新疆应用职业技术学院 新疆奎屯 833200
摘要 目的:观察荒漠肉苁蓉提取物对小鼠润肠通便的作用。方法:采用复方地芬诺酯灌胃小鼠,诱发便秘的实验模型,给与一定剂量荒漠肉苁蓉提取物后采用墨汁实验观察荒漠肉苁蓉提取物对小鼠小肠运动的影响,记录排便时间、粪便粒数和粪便重量的变化。结果:墨汁实验表明,与便秘模型组小鼠比较,荒漠肉苁蓉提取物中、高剂量组的小肠墨汁推进率明显增加( P<0.05) ;通过记录小鼠首次排黑便时间、5h 排黑便总量和排黑便粒数发现,与便秘模型组小鼠比较,荒漠肉苁蓉提取物中、高剂量组能明显缩短模型组小鼠首次黑便时间,高剂量组明显增加 5h 黑便粒数、明显增加 5h 黑便总量( P<0.05)。结论:荒漠肉苁
蓉提取物能促进小鼠小肠运动,具有润肠通便的效果。
关键词 荒漠肉苁蓉;便秘小鼠;润肠通便
新疆荒漠肉苁蓉(Cistanche deserticola)为列当科植物,产于我国新疆等荒漠化干旱地区,是一种具有极高药用价值的中草药,有“沙漠人参”的美誉,其性温,味苦、咸,归肾、大肠经。具有补肾阳、益精血、润肠通便等功效。本研究通过给与小鼠不同剂量荒漠肉苁蓉提取物,观察肉苁蓉提取物润肠通便的作用。
资料与方法
1 动物分组
ICR小鼠,雄性,体重18-22g,50 只,随机分为高、中、低剂量受试样品组、阴性对照组和模型对照组,每组10只。
2 样品和主要试剂
荒漠肉苁蓉提取物:某药业有限公司提供,为水煎煮提取浓缩干燥而得,主要成分粗多糖,提取比例约10%,人体日用量为每天0.36g,阴凉、干燥处保存。活性炭;复方地芬诺酯片;墨汁的配制,准确称取阿拉伯树胶100g,加水800ml,煮沸至溶液透明,称取活性炭 50g 加至上述溶液中煮沸三次,待溶液凉后加水定溶到 1000ml,于冰箱中 4℃保存。
3 主要仪器
AL104电子分析天平;DS-671 防水电子秤;注射器、测量尺、手术器械、测量尺。
4 剂量选择、受试样品给予方式和时间
以人体推荐量的10倍换算为小鼠中剂量组,另设高、低剂量组。受试样品连续灌胃 7d,每天一次,每次灌胃体积为0.2ml/10g·BW。低剂量组:0.03 g/kg
中剂量组:0.06g/kg,高剂量组:0.18g/kg,分别相当于人体服用剂量的5,10,30倍。
5 实验方法
5.1 小肠运动实验[1]
各组小鼠经口给予受试样品连续 7d。实验结束前禁食不禁水 16 小时,各实验组灌胃给予复方地芬诺酯和高、中、低剂量受试药物,模型对照组灌胃给予复方地芬诺酯(5.0mL/kg·bw),阴性对照组给予蒸馏水,按 0.2mL/10g 灌胃。 30min 后各剂量组、阴性对照组及模型对照组给予含相应受试样品的墨汁碳末指 示剂 0.2mL/10g,25min 后颈椎脱臼处死动物,剖腹分离肠系膜,剪取上端至幽门、下端至回盲部的肠管,将小肠小心铺平拉直于水平面,从幽门向小肠回盲部方向,测量小肠总长度及墨汁碳末指示剂推进的长度,并记录。以墨汁推进率(P)表示小肠运动,按照以下公式,墨汁推进率数据转换为X,对X值进行统计分析。
X=Sin-1 墨汁推进率(P)= 墨汁推进长度(cm)/ 小肠总长度(cm)×100%
5.2 排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定[2]
各组小鼠经口给予受试样品连续 7d。实验结束前禁食不禁水16h,各实验组和模型对照组灌胃给予复方地芬诺酯(10.0mL/kg·bw)。30min 后各剂量组、 阴性对照组及模型对照组给予含相应受试样品的墨汁碳末指示剂 0.2mL/10g。将各组动物重新放入小鼠 笼,单独安置,正常饮水、进食,分别记录每只小鼠首次排出黑便时间、5h 内粪便粒数和排黑便总重量。
6 实验数据统计
数 据均以(x±s )表示,墨汁推进率进行数据转换(见实验方法),用统计软件 SPSS16.0 对数据进行单因素方差分析及两个独立样本的 t 检验, P<0.05 具有统计学意义。
7 结果判定
小肠运动实验和排便时间任一项实验结果阳性,同时,5小时内排黑便粒数或排黑便重量任一项结果阳性,可判定药物结果阳性。
