湖南食品药品职业学院 湖南长沙 410208
【摘要】目的 研究雪莲培养物胶囊的免疫调节作用。方法 雌性ICR小鼠200只,按体重随机分成对照组和58.3、116.7、350.0mg/60kg.BW 3个剂量组,小鼠经口灌胃给予受试物一个月后,分别测定免疫功能的各项指标。结果 高剂量组加ConA 孔与不加 ConA孔吸光度的差值和耳壳增重均显著高于对照组(P<0.05),高剂量组小鼠溶血空斑数、血清半数溶血值(HC50) 和吞噬指数 a 均极显著高于对照组(P<0.01),各剂量组小鼠的体重增长值、胸腺体比、脾脏体比、吞噬率、吞噬指数和NK细胞活性与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 雪莲培养物胶囊具有增强免疫力的保健功能。
【关键词】雪莲培养物胶囊;细胞免疫;体液免疫;NK细胞
1材料与方法
1.1材料
1.1.1动物 SPF级ICR小鼠,雌性,体重19.0~21.9g,200只(上海西普尔-必凯实验动物有限公司),生产许可证号为SCXK(沪)2013-0016)。
1.1.2受试物 雪莲培养物胶囊推荐服用量0.7g,含原料当归提取物0.32g(经水提,每1g相当药材8g)、雪莲培养物0.06g,辅料玉米淀粉、硬脂酸镁等。
1.1.3仪器与试剂 2,4-二硝基氟苯(DNFB),绵阳红细胞(SRBC),豚鼠血清,印度墨汁,RPMI1640,刀豆蛋白(ConA),溴化噻唑蓝四氮唑(MTT),异丙醇,水杨酸缓冲液等;电子天平,生物安全柜,酶标仪,二氧化碳培养箱等。
1.2剂量设计和方法
1.2.1剂量设计 该制剂人体推荐量为每天0.7g/60kg.BW,实验设3个剂量组,即58.3、116.7、350.0mg/60kg.BW(分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍),同时设立蒸馏水对照组,连续经口灌胃一个月后,测各项免疫指标。
1.2.2实验方法[1]及分组 将200只健康雌性小鼠随机分成5组。第1组进行小鼠体重和脏体比的测定;第2组进行小鼠细胞免疫功能试验(ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化,DNFB诱导小鼠迟发型变态反应(DTH);第3组进行小鼠体液免疫功能试验(抗体生成细胞检测,血清溶血素测定);第4组进行小鼠单核-巨噬细胞功能试验(小鼠碳廓清,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞);第5组进行自然杀伤细胞(NK)细胞活性测定。
1.3数据统计用SPSS软件进行方差分析。
2 结果
2.1雪莲培养物胶囊对小鼠体重和脏体比的影响
经口给予小鼠不同剂量的雪莲培养物胶囊一个月后,各剂量组小鼠的体重增长值、胸腺体比和脾脏体比与对照组相比,均无显著性差异(P>0.05) 。
表1 对小鼠体重和脏体比的影响(n=10,x±s)
组别 | 体重增长值/g | 胸腺体比/% | 脾脏体比/% |
对照组 | 4.42±1.64 | 0.244±0.021 | 0.418±0.052 |
低剂量组 | 5.12±1.28 | 0.245±0.014 | 0.436±0.035 |
中剂量组 | 4.54±1.22 | 0.230±0.024 | 0.417±0.035 |
高剂量组 | 4.43±1.29 | 0.241±0.015 | 0.420±0.047 |
2.2雪莲培养物对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响
经口给予小鼠不同剂量的雪莲培养物胶囊一个月后,高剂量组加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值和耳壳增重均显著高于对照组(P<0.05)。高剂量组小鼠溶血空斑数和血清半数溶血值均极显著高于对照组(P<0.01)。
表2对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响(n=10,x±s)
组别 | 耳壳增重/mg | 淋巴细胞增殖能力(OD差值) | 溶血空斑数/(个/106脾细胞) | HC50 |
对照组 | 12.0±3.1 | 0.021±0.008 | 72±27 | 70±17 |
低剂量组 | 13.7±1.8 | 0.022±0.005 | 65±19 | 75±24 |
中剂量组 | 14.0±2.7 | 0.025±0.007 | 98±27 | 80±19 |
高剂量组 | 15.8±1.6* | 0.031±0.006* | 113±36** | 91±10** |
注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。下同。
2.3雪莲培养物胶囊对小鼠单核-巨噬细胞功能NK细胞活性的影响
经口给予小鼠不同剂量的雪莲培养物胶囊一个月后,高剂量组小鼠吞噬指数a极显著高于对照组(P<0.01),各剂量组小鼠的吞噬率、吞噬指数、NK细胞活性与对照组相比,均无显著差异(P>0.05) 。
表3 雪莲培养物胶囊对小鼠单核-巨噬细胞功能的影响(n=10,x±s)
组别 | 碳廓清指数a | 吞噬率/% | 吞噬指数 | NK细胞活性/% |
对照组 | 5.16±0.69 | 26.0±6.0 | 0.27±0.10 | 19.9±6.8 |
低剂量组 | 5.71±0.62 | 28.0±4.7 | 0.28±0.11 | 21.5±5.4 |
中剂量组 | 6.07±0.65 | 30.2±6.0 | 0.28±0.08 | 21.2±6.3 |
高剂量组 | 6.60±0.95** | 28.7±7.1 | 0.29±0.10 | 22.9±7.5 |
3结论
雪莲培养物胶囊以58.3m g /kg (低剂量组)、116.7 g /kg(中剂量组)、350.0g /kg(高剂量组) 连续给予小鼠经口灌胃一个月,对小鼠进行免疫功能测定。结果显示:高剂量组加ConA 孔与不加 ConA孔吸光度的差值和耳壳增重均显著高于对照组(P<0.05),高剂量组小鼠溶血空斑数、血清半数溶血值(HC50) 和吞噬指数 a 均极显著高于对照组(P<0.01),各剂量组小鼠的体重增长值、胸腺体比、脾脏体比、吞噬率、吞噬指数和NK细胞活性与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。
上述结果表明,在本试验条件下雪莲培养物胶囊具有增强小鼠免疫功能。
引用文献:
1] 中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范[S].2003-2-14