乳腺脂肪组织冰冻制片技术研究

乳腺脂肪组织冰冻制片技术研究

张孟玲， 杨世峰

中国科学院大学附属肿瘤医院 / 浙江省肿瘤医院 / 中国科学院基础医学与肿瘤研究所，浙江 杭州 310022

【摘要】众所周知，在临床病理工作中，组织标本的制片至关重要，制片质量水平会直接影响病理诊断的准确性和及时性。除却对患者产生影响之外，制片技术水平还关系到诊疗队伍的医疗质量和诊疗水平。在乳腺脂肪组织的相关制片过程中，由于其具有独特的质地，导致相关制片工作要难于其他的组织，这一现象对病理技术和病理诊断人员产生的不良影响依然存在，这一点在乳腺脂肪组织的冰冻制片过程中体现得尤为明显。在日常工作中，脂肪组织标本要求做冷冻切片的病例非常常见，如乳腺组织、富含脂肪的淋巴结等。故此，在本文中将针对乳腺脂肪组织冰冻制片技术进行系统的研究和分析，其主要目的在于提升乳腺脂肪组织冰冻制片的质量水平，这对于医疗团队和患者群体都是十分重要且迫切的。

【关键词】乳腺脂肪；冰冻制片；技术措施；研究分析

Research on the Frozen Production Technology of Breast Fat Tissue

ZHANG Meng-ling,YANG Shi-feng

Cancer Hospital of The University of Chinese Academy of Sciences / Zhejiang Cancer Hospital / Institute of Basic Medicine and Cancer,Chinese Academy of Sciences,Hangzhou Zhejiang 310022,China

【Abstract】As is well known,in clinical pathopathological work,the production of tissue specimens is crucial,and the production quality level will directly affect the accuracy and timeliness of pathological diagnosis.In addition to the impact on patients,the production technology level is also related to the medical quality and treatment level of the diagnosis and treatment team.In the relevant production process of breast adipose tissue,due to its unique texture,the relevant production work is difficult to other tissues,this phenomenon on pathological technology and pathological diagnostic personnel still exists,which is particularly reflected in the frozen production process of breast fat tissue.In daily work,cases where fatty tissue specimens require frozen slices are very common,such as breast tissue,fat-rich lymph nodes,etc.Therefore,in this paper,the breast fat tissue freezing production technology,its main purpose is to improve the quality level of breast fat tissue freezing production,which is very important and urgent for the medical team and the patient group.

【Key words】breast fat;frozen production;technical measures;research and analysis

随着时间的推移，国内的社会经济实现了快速的发展，这给予了国内不同领域极大的发展动力，但与此同时，时代发展和社会大众对于不同领域也提出了崭新且更高的要求，其中之一就是医疗事业。在外科疾病，尤其是肿瘤类型诊断过程中，其对于制片质量的要求是比较高的，冰冻制片技术的运用可以保障制片具有良好的质量，所谓的冰冻制片，顾名思义就是在低温环境之下，使得组织快速冷却到一定的硬度，后续进行切片的方式。所以，在接下来的文章中就将针对乳腺脂肪组织冰冻制片技术进行详尽的阐述，希望对于后续制片技术发展起到一定的借鉴意义和作用。

1乳腺脂肪组织冰冻制片的材料

在冷冻切片机方面可以选择：Thermo Cryotome FSE型设备；冰冻切片刀方面可以选择：LEICA切刀^[1]；在包埋剂方面可以选择配套的：Thermo冰冻切片包埋剂(OCT，opti-mum cutting temperature compound)；在另外一些制片过程中使用的试剂方面均可以选择国产试剂，主要包含以下几种，分别是苏木素染液、乙醇、伊红等等^[2]。

2乳腺脂肪组织冰冻制片技术环节分析

(1)制片准备工作环节：首先，为了确保在工作时间内，是采用的冷冻切片机设备能够正常进行运转，相关的日常维护工作是必不可少的，相关的工作人员一定要重视起来，需要及时补充制冷剂，确保切片机的刀片始终处于锋利状态，这样才能保障冰冻制片的最终质量，如不重视冰冻制片过程中冷冻切片机的维护工作，不仅会影响切片的最终质量，还会对设备的使用寿命造成影响，从而形成一定的损失，因此一定要将切片机的维护工作做到位^[3]；为了使得缩短制片过程中的冷冻时间，工作人员可以将冷冻切片机做到二十四小时待机，并且提前一个小时进行开机预制冷。除此之外，相关的工作人员对于一系列的材料也需要第一时间检查，包含软毛刷、玻片、铅笔、镊子、0CT等材料都需要进行检查，发现问题需要第一时间进行处理，避免在组织冰冻制片过程中出现材料缺失或者是材料具有问题的情况，这对于乳腺脂肪组织冰冻制片是比较重要的。(2)制片的取材：乳腺脂肪组织冰冻制片，所需要的乳腺组织必须是足够新鲜的，并且不能浸泡生理盐水或者是固定剂，非必要情况下，尽可能不使用自来水进行清洗，因为一旦对乳腺脂肪组织进行自来水的清洗，会使得组织含水量快速提升，在制片过程中就会形成冰晶情况，这不仅会使得冷冻切片机的刀片受到磨损，还会导致乳腺组织细胞吸水，进而出现不同程度的肿胀或者是变形的情况^[4]。

