炮制对产地不同的马钱子中马钱子碱含量影响分析

(整期优先)网络出版时间:2022-04-25
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炮制对产地不同的马钱子中马钱子碱含量影响分析

王祯毓(曾用名:王红玲) 通讯作者 韩俊云

(内蒙古自治区中医医院 药学部 010010)



摘要:目的:探究炮制对产地不同的马钱子中马钱子碱含量影响。方法:运用高效液相色谱法测定不同产地马钱子与不同炮制品中马钱子碱含量。结果:碱含量由低到高的顺序为醋浸砂炒品、醋浸品、醋煮砂炒品、樟帮尿泡品、醋煮品、砂烫品、油炸品。由低到高顺序为:海南、湖北、四川、缅甸、云南、印度、广西、越南。结论:马钱子经过不同炮制方法,碱含量存在差异,且不同产地含量也差异明显。

关键词: 马钱子;炮制;碱含量;产地不同;高效液相色谱法;

前言

马钱子属于马钱科植物,又称番土鳖,性温,味苦,有大毒,具有良好的散结通络之效。马钱子以生物碱为主要成分,由土的宁与马钱子碱组成,毒性较大,因此,该药在未经炮制时不可内服,仅可外用。马钱子较多用于治疗偏瘫、跌打损伤、风湿等疾病,炮制方法很多[1],且方法不同所得到的的马钱子碱含量不同,同时也影响着治疗效果。因此,准确掌握炮制品的含量高低对治疗效果具有重要意义。现报道如下。

1 材料与方法

    1. 仪器与试药

对照品由中国药品生物制品检验所提供。柱温箱(型号:CTO-20A),自动进样器(型号:SIL-20A),紫外检测器(型号:SPD-20A), LC-20AT泵,离心机(型号:Eppendorf),工作站(型号:LC-Solution),超声清洗器(生产单位:昆山市超声仪器公司;型号:KQ-100DE)。纯净水,冰醋酸作为优级纯,分析纯包括盐酸、三乙胺、乙醇(95%的体积分数);色谱级:甲醇以及乙腈。采用云南、湖北以及越南等地方的药材。

    1. 色谱条件

流动相(乙腈-水-冰醋酸-三乙胺系统),色谱柱(AlltimaC18( 4.6 mm ×150.0mm,5 μm)),流速( 1.0 mL/min),波长设置为254nm,柱温设置为30 ℃。

    1. 制备对照品溶液

称取0.6g马钱子,置入锥形瓶,加入水-乙醇-盐酸溶液(50:50:1),行40min超声,合理补质量,将上述溶液过滤后取约5ml滤液置入25ml容量瓶,加甲醇定容,再次行0.22µm滤膜过滤,留置备用。

    1. 炮制方法

樟帮尿泡品:取童子尿液,将马钱子置入,浸泡共7中,药材膨胀为宜,随后去除,使用流动清水进行漂洗,共2-3周,在沥干以后将表面绒毛除去,水漂7天,捞出沥干,使用樟刀将其切成片,待干燥即可。

醋浸品:使用蒸馏水连续浸泡马钱子两天,在润12小时取醋酸溶液(体积分数为5%),持续浸泡5天,并使用水浸泡3天,取出,待干燥即可。

醋浸砂炒品:按照上述醋浸品方式进行醋浸,取铁锅放置细砂进去,加热为230℃,放入酸浸马钱子,热砂翻炒,待马钱子酥脆取出。

醋煮品马钱子:使用蒸馏水进行浸泡,共2天,饱和浸润12小时以后,取出并沥干,切为1.5mm左右薄片,在煮锅内放置,并置入5%醋酸溶液,小火煮2小时后取出干燥。

醋煮砂炒品:取砂炒马钱子在醋酸溶液(体积分数为5%)中放置,煎煮2小时,取出,待干燥即可,随后取细砂布满的铁锅放置,将其加热至230℃,不断使用热砂对马钱子掩埋,若药材质地酥脆,且边缘呈现卷曲情况时则可停止加热。

