分子技术在临床微生物检验中的应用探讨

分子技术在临床微生物检验中的应用探讨

杨开凤

重庆市巴南区第二人民医院 重庆 400054

摘要：目的：探讨分子技术在临床微生物检验中的应用。方法：选取该校附属医院采用分子生物科学技术检验常见的病原微生物临床基线资料作为本次临床研究主要对象。运用回顾性分析法对常规的RT-PCR与荧光定量的RT-PCR实际检验结果进行了实时化的比较分析，分析两组的效果。结果：相比较于常规的RT-PCR，荧光定量的RT-PCR阳性检出率相对较高，略占据一定临床应用优势，组间对比数据；差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：经过长期的临床研究可发现，伴随着生物科学技术不断的进步发展，目前在微生物临床检验领域中已经研究出聚合酶链反应、生物传感器、基因芯片等技术。这几种技术在微生物临床检验工作当中均具有不同的技术特征及优势，尤其是为病原微生物临床检验工作提供更为强大的技术。

关键词：分子技术；临床；微生物；检验；应用

临床微生物是指能够引起临床疾病的微生物，包括细菌、真菌、病毒等。临床微生物检验在感染性疾病的诊断、治疗和预防中发挥着不可替代的应用价值，因此，探索高效、便捷、准确的临床微生物检验技术具有重要意义。当前，具有快速、简便、可靠、高效的分子技术被广泛应用在临床微生物检验中，在微生物检验精度和检验范围上都能够显示巨大的优势，促进临床微生物检验精度和效率的提高。为了分析针对病症，本次临床观察实验研究选取该校附属医院所收治的病患120例作为本次临床观察基本研究对象，以下为本次临床观察研究的相关内容。现报告如下。

一、资料与方法

1、一般资料。选取该校附属医院采用分子生物科学技术检验常见的病原微生物临床基线资料，作为本次临床实践研究对象。

2、方法。对该校附属医院采用分子生物科学技术检验常见的病原微生物临床基线资料，生物传感器是一种装置，取本研究的检验标本，通过扩散到达生物识别原件，启动生物传感器，使检验标本被该原件上的分子识别，并与分子进行特异性结合，发生生物化学反应，转化为光信号或电信号，最后使用电子测量仪测量，研究人员读取结果。对临床微生物标本进行处理，扩增，然后向生物芯片标记靶基因，进行固化处理，使经过上述处理的生物芯片与核酸进行杂交，完成后洗涤生物芯片，进行生物信息检验，研究人员收集输出的数据，进行结果判定，进行临床分析与研究，评价在微生物的检验工作方面分子生物科学技术的临床应用意义及价值。

3、观察指标。在本次临床实践研究当中，对常规的RT-PCR与荧光定量的RT-PCR实际检验效果进行实时化的比较分析。

4、统计学方法。利用Excel 2007软件进行数据整理，再利用SPSS 17.0软件进行统计描述及推断分析，计数资料采用x2检验进行统计分析，检验水准α=0.05。

二、结 果

在本次临床实践研究中，从常规的RT-PCR与荧光定量的RT-PCR实际检验结果所作出的对比分析中可发现：相比较于常规的RT-PCR（55.83%），荧光定量的RT-PCR阳性检出率（76.67%）相对较高，略占据一定临床应用优势，组间对比数据；差异有统计学意义（P＜0.05）。见表。

