贵阳中医学院 贵州 550002
摘要 [目的] 考察茶氨酸缓解试验性小鼠体力疲劳的作用。[方法] 小鼠连续灌胃给予不同剂量(8.3、16.6、50.0mg/kg) 的茶叶茶氨酸,阴性对照组给予等量蒸馏水。连续灌胃30d后,测定小鼠负重游泳时间、运动后血清尿素、血乳酸、肝糖原含量。[结果] 与阴性对照组比较,茶氨酸中、高剂量组小鼠负重游泳时间显著延长(P<0.05,P<0.01),中、高剂量组均能降低运动后小鼠血清尿素的
含量(P<0.05),高剂量组能显著提高小鼠肝糖原含量(P<0.01),中剂量组小鼠游泳后20 min血乳酸值和血乳酸曲线下面积显著降低(P<0.05)。[结论] 茶氨酸具有缓解体力疲劳的作用。
关键词 茶氨酸;缓解体力疲劳;负重游泳时间;肝糖原
茶氨酸(Theanine)是茶叶中含有的一种特殊氨基酸。已有报道茶氨酸具有抑制咖啡碱引起的兴奋、舒缓神经紧张、延缓运动性疲劳、提高记忆力、防治老年痴呆等功能[1-4]。但通过审批的茶氨酸保健食品寥寥无几。本文根据《保健食品检验与评价技术规范(2003 版)》要求,从缓解体力疲劳开展茶氨酸的功能性评价,以期为茶氨酸终端产品开发提供理论依据和应用支持。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验样品 茶叶茶氨酸,含量20%,人体推荐剂量为每日0.1g。
1.1.2 动物分组 SPF级雄性昆明小鼠,体重(20±2)g。160只,分为4个试验组,各试验组动物再分为4组(高、中、低3个剂量组及阴性对照组),每组10只。经适应性喂养后进行后续试验。
1.1.3 主要仪器与试剂 电子分析天平、冷冻离心机、恒温游泳箱、紫外可见分光光度计、全自动生化仪等;尿素(UREA)测定试剂盒(紫外-谷氨酸脱氢酶法); 肝糖原测试盒、全血乳酸测试盒。
1.2 试验方法
1.2.1 剂量选择、受试样品给予方式和时间 以人体推荐量的10倍换算为小鼠中剂量组,另设高、低剂量组。高剂量组50.0mg/kg(人用剂量30倍)、中剂量组16.6m g/kg(人用剂量10倍)、低剂量组8.3mg/kg(人用剂量5倍)受试样品连续灌胃30d,每天1次,每次灌胃体积以20mL/kg。每周根据小鼠体重调整灌胃剂量。
1.2.2 负重游泳试验
末次给予受试物30min后,将尾部负重5%的小鼠置于游泳箱中游泳,水深约30cm,水温约为(25±1)℃。负重游泳时间(min)的计算为小鼠从开始游泳至游泳力竭死亡的时间。
1.2.3 运动后血清尿素含量测定
末次给予受试物30min后,置小鼠于水深约30cm,水温(30±0.50)℃的游泳箱中,不负重游泳90min,休息60min后摘眼球采全血,待血液凝固后离心取血清,使用血清尿素试剂盒于全自动生化分析仪上测定小鼠血清尿素的含量。
1.2.4 肝糖原含量测定
最后一次灌胃给药30min后,小鼠颈椎脱臼处死后,解剖取出肝脏,剪碎后称取肝脏(90~100mg),按试剂盒的操作步骤,加入碱液沸水浴20min,取一定量的检测液加入显色剂,沸水浴5min,620nm波长,1cm光径,比色测定各管吸光度,计算肝糖原含量。
1.2.5 血乳酸含量测定
末次给予小鼠受试物30min后, 第1次从内眦静脉丛采血20μL, 用血乳酸测定试剂盒测定小鼠的血乳酸含量,再在温度为(30±0.5)℃的水中不负重游泳10min后停止,别于游泳后0min和游泳后休息20min各采血20μL,测定小鼠血乳酸含量,并计算3个时间点的血乳酸曲线下面积,计算方式如下: 血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后休息20min的血乳酸值)。
1.3 数据统计数据均以 ±s 表示,用统计软件 SPSS 16.0对数据进行分析,P<0.05具有统计学意义。
2 结果与分析