砂烫品:将干净细砂置于铁锅内,将其加热至230℃,放入马钱子并不但翻炒,待出现爆裂声后,持续3分钟,砂烫成功后将其迅速盛出。

油炸品:首先提前对铁锅进行预热,温度设置为230℃,置入400ml大豆油(可食用级),投入马钱子进行油炸,待表现为金黄色后,将其捞出沥干,随后冷却。

    1. 制备样品

对上述不同炮制方法得到的药材进行粉碎后过筛,准确称量0.5g药材并放入锥形瓶,置入水-乙醇-盐酸溶液(50:50:1),然后将瓶子密封,超声后于20~25°条件下放置1d(注意对损失的质量进行补充),过滤上述溶液,废弃初滤液,并取约5ml续滤液,置入25ml容量瓶,加甲醇定容待检。

    1. 精密度实验

将配置好的样品置入高效液相色谱仪中,持续进样共6次,对RSD值进行计算。

    1. 测定含量

按照回归方程与峰面积,计算不同炮制品、不同产地的马钱子碱含量。

  1. 结果

2.1 不同马钱子炮制品中马钱子碱含量

如表1所示,碱含量由低到高的顺序为醋浸砂炒品、醋浸品、醋煮砂炒品、樟帮尿泡品、醋煮品、砂烫品、油炸品。

表1:不同马钱子炮制品中马钱子碱含量

组别

马钱子碱含量平均值(m/mg)

RSD

与生品含量比例

油炸品

0.142

2.56

90.65

砂烫品

0.113

1.89

73.19

醋煮品

0.092

1.20

62.56

樟帮尿泡品

0.059

1.83

46.17

醋煮砂炒品

0.031

1.63

42.87

醋浸品

0.042

1.84

32.74

醋浸砂炒品

0.029

1.82

22.32

生品

0.138

1.79

100.00

2.2 不同产地中马钱子碱含量

如表2所示,由低到高顺序为:海南、湖北、四川、缅甸、云南、印度、广西、越南。

表2:不同产地中马钱子碱含量

组别

马钱子碱含量(%)

海南

0.71

湖北

0.80

四川

0.84

缅甸

0.97

云南

1.17

印度

1.25

广西

1.39

越南

1.54



  1. 总结

马钱子属于一种剧毒类药物,但其毒性成分却生物活性最高,为卫生局规定的毒性药品。为了避免毒性所产生的损害,常采用的手段为炮制][2]。至今,马钱子具有很多炮制方法,如砂烫法与油炸法。近年来,我国医疗技术飞速发展,炮制法得到很差程度改良,逐渐出现醋煮砂炒、醋酸浸砂、醋酸浸法等炮制法。测定马钱子经过不同炮制法后的马钱子含量有助于合理运用药物[3],采用高效液相检验马钱子碱含量对于控制、观察药材质量具有重要的意义[4]。促进疗效提升本次研究结果可见,马钱子采用不同方法炮制以后,碱含量由低到高的顺序为醋浸砂炒品、醋浸品、醋煮砂炒品、樟帮尿泡品、醋煮品、砂烫品、油炸品。此外,在对不同产地的马钱子碱含量进行分析时,结果可见,由低到高顺序为:海南、湖北、四川、缅甸、云南、印度、广西、越南,海南含量最低,为0.71%,越南含量最好,为1.54%,其碱含量可能与生产湿度、温度与环境等存在相关性。

综上所述:使用高效液相检验马钱子中碱含量效果显著,具有操作便捷,花费低廉等优点。马钱子经过不同炮制方法,碱含量存在差异,且不同产地含量也差异明显。因此,有效改良马钱子的炮制方法有助于毒性降低,安全范围增加,对临床具有重要意义。



参考文献:

[1]王明昭,齐武强.炮制对不同产地马钱子中马钱子碱含量的影响[J].中医学报,2017,32(7):1236-1238.

[2]徐敏.分析中药炮制对药物性能功效及理化性质的影响评价[J].临床医药文献电子杂志,2017,4(12):2341.

[3]董辉,南洋,李先娜.基于生理生化指标的马钱子毒性作用研究[J].现代养生(下半月版),2017,(6):39-41.

[4]王艳宏,齐笑,关枫, 等.马钱子总碱中2种成分的平衡溶解度、油水分配系数、体外透皮特性[J].中成药,2017,39(10):2034-2038.