三、讨论

步入21 世纪以来，分子生物学迅速发展，在我国多个领域中得到广泛应用。医疗领域中，用于临床微生物检验的分子技术也不断丰富，在提高我国人群整体健康水平中发挥着重要作用。本研究主要对目前国内应用相对较为广泛的分子技术－聚合酶链式反应技术、生物传感技术、生物芯片技术在临床微生物检验中的应用价值进行评价。聚合酶链式反应技术的检验原理为使特定的DNA 片段得到放大和扩增分子，既往开展的大量实践已经证实该技术能够快速诊断病毒基因，鉴定病原微生物。现阶段，常备我国医疗领域应用HBV乙型肝炎病毒、HCV丙型肝炎病毒、结核杆菌等病原体的临床检验［1］。生物传感器技术是一种对生物物质敏感并将其浓度转换为电信号进行检测的技术，需要依靠生物传感器完成检测。生物传感器由分子识别部分和转换部分构成，主要具有感受、观察、反应三个功能。感受功能即提取出目标检测无物发挥感知作用的生物材料，如微生物、生物组织、抗体、抗原等。观察功能是指将生物材料感受到的信息转换为可以被检测人员理解的信息。反应是指将信息通过电化学、温度、电磁、光学等方式展示给检测人员，为检测人员的决策提供参考价值。该种生物检验技术本质上是生物活性材料和物理化学换能器有机结合的一种检验技术，也是现代生物检验发展必不可少的一种先进检验方法。生物芯片技术是1990 年代中期最具影响的学科之一，该技术融合了当时拥有的多种尖端科学，包括生物学、微电子学、极端及科学等。该种检验技术的检验原理为将玻片作为载体，将生物活性分子作为排列序列，经过排列组合后，进行生物检验。将临床微生物培养鉴定结果作为金标准，比较聚合酶链式反应技术组、生物传感器技术组、生物芯片技术组检验结果与金标准检验结果的符合率，结果显示标本检验结果与金标准的符合率分别为96．00%、94．00%、93．00%，组间比较差异无统计学意义( P＞0．05) 。(1) 聚合酶链式反应技术对微生物的敏感度和特异性均较高，最少可检出微生物，且能够对微生物类型进行较准确的鉴别，整个检验过程约为1～2 h，检验速度快，结果准确性高，但操作过程较复杂。(2) 生物传感器采用生物活性材料，其检测结果准确性与应用的活性材料的性能存在明显相关性。伴随着科学技术的不断进步，生物传感器的活性材料性能不断得到改善，检验结果准确性也随之得到明显提高，但其检测过程易受到混杂因素的影响，未来还需不断研究和探索。( 3)生物芯片技术具有高度多样化、并行性、微型化、自动化的特点，能够实现在同一张芯片上进行多种临床微生物检验，不仅样品消耗量少，且灵敏度高，但成本较高。

在微生物临床检验方面，相比较于常规分子技术，其具有较高的灵敏度，细菌最低检出率可达。生物传感器技术主要是把分子生物的诊断技术及传感技术有效融合，进而形成一种新型分析技术在微生物临床检验领域当中有效应用，为临床诊疗提供最具精准度的检验依据。基因芯片技术是以人类基因组计划为基础，逐渐形成的一种新型分子技术，是高通量的检验技术，主要包含芯片实验室、蛋白质及基因芯片等，是目前微生物临床检验领域当中应用最为广泛的一类分子技术。在一定程度上，这种分子技术在微生物临床检验工作中具有较为明显的自动化优势，检验效果较为理想，可作为微生物临床检验工作最佳的分析技术。综上所述，在微生物临床检验领域，聚合酶链反应、生物传感器、基因芯片等技术在微生物临床检验工作当中均具有不同的技术特征及优势，均具有较高的临床应用。

当然，分子技术不止上述提到的这些，在分子技术不断发展的背景下，更多具有高度自动化、特异性以及灵敏性的分子技术将被广泛应用，也将打破不同技术之间的藩篱，和其他学科进行更好的交叉和融合，进一步拓展检验的范围，使临床微生物检验的精准度和检验效率大幅度提高。当然，在对一个新的菌株进行鉴定时，仅仅依靠不同的分子技术是不够的，还有对不同鉴定结果进行综合分析的必要，以从生理生化特征等方面进行更为系统和全面的鉴定，以确保得出的菌株分类和归属结果的准确性更高，使临床微生物检验的作用得以进一步的发挥。

参考文献：

［1］倪语星．关注分子技术在临床微生物检验中的应用［J］．检验医学， 2018， 29( 6) : 53．

［2］邓雪蕾，张苑怡，袁浩钧．液滴数字聚合酶链式反应芯片及其在致病菌检测中的应用［J］．分析测试学报， 2017， 36( 10) : 33－38．

［3］潘玉宁，颜春荣，张蕾．基于纳米材料的生物传感技术在食品安全检测中的应用［J］．生物加工过程， 2018，16( 2) : 17－23．

［4］李美丽．分子技术在临床微生物检验中的应用［J］．中国卫生标准管理，2017( 9) : 12．

［5］熊勋爵．分子生物学技术应用于病原微生物检验中的价值研究［J］．数理医药学杂志，2017，30( 6) : 92．