二,无水硫酸钠;第三,石油醚,其沸腾温度区间为30°C~60°C;第四,强氧化钾水溶液;第五,维生素C的乙醇溶液;第六,无水乙醇;第七,100mg的对照品DL-α-维生素E生育酚。
1.2实验所用仪器设备
第一,本次保健食品中维生素E类成分的检测实验选取的试验方法为高效液相色谱法,所以,实验中必不可少的一种仪器即为高效液相色谱仪,同时配有相应的DAD检测器;第二,紫外分光光度计;第三,超纯水器;第四,氮吹仪;第五,恒温磁力搅拌器;第六,旋转蒸发器;第七,恒温培养箱;第八,电子天平。
1.3具体检测实验方法
1.3.1配制各种所需溶液
在实际开展保健食品中维生素E类成分的检测实验之前,需要做好所有所需溶液的配制工作[1]。首先,维生素C乙醇溶液的配制,这种溶液的浓度为15g/L。实验人员需要准备一个1L容量瓶,并使用电子天平称取15g的维生素C,并将其置于容量瓶中,第一步使用适当的水来溶解维生素C,在此之后,需要使用无水乙醇进行定容,使容量瓶中的试剂量达到相应刻度。其次,氢氧化钾水溶液的配制。在进行该试剂的配制时,首先需要使用电子天平称取250g的氢氧化钾,并将其置于容器中,之后在容器中添加200ml的超纯水,反复摇晃至溶解。再次,配制标准溶液。通过电子天平称取事先准备好的α-维生素E标准品,将其置于相应的容器中,在容器中添加乙醇,将标准品完全溶解。最后,标定标准溶液。在实际应用标准储备液之前,需要事先使用紫外分光光度计对准确浓度进行标定,之后在一10ml的容量瓶中转入储备液,并使用乙醇完成定容。在此之后,还需要使用1cm的适应比色皿,基于294nm(检测波长)的条件,对紫外吸光系数进行精准测定,完成浓度的计算。
1.3.2色谱条件
本次保健食品中维生素E类成分的检测实验中所使用到的实验方法为高效液相色谱法,所以还需要对色谱条件加以明确:第一,色谱柱,本次实验所选取的色谱柱为ZORBAX SB-C18.6×150mm,5μm;第二,柱温需要与石油醚试剂的沸腾温度区间相满足,本次实验设定柱温为35°C;第三,实验进行中的流动相为甲醇;第四,检测波长为294nm;第五,进样量为20μl;第六,流速为每分钟1ml。
1.3.3制备供试品溶液
在制备供试品溶液的过程中,由于所选取的两种检测样品本身的性质不同,所以这项工作涉及两个方面。
首先,本次试验中选取的胶原蛋白天然维生素E片中含有淀粉,所以在进行供试品溶液的制备时,首先需要进行含淀粉试样的制作。具体来说,需要将试样进行均匀地混合,并从中称取5g,将其置于具塞三角瓶中,其容量为250ml。在此之后,还需要在具塞三角瓶中加入1g的α-淀粉酶,并加入50ml温度为50°C的超纯水,将具塞三角瓶中存在的物质加以充分溶解之后,使用氮吹仪在余下空间中填充氮气,并将瓶塞盖好。此后需要将具塞三角瓶转移到60°C的培养箱中,进行为期0.5h的培养。
其次,葡萄籽维生素E软胶囊中并不存在淀粉,所以还需要进行不含淀粉试样的制备。在这个过程中,需要将试样进行均匀地混合,并从中称取1g,将其置于具塞三角瓶中,其容量为250ml。在此之后,加入50ml温度为50°C的超纯水,将具塞三角瓶中存在的物质加以充分溶解和均匀混合,此后,添加100ml的维生素C乙醇溶液,完全混合均匀之后将25ml的氢氧化钾水溶液加入其中,再次进行充分混合。待到混合均匀之后将磁力搅拌棒放入其中,将具塞三角瓶的盖子盖好。此后,实验人员需要准备一个烧杯,其容量为2000ml,在其中放入600ml的超纯水,将其加热到55°C,之后再把具塞三角瓶置于其中,进行为期0.75h的皂化,待到皂化完毕将其取出,使之温度下降至与室温一致之后,将具塞三角瓶中的液体倒入分液漏斗之中,其容量为500ml。使用适当的水对其进行两次冲洗,并在其中添加100ml的石油醚,通过小幅度的摇晃挤压出其中的气体,再持续3min的摇晃,置于一旁完成静置分层。此后,需要将分层出的水相转移至另外一个相同容量的分液漏斗之中,重复上述操作完成再一次的萃取,完成三次合并醚液的萃取,使用超纯水冲洗至中性,使用无水硫酸钠完成醚液的过滤脱水,所得液体全部转移到圆底烧瓶中,其容量为500ml。在此之后,需要将圆底烧瓶放置在旋转蒸发器上,以38~42°C的温度进行蒸发,待到圆底烧瓶中液体剩余20ml左右之后,借助石油醚转移到50ml的容量瓶之中完成定容并均匀混合,使用0.45μm的滤膜对液体进行过滤,等待检测。
2保健食品中维生素E类成分的检测实验结果分析
在对经过上述处理方法完成处理之后的两种待测液使用所述的色谱条件色谱分析和对制备完成的标准溶液进行色谱分析之后发现,使用高效液相色谱法进行的维生素E检测实验受杂质干扰程度较低,并且有着良好的目标物分离效果[2]。
通过本次实验,测定出胶原蛋白天然维生素E片和葡萄籽维生素E软胶囊中的维生素E类物质的含量如表1所示。
表1 实验中两种样品中维生素E类物质含量测定结果
样品名称 | 胶原蛋白天然维生素E片 | 葡萄籽维生素E软胶囊 | ||||
检验次数 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
称样量 | 2.0138 | 2.0266 | 2.0243 | 1.0106 | 1.0156 | 1.0132 |
峰面积 | 283.23 | 285.84 | 285.66 | 247.35 | 250.74 | 249.09 |
样品浓度 | 38.62 | 38.97 | 38.82 | 35.27 | 35.74 | 35.63 |
计算结果 | 0.959 | 0.961 | 0.959 | 1.745 | 1.760 | 1.758 |
平均值 | 0.960 | 1.75 |
总结:综上所述,保健食品作为一种介于药品和食品中间的产物,不仅需要做到安全无毒,还需要存在恰当量的功效成分,从而满足人们食用此类产品的需求。通过测定保健食品中所含有的维生素E含量,可以对保健食品的功效做到进一步了解。本文在对保健食品中维生素E类物质的含量进行测定时,主要采用高效液相色谱法,这种方法具备较为良好的稳定性、准确性和重现性,并且在实际应用期间可以生成相对较宽的线性范围,受其他杂质的负面影响程度较轻。
参考文献:
[1]李佳晨,曹玲,方方,等.超高效合相色谱法快速测定保健食品中10种脂溶性维生素[J/OL].色谱:1-7[2022-09-28].
[2]张丽媛,戚绿叶,周明昊.柱切换法液相色谱测定保健食品中的VA、VD、VE[J].食品科学,2022,43(04):225-230.