2.1 茶氨酸对小鼠负重游泳时间的影响 由表1可见,与阴性对照组比较,茶氨酸中、高剂量组小鼠的负重游泳时间明显延长(P<0.05,P<0.01)。
表1茶氨酸对小鼠负重游泳时间、运动后血清尿素和肝糖原含量的影响( ±s)
组别 | 剂量 | 动物数 | 负重游泳时间 | 血清尿素 | 肝糖原 |
mg/kg | 只 | s | mmol/L | mg/g | |
阴性对照组 | 0 | 10 | 366.5 ± 54.3 | 10.7 ± 1.6 | 18.6 ± 1.8 |
低剂量组 | 8.3 | 10 | 469.8 ±67.2 | 9.2± 1.4 | 20.4 ± 1.5 |
中剂量组 | 16.6 | 10 | 577.5 ±73.8* | 8.1±1.1* | 21.2± 1.6 |
高剂量组 | 50.0 | 10 | 692.4± 84.5** | 8.6 ± 0.9* | 25.6±1.9** |
注 : 与阴性对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
2.2 茶氨酸对小鼠运动后血清尿素含量的影响 由表1可见,与阴性对照组比较,茶氨酸中、高剂量组均可降低小鼠游泳后的血清尿素含量(P<0.05)。
2.3 茶氨酸对小鼠肝糖原含量的影响 由表1可见,与阴性对照组比较,茶氨酸高剂量组小鼠的肝糖原含量显著升高(P<0.01)。
2.4 茶氨酸对小鼠血乳酸的影响 由表2可见,与阴性对照组比较,茶氨酸各剂量组小鼠游泳前血乳酸值、游泳后0min血乳酸值均无显著性影响(P>0.05);中剂量组可明显降低小鼠游泳后20min血乳酸值(P<0.05);
2.5 茶氨酸对小鼠血乳酸曲线下面积的影响 由表2可见,与阴性对照组比较,中剂量组小鼠血乳酸曲线下面积显著降低(P<0.05)。
表 2 茶氨酸对小鼠血乳酸值及曲线下面积的影响( ±s)
组别 | 剂量 mg/kg | 动物数 只 | 血乳酸值mmol/L | 血乳酸曲线下面积 | ||
游泳前 | 游泳后0min | 游泳后20 min | ||||
阴性对照组 | 0 | 10 | 3.46±0.77 | 4.76±1.35 | 4.53±1.14 | 134.10±15.64 |
低剂量组 | 8.3 | 10 | 3.23±0.82 | 4.43±1.67 | 4.14±1.08 | 124.55±21.45 |
中剂量组 | 16.6 | 10 | 3.18±1.25 | 4.12±1.45 | 3.67±1.23* | 114.05±19.72* |
高剂量组 | 50.0 | 10 | 3.25±1.18 | 4.26±1.58 | 3.95±1.47 | 120.10±28.79 |
注 : 与阴性对照组比较,*P<0.05
3 结论与讨论
运动性疲劳主要表现为运动耐力下降。肌糖原含量可反映机体能源消耗的快慢或程度,运动中肌糖原消耗的同时,为了维持血糖水平,肝糖原储备量减少。血清尿素含量反映的是机体对运动后代谢产物的分解能力。
负重游泳试验结果表明,与阴性对照组比较,茶氨酸中、高剂量组小鼠负重游泳时间显著延长(P<0.05,P<0.01),表明茶氨酸能够提高小鼠的运动耐力,提高机体抗疲劳的功能,延长运动时间。血清尿素测定结果表明,茶氨酸中、高剂量组均能降低运动后小鼠血清尿素的含量(P<0.05),表明茶氨酸能够加速机体代谢产物的清除,加速疲劳的消解。肝糖原含量测定试验结果表明,茶氨酸高剂量组能显著提高小鼠肝糖原含量(P<0.01),表明茶氨酸能为机体提供较好的能量储备,延缓疲劳的产生,增强运动能力。
综上所述,茶氨酸能明显延长小鼠负重游泳时间,降低运动后血清中尿素和乳酸含量,增加肝糖原的储备,具有缓解体力疲劳的作用。
参考文献:
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