平皿法和薄膜过滤法对液体制剂微生物检验的适用性分析

平皿法和薄膜过滤法对液体制剂微生物检验的适用性分析

常鑫爽

黑龙江省双鸭山双矿医院，黑龙江双鸭山155100

【摘要】目的 分析平皿法和薄膜过滤法对液体制剂微生物检验的适用性。方法 针对院内液体制剂微生物限度以薄层过滤法与平皿法检测，观察应用效果。结果 菌株回收率0.5-1.5，检出三种控制均，阴性对照组则未检出。结论 对平皿法与薄膜过滤法进行分析，满足适用性标准，能够为微生物污染评估提供精准参考。

【关键词】平皿法；薄膜过滤法；液体制剂；微生物检验

Applicability analysis of plate method and membrane filtration method for microbiological examination of liquid preparations

Changxinshuang

Shuangyashan shuangkuang hospital, Shuangyashan 155100, Heilongjiang Province

[Abstract] Objective To analyze the applicability of plate method and membrane filtration method for microbiological examination of liquid preparations. Methods thin layer filtration method and plate method were used to detect the microbial limit of liquid preparations in hospital, and the application effect was observed. Results the recovery rate of the strains was 0.5-1.5. All the three controls were detected, but the negative control group was not detected. Conclusion the analysis of plate method and membrane filtration method can meet the applicability standard and provide accurate reference for microbial pollution assessment.

[Key words] plate method; Membrane filtration; Liquid preparations; Microbiological examination

    液体制剂以局部给药外用为主，常规75%主乙醇可发挥灭菌作用，但容易干扰菌种检测结果[1]。为此，液体制剂微生物限度的检测对于其应用质量至关重要，选择适合的检测方法也较为关键[2]。本研究中分别采用平皿法与薄膜过滤法进行液体制剂检测，观察其应用价值。

1 资料与方法

1.1仪器设备与样品

    电热恒温水浴锅、霉菌培养箱、生化培养箱、暗香室紫外线投射仪等。菌种样本由食品药品检验研究院提供。样品包括氯化钾溶液、复方苯甲酸搽剂、复方氯霉素搽剂等，源自我院。

1.2方法

    （1）需氧菌、霉菌、酵母菌计数：氯化钾溶液与复方苯甲酸搽剂采用平皿法，稀释到10倍与100倍，制备供试液剂量100ml，菌浓度100cfu/ml。将其作为观察组，将1ml剂量放到无菌平皿中培养制作。苯扎溴铵搽剂、复方氯霉素搽剂薄膜过滤法，稀释10倍，制备为供试液后，取10ml过滤，滤膜冲洗，100cfu用内菌液加到冲洗液，冲洗后取出滤膜，在珲平皿中培养处理[3]。

（2）控制均检查：氯化钾溶液检查大肠埃希菌，稀释10倍，10ml供试液、100cfu用内菌液制备增菌培养，接种到MacA，观察培养结果。复方苯甲酸搽剂、复方氯霉素搽剂检查铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌，稀释法处理，10倍稀释，取10ml供试液与100cfu以内菌液增菌培养，接种到CAMB，观察培养结果。

（3）分组：阴性对照组不加菌液，阳性对照组正常加菌液，不加供试液。常规检查后，阳性对照组可检出控制菌，阴性对照组无干扰，提示方法可行。

1.3观察指标

观察微生物计数回收率及适用性评估结果。

2 结果

2.1微生物计数回收率

微生物计数回收率见表1所示。

表1 微生物计数回收率

2.2控制菌检查法适应性结果

验证菌株回收率0.5-1.5，其中观察组检出大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌，阴性对照组未检出菌种。以大肠埃希菌为例，菌液检出结果符合适应性结果。见表2。

表2 控制菌检查法适应性结果

3 讨论

  经研究证实，平皿法适合应用到氯化钾溶液、复方苯甲酸搽剂微生物限度检测中，而薄膜过滤法适合应用到苯扎溴铵搽剂、复方氯霉素搽剂检测中，均具有较高应用价值，可准确评估微生物污染情况，确保医院液体制剂应用质量[4]。微生物限度检查对于环境具有较高要求，如环境洁净度需要在10000级下的洁净度100级单向流空气区域内[5]。检验期间需要保障无菌条件，预防外部因素对检验质量的干扰。环境中无菌条件维持需要定期结合相关规范设计标准评估。

    综上所述，对平皿法与薄膜过滤法进行分析，满足适用性标准，能够为微生物污染评估提供精准参考。

参考文献：

[1]刘明，陈童，李峰.多点平皿培养法与试管法在甲真菌病病原菌分离中的对比应用分析[J].中国保健营养，2020，30（17）：31.

[2]姬俊，牛萌萌，王立云，等.11种液体医院制剂微生物限度方法的研究[J].中国医药科学，2022，12(3):4.

[3]孙杰.EasyDisc法与传统平皿计数法检测水中菌落总数的比较[J].净水技术，2022，41(3):6.

[4]李翔,黎春彤,王晶,段斯庭,张晓娟,马建丽. 4种医院液体制剂微生物限度检验方法的建立[J]. 中国药师,2019,22(06):1183-1185.

[5]肖连玉,韩凤华,孙中志. 鲎试剂用于微生物限度的快速检验[J]. 中国医药导报,2007,(09):119-120.