实验结果
1 小肠运动实验
小鼠灌胃给药 7d 后,与阴性对照组比较,模型对照组小鼠墨汁推进率显著降低,表明成功建立小鼠便秘模型。与模型对照组比较,受试物高、中剂量组小鼠墨汁推进率均增高,表明受试物小鼠小肠运动实验结果阳性。结果见表 1。
_
表 1 荒漠肉苁蓉提取物对小鼠小肠运动的影响(x±s ,n=10 )
组 别 | 剂量 | 推进率/% | X(推进率的转换值) |
阴性对照组 | 0g/kg | 66.32±5.22 | 0.93±0.06 |
模型对照组 | 0g/kg | 38.52±6.26△△ | 0.62±0.07△△ |
高剂量组 | 0.03g/kg | 52.78±5.63* | 0.80±0.11* |
中剂量组 | 0.06g/kg | 49.08±7.14* | 0.75±0.09* |
低剂量组 | 0.18g/kg | 40.43±6.81 | 0.68±0.10 |
注:与阴性对照组比较△△P<0.01,与模型对照组比较 *P<0.05
2 排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定
与阴性对照组比较,模型对照组小鼠首次排黑便时间延长、5h排便粒数减少、5h黑便总量减少,差异有显著性,表明便秘模型成功。与模型对照组比较,荒漠肉苁蓉提取物高、中剂量组小鼠首次排黑便时间缩短,高剂量组5h内排黑便粒数和排黑便重量均增加,差异有显著性,表明荒漠肉苁蓉提取物对小鼠排便时间、5h内粪便粒数和粪便重量的测定实验结果阳性。结果见表2。
表 2 荒漠肉苁蓉提取物对小鼠首次排黑便时间、5h 排黑便总
_
量 和排黑便粒数的影响(x±s ,n=10 )
组 别 | 剂量 | 首粒黑便时间(min) | 粪便粒数 | 粪便重量(mg) |
阴性对照组 | 0g/kg | 85.62±21.31 | 15.3±3.45 | 0.51±0.08 |
模型对照组 | 0g/kg | 128.46±30.07△△ | 6.6±3.57△△ | 0.29±0.10△△ |
高剂量组 | 0.03g/kg | 102.68±22.39* | 12.2±2.89* | 0.43±0.11* |
中剂量组 | 0.06g/kg | 100.54±26.71* | 9.4±3.01 | 0.36±0.12 |
低剂量组 | 0.18g/kg | 118.53±31.29 | 8.5±2.36 | 0.32±0.09 |
注:与阴性对照组比较, △△P<0.01;与模型对照组比较, *P<0.05
讨 论
随着人口老龄化和现代社会工作压力的增加,老年性便秘和习惯性便秘发病率明显增加,便秘病因与多种因素有关[3]。严重影响了人们生活质量,而且由于便秘引起的疾病,如内分泌失调、轻度毒血症、肠梗阻等,严重威胁着人类健康。慢性便秘病程反复,迁延不愈 [4]。肉苁蓉属于润肠通便类中药,具有作用缓和、便而不泻的特点,尤其适合于老年人、产妇和身体虚弱等人群的便秘治疗。
本研究中小鼠小肠运动和排便时间、 5h 内排黑便粒数和排黑便重量两组实验结果均为阳性。因此,荒漠肉苁蓉提取物对改善胃肠道功能具有润肠通便的作用,本研究为其临床应用提供一定的实验依据。
参考文献:
[1] 陈奇.中药药理研究方法学 [M]. 2 版,北京:人民卫生出版社,2006:324-326.
[2] 李仪奎.中药药理研究方法学 [M]. 2 版,上海:上海科学技术出版社,2006:207.
[3] 熊理守,王艺霖,陈旻湖.慢性便秘的定义和流行病学[J].临床消化病杂志,2013,25(4):230-235.
[4] Pare P,Ferrazzi S,Thompson WG, et al. An epidemiological
survey of constipation in canada:definitions,rates demograph- ics,and predictors of health care seeking[J]. Am J Gastroenterol, 2001,96(11):3130-31377.
3