肠道菌谱分析在粪便细菌学检验中的应用效果

肠道菌谱分析在粪便细菌学检验中的应用效果

赵颖

大庆市 龙凤区疾病预防控制中心 163711

【摘要】目的 分析在粪便细菌学检验中使用肠道菌谱分析的效果。方法 选取2020年1月-5月采集的粪便标本20份进行本次研究，所有标本在采集后直接涂片做革兰染色，用显微镜观察并统计标本中的细菌数量、种类。结果 统计后，G-杆菌的数量最多，占比40.00%，其次是G+球菌30.00%、真菌20.00%、无细菌生长10.00%，粪便样本中的细菌数量和种类较清晰。结论 利用肠道菌谱分析使粪便细菌学检验的敏锐度和清晰度更高，可快速明确粪便样本中的细菌数量和种类，更值得使用。

【关键词】肠道菌谱分析；粪便细菌学检验；药敏试验

[Abstract] Objective To analyze the effect of intestinal flora analysis in fecal bacteriological test. Methods 20 fecal specimens collected from January to may 2020 were selected for this study. All specimens were directly smeared for Gram staining after collection. The number and species of bacteria in the specimens were observed and counted by microscope. Results after statistics, the number of G-bacilli was the largest, accounting for 40.00%, followed by G + cocci 30.00%, fungi 20.00% and bacteria free growth 10.00%. The number and species of bacteria in fecal samples were clear. Conclusion intestinal flora analysis can improve the sensitivity and clarity of fecal bacteriological test, and can quickly determine the number and species of bacteria in fecal samples, which is more worthy of use.

【 key words 】 intestinal flora analysis; Fecal bacteriological examination; Drug sensitivity test

在过往资料中，常能看到粪便细菌学检验在沙门菌、志贺菌检测方面的作用，但尚未满足临床医学需求【1】。所以，在粪便细菌学检验中较重视肠道菌谱分析，该种分析方式不仅能快速的凸显出粪便标本中细菌的形态和数量，还能帮助相关人员快速确定细菌类型，能为血清学鉴定、药敏试验提供帮助。所以，本次研究重点分析肠道菌谱分析在粪便细菌学检验中的应用效果，详见下述。

1 资料和方法

1.1一般资料

选取2020年1月-5月采集的粪便标本20份进行本次研究，所有标本在采集后直接涂片做革兰染色，用显微镜观察。共有12份男性粪便样本、8份女性粪便样本，年龄21-78岁，均（46.53±7.82）岁。

1.2方法

①培养基用院内自制的5%的羊血平皿、SS平皿、1%的山梨醇麦康凯平皿。同时，使用法国梅里埃生物有限公司提供的培养基干粉、药敏试纸等。生化鉴定管选择杭州天和微生物生物试剂有限公司生产的产品。②选择朗珈生物医学工程有限公司生产的BX41显微镜和JVCTK-C1381EG彩色摄像仪。③所有样本均直接涂片，进行革兰染色，然后放到显微镜下观察，记录各类细菌的形态和数量，随后全部录入计算机中。④还需为每份样本分别接种营养平皿（做4区划分），将保温箱的温度调整到36度，并观察24小时、48小时、72小时细菌在营养平皿4区上的生长情况，以及使用+号标注细菌的生长量，如：第4区上有细菌并超过10个，可标注为4+。同时，观察细菌的形态特点。⑤另外，需提取一部分样本分别接种BA、SS、Mac培养基，温度控制在36度，并观察24小时、48小时、72小时的细菌生长情况，将无色、透明、不发酵乳糖等可疑菌落挑出做菌种鉴定。⑥对可能导致疾病的菌落进行EPEC抗血清凝集试验，同时，利用K-B法做药敏试验。

1.3观察指标

统计标本中的细菌数量、种类。

2 结果

统计后，G-杆菌的数量最多，占比40.00%，其次是G+球菌30.00%、真菌20.00%、无细菌生长10.00%，粪便样本中的细菌数量和种类较清晰。详见表1。

表 1 统计标本中的细菌数量、种类[n(%)]

3 讨论

人类肠道中的微生物主要包括细菌、病毒、病原虫等，其中，细菌的占比最多，大概在微生物总量的20%-30%。有资料显示【2】，通过粪便细菌学检验，正常人粪便中的细菌种类有常居菌和过路菌两种，大概有99%以上的细菌属于厌氧菌，需氧菌的数量占比不足1%，而厌氧菌中常以G+菌为主，如：嗜酸性乳杆菌、双歧杆菌类、粪链球菌、埃希菌类。另有资料显示【3】，人体对营养物质的消化、吸收等过程，不仅能防御疾病，还能保持人体与外界环境的平衡，若在某种因素下，使体内的菌群受到破坏，会降低肠道微生物间的相互制约效果，打乱肠道微生态环境，使肠道出现菌群失调的情况，较容易降低肠道功能，甚至频繁出现腹泻【4】。在临床医学中，较重视病因，容易忽略生理学，但粪便细菌学检验能有效检测肠道微生物，再配合肠道菌谱分析能较好的监测肠道菌群，不仅能快速找到致病菌，利用致病菌进行药敏试验，还能标注出菌群种类和数量，改善菌群失调的现象，能提高临床医学的检查、诊治效果。如：在进行药敏试验的时候，能观察到致病菌和抗生素类药物的反应情况，快速找到能大量消杀致病菌的药物，明确药物毒性和药效，尽快将药物投入到临床中使用，争取在较短时间内改善患者的病情【5】。同时，还能推动临床医学发展，使临床医学更重视药敏试验、血清鉴定学、生理学、病理学等，能按需进行粪便细菌学检验，并在检验过程中使用肠道菌谱分析，提高临床医学对粪便标本的检测能力，及对肠道菌群的监测能力，增加临床医学中的可用资料，提高粪便细菌学检验结果的价值，为后续工作提供更多帮助【6】。

本次研究结果显示，统计后，G-杆菌的数量最多，占比40.00%，其次是G+球菌30.00%、真菌20.00%、无细菌生长10.00%，粪便样本中的细菌数量和种类较清晰。说明使用肠道菌谱分析能提高粪便细菌学检验的效果，不仅能细致的观察粪便情况，还能明确标本中的细菌类型、数量等，使检验结果更精确，为临床医学提供更多帮助。

综上所述，在粪便细菌学检验中使用肠道菌谱分析能降低检验难度，尽量多的排除干扰因素，使检验良好进行，同时，快速凸显出细菌的种类、数量等，使检验结果更正确，为临床医学提供更有价值的信息，值得推广。

参考文献

[1]赵会晶,牛淼,吕永强.细菌学及血清学检验在布氏菌病诊断中应用[J].临床军医杂志,2018,(6).682,685.

[2]黄艳飞,李修远,顾海彤,等.感染性腹泻患者病原菌流行趋势及耐药性分析[J].临床检验杂志,2018,(4).314-316.

[3]吴丹,杨君君,杨帆,等.气相色谱-质谱联用法分析粪便中碱性和中性挥发性代谢产物[J].分析化学,2017,(6).837-843.

[4]李轶,闫文娟,刘胜群.急性腹泻患者肠道细菌中多黏菌素耐药基因mcr的调查分析[J].中华医学杂志,2017,(47).3720-3723.

[5]任章银,陈敢敢,江舰.2538例急性腹泻患者粪便标本细菌分布研究[J].检验医学与临床,2017,(10).1469-1472.

[6]伍尚剑,雷国大,谭宗宪,等.采集方法和抗生素对痰样本细菌学检验结果的影响[J].海南医学,2016,(16).2718-2719.