另外，在取乳腺脂肪组织的过程中，需要尽可能避开脂肪组织，取材的大小需要保障薄厚适中，不能出现乳腺脂肪组织过大或者是过厚的情况，这会引起包埋不全的现象，但是也不能取材过小，这会使得后期的修切出现过度的情况，一般情况下，乳腺脂肪组织冰冻制片过程中，需要将取好的乳腺脂肪组织控制在1.2cm×1.2cm×0.2cmu左右^[5]，在厚度方面技能不超过四毫米，这对于后续的包埋操作是相对比较重要的。(3)包埋技术操作：首先，相关的工作人员需要将少量的OCT放置于样本托盘之上，最后将乳腺脂肪组织放置于OCT之上，并且再次使用OCT包埋组织，目前这种包埋技术操作应用相对比较广泛，因为这种操作方式可以使得乳腺脂肪组织得到比较好的定位，后续添加的OCT的作用也比较明显，能够起到良好的牵拉和展开的作用，这样乳腺脂肪组织就会避免出现褶皱现象，保障乳腺脂肪组织冰冻制片的质量。在实际的操作过程中，于OCT包埋操作阶段，需要将存在的小气泡尽量去除，这样也能够避免对周边的组织产生挤压，避免出现褶皱情况^[6]。(4)切片操作处理：在进行正式操作之前，需要注意的是，乳腺脂肪组织是比较特殊的，其质地比较柔软，并且内含脂肪或者是空泡，这给实际的冷冻机切片带来了一定的难度情况，为了降低切片难度，提升切片质量，乳腺脂肪组织的冷冻温度必须要比普通的标本要低，时间控制方面也需要增长，这样才能保障乳腺脂肪组织冰冻制片的质量。目前来看，乳腺脂肪组织的温度需要控制在-25℃~30℃左右，时间控制在两到三分钟左右，必要情况下可以延长冷冻时间。另外，还需要避免出现冷冻过度的情况，切片呈现碎末状时，操作人员可以使用拇指的指腹，对组织表面进行轻度按压，这样就能够缓解，切片的厚度需要控制在5μm左右，切片的角度需要控制在5度。在实践操作方面，进刀一定要够快，同时用力维持均匀，防止出现切片卷曲、粘连或者是脱片等等现象。(5)固定操作：为了防止乳腺脂肪组织冰冻制片过程中出现脱片的现象，在切片操作完成之后，需要将其放置在温度均衡的烘片箱中数秒，如果是脂肪比较多的制片，可以直接进行文火的烘烤，并且在放入固定液之前，需要将组织于制片的粘贴处放到手背上数秒，主要目的在于增强温度差，这样可以使得二者的粘贴变得更加牢固，在固定液的选择方面并没有非常严格的限制，其中AAF固定液的运用是最为频繁的，效果也比较明显，控制在一分钟左右^[7]，不能低于一分钟，否则会出现固定不充分的现象，同时不能一味延长固定时间，会使得制片速度受到影响。(6)染色操作处理：固定操作完成的乳腺脂肪组织冰冻制片，需要在新鲜的苏木素染液中染色两到三分钟左右，后经过流水冲洗之后，再将其放置在盐酸水溶液当中，保持分化数秒，这是染色操作处理过程中非常重要的一部分，但是时间不能过长，乳腺脂肪组织冰冻制片出现淡红色即可。

经过实践制片经验可以发现，对于容易出现脱片现象的组织没有需要进行分化，即便进行了分化，也不能办法满足后续的使用需求。

3结论

综上所述，就是目前为止针对乳腺脂肪组织冰冻制片技术的研究和探索了，从整体角度上来说，通过以上技术操作改进、完善之后的乳腺脂肪组织冰冻制片过程，能够最大程度上预防脱片现象的发生，并且能够保持乳腺脂肪组织结构的完整性，同时切片能够平整，不会出现组织重叠现象。但同时也需要注意的是，各种材料在乳腺脂肪组织冰冻制片过程中是非常重要的，需要检查并且备好，同时，对相关使用的设备需要进行日常的维护，这样才能保障乳腺脂肪组织冰冻制片的质量。

参考文献

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收稿日期：2021年1月22日

出刊日期：2021年2月25日

引用本文：张孟玲,杨世峰.乳腺脂肪组织冰冻制片技术研究[J]. 当代介入医学, 2021, 1(04) : 1-2. DOI: 10.12208/j.jcim.2021.04.003

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